一种快速检测O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的胶体金测试试纸条制造技术

本实用新型专利技术涉及一种快速检测O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的胶体金测试试纸条，包括底板、样品垫、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜I、II及III、包被膜和吸水纸，其中包被膜的底面粘贴在底板上面，在该包被膜两端的上面分别粘贴玻璃纤维膜I和吸水纸，在该玻璃纤维膜I远离包被膜一端的上面粘贴玻璃纤维膜II，在玻璃纤维膜II远离包被膜一端的上面粘贴玻璃纤维膜III，在玻璃纤维膜III远离包被膜一端的上面粘贴样品垫；在包被膜上面设有检测线I、II、III和质控线，所述检测线I、II及III分别包被抗O型口蹄疫病毒、抗猪瘟病毒及抗猪蓝耳病病毒的单克隆抗体，质控线包被抗鼠抗体。该试纸条特异性好、灵敏度高、检测速度快。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术属于兽类疫病检测
，具体涉及一种能同时对O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒进行检测的胶体金三联检测试纸条，可用于动物疫病流行病的检测与调查。
技术介绍
口蹄疫、猪瘟和猪蓝耳病都是流行于兽类中的烈性传染病，严重威胁畜牧业的正 常发展，养殖场的兽类一旦感染这些病毒，将造成严重的经济损失。口蹄疫(foot and mouth disease，FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种传染性疫病，对偶蹄动物，如猪、牛、羊，危害严重，是OIE法定报告的动物疫病，也是我国一类动物疫病。该病传播途径多、速度快，曾多次在世界范围内暴发流行，造成巨大政治、经济损失。目前，有三分之二的OIE成员国流行FMD，时刻威胁着无FMD国家和地区的家畜安全和畜产品贸易。口蹄疫病毒属于微核糖核酸病毒科口蹄疫病毒属。其最大颗粒直径为23纳米，最小颗粒直径为7— 8纳米。目前已知口蹄疫病毒在全世界有七个主型c A、O、C、南非I、南非2、南非3和亚洲I型，以及65个以上亚型。其中O型口蹄疫病毒为全世界流行最广的一个血清型。猪瘟(classical swine fever，CSF)是对养猪业危害最为严重的疫病之一。在危害级别上，它是我国一类动物疫病，OIE法定报告的动物疫病；按照OIE以前的疫病分类方法，是OIE A类动物疫病。猪瘟是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性、发热、接触性传染传染病，具有高度传染性和致死性。1885年首先在美国发现，以后传播到世界各大洲，中国大部分省都有发生。其主要通过直接接触，或由于接触污染的媒介物而发病。消化道、鼻腔粘膜和破裂的皮肤均是感染途径。一年四季都可发生，以春夏多雨季节为多。猪蓝耳病，正式名称为猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive andrespiratory syndrome, PRRS),是由猪蓝耳病病毒引起以妊娠母猪繁殖障碍及各种年龄猪，特别是仔猪的呼吸道疾病为特征的一种严重的传染性疫病。1987年，美国首次发现此病，由于当时难以确定病原，便称之为猪神秘病、猪不育及呼吸综合征。199(Γ1991年冬，西欧出现本病，蔓延迅速。在此期间，PRRS在各发达国家养猪场引发了空前的“流产风暴”，造成了巨大的经济损失。我国首先于1995年底在华北地区规模化猪场开始发现PRRS疫情。其后，数年间我国大部分养猪地区都有此病的发生和流行。PRRS现已遍布于全世界主要养猪国家和地区，已经成为威胁养猪业健康发展的主要疫病之一。由此可见，O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒会对畜牧业造成严重的危害，这也间接导致了肉类市场供求关系混乱、肉类产品出口受阻、政府财政负担加重和公众恐慌，因此对兽类是否被O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒感染进行检测具有非常重大的意义。目前，对O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的诊断方法主要有病原学检测、血清学试验诊断等方法。但病原学检测方法因其病毒分离时间长，要求条件高，分离率低等因素的影响，很难对样品进行大批量检测；而采集样品进行血清学试验，对仪器设备和操作人员有较高的要求，不易于在基层的推广。因此，上述两种方法在使用中受到很大的限制。
技术实现思路
本技术目的在于提供一种操作方便、快速、有效地检测O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的胶体金测试试纸条。为了实现上述目的，本技术采用如下技术方案一种快速检测O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的胶体金测试试纸条，试纸条包括底板、样品垫、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜I、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜11、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜III、包被膜和吸水纸，其中，包被膜的底面粘贴在底板上面，在该包被膜两端的上面分别粘贴玻璃纤维膜I和吸水 纸，在该玻璃纤维膜I远离包被膜的一端的上面粘贴玻璃纤维膜II，在玻璃纤维膜II远离包被膜的一端的上面粘贴玻璃纤维膜III，在玻璃纤维膜III远离包被膜的一端的上面粘贴样品垫；在所述包被膜的上面设有检测线I、检测线II、检测线III和质控线，所述检测线I包被抗O型口蹄疫病毒的单克隆抗体，检测线II包被抗猪瘟病毒的单克隆抗体，检测线III包被抗猪蓝耳病病毒的单克隆抗体，质控线包被抗鼠抗体。所述玻璃纤维膜I为涂覆胶体金颗粒标记抗O型口蹄疫病毒的单克隆抗体的玻璃纤维膜I，所述玻璃纤维膜II为涂覆胶体金颗粒标记抗猪瘟病毒的单克隆抗体的玻璃纤维膜II，所述玻璃纤维膜III为涂覆胶体金颗粒标记抗猪蓝耳病病毒的单克隆抗体的玻璃纤维膜III。具体的，抗O型口蹄疫病毒的单克隆抗体、抗猪瘟病毒的单克隆抗体、抗猪蓝耳病病毒的单克隆抗体及抗鼠抗体分别固定于包被膜上并呈四条线平行排列，形成所述的检测线I、检测线II、检测线III和质控线。上述的O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒抗体均为高纯度的单克隆抗体，按照本领域的常规技术即可制得，故此处不再赘述。底板可以用PVC材料制成，包被膜可以是硝酸纤维素膜。本技术采用双抗体夹心法检测抗原，通过对金标记抗体pH、浓度以及包被膜上包被抗体浓度的调整，使其能够产生特异条带，从而满足农户、基层及个人对于O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒检测的需求。本技术在对一份样品进行检测时，能同时检测出该样品是否含有O型口蹄疫病毒和/或猪瘟病毒和/或猪蓝耳病病毒，其具有特异性好、灵敏度高、检测速度快等优点，且不需要使用仪器设备，操作简单，能广泛地用于农户、基层以及个人对于O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的检测。附图说明图I为本技术的侧面结构示意图，图中，I为PVC底板；2为样品垫；3为金标记抗体玻璃纤维膜III ;4为金标记抗体玻璃纤维膜II ；5为金标记抗体玻璃纤维膜I ;6为硝酸纤维素包被膜；7为吸水纸，下同；图2为图I的俯视图示意图，图中，8为检测线I ;9为检测线II ;10为检测线III ；11为质控线；图3为本技术检测结果为O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒均阳性的示意图(即包被膜6表面的检测线I 8、检测线II 9、检测线III 10和质控线11均显色)；图4为本技术检测结果为O型口蹄疫病毒阳性的示意图(即包被膜6表面的检测线I 8和质控线11显色而检测线II 9和检测线III 10不显色)；图5为本技术检测结果为猪瘟病毒阳性的示意图(即包被膜6表面的检测线II9和质控线11显色而检测线I 8和检测线III 10不显色)；图6为本技术检测结果为猪蓝耳病病毒阳性的示意图(即包被膜6表面的检·测线III 10和质控线11显色而检测线I 8和检测线II 9不显色)；图7为本技术检测结果为O型口蹄疫病毒和猪瘟病毒阳性的示意图(即包被膜6表面的检测线I 8、检测线II 9和质控线11显色而检测线III 10不显色)；图8为本技术检测结果为O型口蹄疫病毒和猪蓝耳病病毒阳性的示意图(SP包被膜6表面的检测线I 8、检测线III 10和质控线11显色而检测线II 9不显色)；图9为本技术检测结果为猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒阳性的示意图(即包被膜6表面的检测线II 9、检测线III 10和质控线11显色而检测线I 8不显色)；图10为本技术检测结果为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒的胶体金测试试纸条，其特征在于，试纸条包括底板、样品垫、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜I、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜II、涂覆胶体金颗粒标记抗体的玻璃纤维膜III、包被膜和吸水纸，其中，包被膜的底面粘贴在底板上面，在该包被膜两端的上面分别粘贴玻璃纤维膜I和吸水纸，在该玻璃纤维膜I远离包被膜的一端的上面粘贴玻璃纤维膜II，在玻璃纤维膜II远离包被膜的一端的上面粘贴玻璃纤维膜III，在玻璃纤维膜III远离包被膜的一端的上面粘贴样品垫；在所述包被膜的上面设有检测线I、检测线II、检测线III和质控线，所述检测线I包被抗O型口蹄疫病毒的单克隆抗体，检测线II包被抗猪瘟病毒的单克隆抗体，检测线III包被抗猪蓝耳病病毒的单克隆抗体，质控线包被抗鼠抗体；所述玻璃纤维膜I为涂覆胶体金颗粒标记抗O型口蹄疫病毒的单克隆抗体的玻璃纤维膜I，所述玻璃纤维膜II为涂覆胶体金颗粒标记抗猪瘟病毒的单克隆抗体的玻璃纤维膜II，所述玻璃纤维膜III为涂覆胶体金颗粒标记抗猪蓝耳病病毒的单克隆抗体的玻璃纤维膜III。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曾小宇，何宏轩，任宝红，张如民，赵林萍，李丹，魏卓，
申请(专利权)人：郑州中道生物技术有限公司，
类型：实用新型
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