纯化生长因子蛋白的方法技术

技术编号:8164984 阅读:293 留言:0更新日期:2013-01-08 11:59
一种在使用色谱的纯化顺序中纯化生长因子蛋白的方法,特征在于:-至少一种色谱用多元树脂进行;-所述生长因子蛋白在pH?4到6.2之间时结合至所述多元树脂,并且所述生长因子蛋白在pH>6.3下洗脱,并且生长因子蛋白的洗脱通过向洗脱缓冲液加入精氨酸和/或NaCl来改进。-多元树脂步骤随后是酵母源性亲和配体树脂步骤,这导致产物纯度>90%。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及使用色谱。从天然来源的原料中纯化蛋白是一种挑战,因为感兴趣的蛋白通常仅以痕量存在并伴随以其它生物聚合物例如脂质、蛋白或者甚至细胞片段。另外感兴趣的蛋白往往与生物学功能相关联,所述生物学功能经常在其纯化方法步骤中丧失。纯化生物聚合物例如蛋白质的方法的库是很大的。除了沉淀方法,基于多种材料的色谱方法也是已知的。所述材料常常用化学部分修饰,例如有机离子、阳离子例如质子化氨或部分或完全烷基化的氨。这样的材料用作阴离子交换剂。但是阳离子交换剂也可用于基于感兴趣的蛋白的物理特性的纯化方法,所述物理特性例如性状、分子量和尤其是其电荷。可选地或联合地使用亲和色谱法。本领域已知传统离子交换色谱树脂(例如SP-,CM-, Q-或DEAE琼脂糖FF离子交 换色谱树脂)的一个缺点是蛋白质与树脂的连接仅能在相对低盐浓度(电导率,渗透压浓度等)内,典型地在O. 01-0. 15M的盐(NaCl等)浓度范围内发生。在某些应用中存在能够利用相对温和的纯化条件的需求,其中离子交换色谱步骤施加于所述蛋白,并在有所增加的离子强度下直接(没有进一步稀释)施加至色谱树脂。增加的离子强度对蛋白溶液中的蛋白稳定性有显本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:古斯塔夫·吉尔加姆斯特凡·温厄马亚·蒂迈尔
申请(专利权)人:奥克塔法马股份有限公司
类型:
国别省市:

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