透明质酸的提纯方法以及制造方法技术

本发明专利技术的目的在于提供一种简便且高收率的用于工业规模下的高纯度透明质酸类的提纯方法。本发明专利技术提供一种透明质酸及/或其盐的提纯方法以及制造方法，包括：使从（1）活性炭、（2）无机吸附剂、（3）无机吸附剂和有机吸附剂、（4）无机吸附剂和活性炭、（5）无机吸附剂和有机吸附剂和活性炭、（6）有机吸附剂、以及（7）有机吸附剂和活性炭组成的群中选择的吸附剂，与含有透明质酸及/或其盐和杂质的透明质酸类溶液相接触的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及透明质酸类的提纯方法以及制造方法。
技术介绍
透明质酸，除了作为化妆品的保湿剂以外，还用作眼科、骨科、皮肤科等的药剂制品。透明质酸可以从动物组织，例如，可以从鸡的鸡冠、牛眼玻璃体等的提取物制造而得，但因为作为杂质的硫酸软骨素等的混入，或因组织内含有透明质酸酶等使其容易被低分子量化，也进行具有透明质酸生产能力的微生物的培养，从培养液中制造透明质酸(发酵法)(非专利文献I以及专利文献I)。使用提取法或发酵法制造得到的透明质酸中，存在蛋白质或致热源等杂质，因而对将这些杂质分离去除后得到高纯度的制品的方法进行了研究。特别是制造的初期阶段中 的杂质的去除，能够减轻之后的提纯工序的负荷，有望开发出能够作为药剂制品使用的高纯度制品的方法。作为这样的例子，公开了例如有在发酵液中加入乙醇等有机溶剂使得透明质酸析出与杂质分离的提纯法，或使用阴离子交换树脂从发酵液中去除致热源或蛋白质等的透明质酸提纯法(专利文献2)。非专利文献I :Journal of General Microbiology, 85, 372-375，1976专利文献I :日本国专利公报“特公平4-12960号公报”专利文献2 日本国专利公报“特开昭63-12293号公报”
技术实现思路
然而，要得到能够工业规模生产的作为注射液等的药剂制品来使用的高纯度透明质酸类，还存在(1)因为在初期阶段杂质的去除没有充分进行，使得后续工序的负荷大(2)操作复杂且透明质酸类的回收率低等，还需要得到进一步的改善的需求点。鉴于上述情况，本专利技术旨在提供一种简便且高收率的，用于工业规模下的高纯度透明质酸类的提纯方法。此外，本专利技术也旨在提供用于该提纯方法的吸附剂。本专利技术人等，为了达到上述目的，对从含有透明质酸类的溶液中高效地分离去除杂质，简便且高效地得到高纯度的透明质酸类的提纯方法，进行了各种研究，结果发现通过使透明质酸类溶液与活性炭相接触，可以高效地吸附去除杂质，完成了本专利技术。也就是说，本专利技术提供一种透明质酸及/或其盐的提纯方法，包括使从(I)活性炭、(2)无机吸附剂、(3)无机吸附剂和有机吸附剂、(4)无机吸附剂和活性炭、(5)无机吸附剂和有机吸附剂和活性炭、(6)有机吸附剂、以及(7)有机吸附剂和活性炭组成的群中选择的吸附剂，与含有透明质酸及/或其盐和杂质的透明质酸类溶液相接触的工序。该提纯方法，能够高效地吸附去除杂质。此外，本专利技术提供一种透明质酸及/或其盐的提纯方法，包括使从(I)活性炭、(4)无机吸附剂和活性炭、(5)无机吸附剂和有机吸附剂和活性炭、以及(7)有机吸附剂和活性炭组成的群中选择的吸附剂，与含有透明质酸及/或其盐和杂质的透明质酸类溶液相接触的工序。该提纯方法，能够高效地吸附去除杂质。此外，本专利技术提供一种旨在制造透明质酸及/或其盐的方法，包括使从(I)活性炭、(2)无机吸附剂、(3)无机吸附剂和有机吸附剂、(4)无机吸附剂和活性炭、(5)无机吸附剂和有机吸附剂和活性炭、(6)有机吸附剂、以及(7)有机吸附剂和活性炭组成的群中选择的吸附剂，与含有透明质酸及/或其盐和杂质的透明质酸类溶液相接触，从而将透明质酸及/或其盐提纯的工序。该制造方法，通过高效地吸附去除杂质，能够有效地制造出高纯度的透明质酸。此外，本专利技术提供一种旨在制造透明质酸及/或其盐的方法，包括使从(I)活性炭、(4)无机吸附剂和活性炭、(5)无机吸附剂和有机吸附剂和活性炭、以及(7)有机吸附剂和活性炭组成的群中选择的吸附剂，与含有透明质酸及/或其盐和杂质的透明质酸类溶液相接触，从而将透明质酸及/或其盐提纯的工序。该制造方法，通过高效地吸附去除杂质，能够有效地制造出高纯度的透明质酸。具体实施方式 〔用语说明〕本说明书中的“透明质酸类”包括游离的透明质酸、以及在不损害本专利技术目的的范围内能够使用的任意透明质酸盐(并非限定于此，例如、钠盐、钾盐、钙盐、锂盐等金属盐，盐酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐等酸加成物等)或水合物、或以上这些的混合物。在此，透明质酸是指，N-乙酰-D-葡糖胺与D-葡萄糖醛酸相结合的双糖单元重复相连成链的高分子量的多糖类，各种盐主要是指葡萄糖醛酸部分呈盐的形式。透明质酸，通过可以折叠的链部分与D-葡萄糖醛酸部分的羧基的负电荷的相互作用，使其容易向空間扩展，因而能够与大量的水结合形成凝胶。此外，即使是低浓度，由于分子间作用力强，所以具有较高的粘性。从这样的作用出发，例如，具有湿润关节的作用、软化皮肤的作用等，生理上也担当这样的角色。透明质酸类中，也已知分子量约为200万Da的透明质酸钠，与分子量约为80万Da的物质相比，作为药剂制品，对于变形性膝关节病、肩周炎、慢性类风湿关节炎等的治疗能发挥优良的疗效(薬理^治療，Vol. 22，No. 9，289 (1994);薬理i治療，Vol. 22，No. 9，319(1994))。此外，在其他方面，已知被用于外科手术后的粘连的预防，还已知用作皮肤科领域、眼科领域中的药剂制品的效果，一部分已经被普遍用于临床。作为药剂制品被使用时，优选使用平均分子量为100万以上的透明质酸类。进而，考虑到获取和处理的容易程度时，优选平均分子量为100万 500万Da的透明质酸类作为药剂制品，特别优选平均分子量为150万 400万Da的透明质酸类。此外，如此高分子量的透明质酸类使用于化妆品用途时，从其高保湿力来说，也能发挥优良的效果。作为药剂制品，作为溶解透明质酸类的注射用溶解剂，可以酌情使用在注射用水、生理盐水等中，加入了含有如酸、碱、磷酸盐的缓冲剂的pH调节剂等通常使用的注射用溶解剂(例如，各国药典认可的注射用溶解剂)。这些透明质酸类，可以是通过从动物组织中提取的提取方法制造而得的，也可以是通过利用生产透明质酸的微生物菌株使之发酵而得的发酵法制造而得的。然而，因为从动物组织中提取得到的透明质酸中，其他粘多糖等杂质比较多，分子量也小，所以优选使用通过发酵法得到的。适用于本专利技术的发酵法的一个例子中，例如使用链球菌属微生物通过已知方法能够得到透明质酸类。通过发酵法得到的发酵液用于本专利技术的方法等时，优选使用经已知的方法，例如、离心分离或过滤处理等，进行了除菌的溶液。根据不同情况，也可以进行经透析处理、超过滤等去除低分子化合物，经精密过滤处理去除不溶于水的微粒等操作，也可以使用加入乙醇等水溶性有机溶剂析出提纯透明质酸的物质。此外，也可以使用经氧化铝等处理过的物质。本说明书中的“链球菌”包括，能够生成透明质酸的链球菌属(Streptococcus)的任意细菌 其突变株。特别是，优选使 用如专利文献2中记载的马链球菌FM-100 (微工研菌寄第9027号)、如日本特开平2-234689号公报中所记载的马链球菌FM-300 (微工研菌寄第2319号)能够即高收率又稳定地生产透明质酸的突变株。作为适用于透明质酸生产的链球菌属的细菌的其他例子，并不限定于此，可以列举出，例如，马链球菌(Streptococcusequi)、兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)、似马链球菌(Streptococcusequisimilis)、停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)、化胺链球菌(Streptococcuspyogen本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：香坂昌信，石毛克己，日置和利，星加博光，酒井晴子，
申请(专利权)人：电气化学工业株式会社，
类型：发明
国别省市：