紫杉醇磁性纳米粒及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种紫杉醇磁性纳米粒及其制备方法和用途。紫杉醇磁性纳米粒形态为球形，粒径在50到200nm，包括如下组分：紫杉醇、四氧化三铁、表面活性剂和冻干保护剂；按重量百分比计算如下：四氧化三铁纳米粒0.5-20%、表面活性剂45-65%、冻干保护剂25-45%、紫杉醇0.1-10%。本发明专利技术的特点是通过将紫杉醇制成磁性纳米粒溶液再冻干，不仅提高了紫杉醇的靶向性,且阻止药物聚集析出，具有长期稳定、便于贮藏运输等优点。该制备工艺简单，适合工业化大生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体涉及一种紫杉醇磁性纳米粒及其制备方法及用途。
技术介绍
紫杉醇(Palitaxel，PTX)具有抗肿瘤血管生成作用，在以纤维蛋白凝血酶为载体的血管新模型发现，实验组经小剂量紫杉醇处理后，血管初始形成、血管增长、总体血管生成较对照组分别减少69%，81%和94%，并且血管生成的抑制程度与药物作用时间呈时效关系。紫杉醇抗血管生成的作用机制是促进癌细胞分裂过程中微管蛋白的聚集，从而造成癌细胞凋亡。紫杉醇水溶性差(溶解度仅为O. 006mg/ml),生物利用度低，临床上主要用紫杉醇注射液。目前紫杉醇注射剂使用的助溶剂主要是聚羟乙基蓖麻油与乙醇的混合溶剂，具有心脏毒性、刺激血管、过敏等不良反应。因此，寻找新型的紫杉醇制剂是目前国内外研究的热点之一。磁性纳米材料粒径小，比表面积大，被用于靶向药物载体。它能够通过增强的通透作用将药物靶向输送。由于肿瘤组织中的微血管通透性增加，故癌变组织的渗透性及滞留效应增强，磁性纳米粒能在肿瘤特异性的淋巴外排作用下，选择性地聚集在肿瘤组织，从而达到被动靶向的目的。磁性纳米氧化铁具有良好的生物相容性、可降解性和特殊活性功能集团使其在生物医学方面具有广泛的应用，主要包括以下几个方面(I)磁致肿瘤热疗(2)磁性药物靶向载体(3)生物分离与提纯(4)磁共振成像造影剂。磁性纳米氧化铁稳定、靶向性强和释放速度可控等，可作为靶向药物治疗有效载体。磁性纳米氧化铁的制备方法很多。物理方法有真空冷凝法、物理粉碎法、机械球磨法等。但是物理方法制备的样品一般纯度低、颗粒分布不均、易被氧化，所以在工业生产和试验中很少被采用。化学方法主要有共沉淀法、溶胶-凝胶法、微乳液法、水热法和高温热解法等。用化学方法制备的纳米粒子一般质量较好，颗粒度小，操作方法较为容易，生产成本低。
技术实现思路
技术问题本专利技术的目的是提供一种紫杉醇磁性纳米粒及其制备方法及用途。技术方案本专利技术的紫杉醇磁性纳米粒，其形态为球形，粒径在50到200nm，包括如下组分紫杉醇、四氧化三铁、表面活性剂和冻干保护剂；按重量百分比计算如下四氧化三铁纳米粒O. 5-20%表面活性剂45-65%冻干保护剂25-45%紫杉醇O. 1-10%。本专利技术的紫杉醇磁性纳米粒的制备方法包括以下步骤I).取保存在正己烷中的油酸包裹的四氧化三铁，磁吸附分离除去正己烷；加有机溶剂，使其分散均匀得溶液A ；2).另取表面活性剂溶于有机溶剂，至完全溶解得溶液B ； 3).将溶液B加入溶液A中，然后加入紫杉醇，使其溶解；4).将上述步骤3)得到的有机相溶液缓慢滴入水中，探头超声；5).透析24小时，得紫杉醇磁性纳米粒溶液；6).将步骤5)所得紫杉醇磁性纳米粒溶液再加入冻干保护剂，冻干即得紫杉醇磁性纳米粒冻干粉。其中所述的有机溶剂为四氢呋喃、二甲基亚砜、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿中的一种或几种。所述的表面活性剂为吐温80、泊洛沙姆188、卵磷脂、卖泽51中的一种或几种合用。油酸包裹的四氧化三铁与有机溶剂的体积比为1:5到1:20。有机相溶液与水的体积比例为1:5到1:15。有机相溶液向水注入的过程中探头超声时间为3 10分钟。所述的冻干保护剂为甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、乳糖、葡萄糖、麦芽糖或海藻糖中的一种或几种混用。该紫杉醇磁性纳米粒联合人转运蛋白ABCG2单克隆抗体McAb用于肿瘤的治疗。有益效果本专利技术通过将紫杉醇制成磁性纳米粒溶液再冻干溶解性好，不仅提高了紫杉醇的靶向性，且阻止药物聚集析出，具有长期稳定、便于贮藏运输等优点。本专利技术制备的紫杉醇磁性纳米粒(NPs-PTX)联合转运蛋白ABCG2的单克隆抗体作用于荷多发性骨髓瘤癌干细胞(丽CSCs)的N0D/SCID小鼠，用ABCG2单克隆抗体联合NPs-PTX通过靶向MM CSCs表面ABCG2分子将NPs-PTX特异性输送到MM CSCs，通过NPs-PTX缓释和滞留效应，将PTX靶向丽PTX对丽CSCs细胞的毒性。附图说明图I.紫杉醇磁性纳米粒的形貌图，图2. NPs-PTX对荷瘤小鼠体内杀伤效应，图3. McAb+NPs-PTX对JJN3CD138TD3C细胞致N0D/SCID荷瘤鼠肿瘤组织的影响(200X )，图 3A 为对照组，图 3B 为 McAb+NPs-PTX 组·图4A. McAb+NPs-PTX对JJN3细胞凋亡的影响，图4B. McAb+NPs-PTX对JJN3细胞周期的影响。具体实施例方式实施例I、紫杉醇磁性纳米粒的制备精密量取Iml保存在正己烷中的油酸包四氧化三铁，乙醇洗3次；加IOml四氢呋喃，水浴超声使其分散均匀；另取2g伯洛萨姆188、0. 8g吐温80溶于15ml四氢呋喃，超声至完全溶解后加入分散均匀的油酸包四氧化三铁的四氢呋喃溶液中，然后加入25mg紫杉醇，涡旋使其溶解；另取150ml水于烧杯中，将上述溶液缓慢滴入水中，超声IOmin ;透析24小时；加入2. 25g甘露醇，超声使其溶解；溶液分装至棕色小瓶(3ml每瓶)，冻干即得紫杉醇磁性纳米粒。Brookhaven电位粒度仪测定粒径为149nm,邻二氮菲比色法测定铁含量为I. 059mg 每瓶。实施例2、紫杉醇磁性纳米粒的制备 精密量取O. 5ml保存在正己烷中的油酸包四氧化三铁，乙醇洗2次；加51111四氢呋喃，水浴超声使其分散均匀；另取I. 0480g泊洛沙姆188、0. 5g吐温80，溶于IOml四氢呋喃，超声至完全溶解后加入分散均匀的油酸包四氧化三铁的四氢呋喃溶液中，然后加入12. 5mg紫杉醇，超声使其溶解；另取IOOml水于烧杯中，将上述溶液缓慢滴入水中，超声3min ;透析24小时；加入I. 15g蔗糖，超声使其溶解；溶液分装至棕色小瓶(3ml每瓶)，得紫杉醇磁性纳米粒冻干粉。Brookhaven电位粒度仪测定粒径为145nm。邻二氮菲比色法测定铁含量O. 7986mg每瓶· O实施例3、紫杉醇磁性纳米粒的制备精密量取O. Iml保存在正己烷中的油酸包四氧化三铁，乙醇洗2次；加3ml丙酮，水浴超声使其分散均匀；另取O. 4g泊洛沙姆188，溶于2ml丙酮，超声至完全溶解后加入分散均匀的油酸包四氧化三铁的丙酮溶液中，然后加入I. 5mg紫杉醇，超声使其溶解；另取15ml水于烧杯中，将上述溶液缓慢滴入水中，超声3min ;透析24小时；加入O. 25g麦芽糖，超声使其溶解；溶液分装至棕色小瓶(3ml每瓶)，得紫杉醇磁性纳米粒冻干粉。Brookhaven电位粒度仪测定粒径为74nm。邻二氮菲比色法测定铁含量O. 9986mg每瓶· O实施例4、药效学实验本专利技术方式制备的紫杉醇氧化铁纳米粒(NPs-PTX)联合人转运蛋白ABCG2单克隆抗体McAb (McAb)进行药效学实验。一、材料药物本专利技术方式制备的紫杉醇磁性纳米粒，紫杉醇注射液(购自四川太极制药有限公司)。细胞株与抗体JJN3细胞够自中国科学院基础医学研究所细胞中心；CD138、⑶34单抗够自德国MiltenyiBiotec公司，人ABCG2单抗够自美国eBioscicence公司，动物4 6周龄N0D/SCID鼠够自中国医学科学院实验动物研究所二、方法及结果N0D/SCID 鼠，背部皮下注射 JJN3CD138XD34-细胞，I X 1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种紫杉醇磁性纳米粒，其特征在于：其形态为球形，粒径在50到200nm，包括如下组分：紫杉醇、四氧化三铁、表面活性剂和冻干保护剂；按重量百分比计算如下：FDA00002271975300011.jpg

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：熊非，杨翠萍，顾宁，窦骏，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：