功能修饰性NAv1.7抗体制造技术

Nav1.7结合实体，其在结合后功能性地修饰离子通道的活性，特别是抗Nav1.7抗体或其结合片段；包含所述抗体的药物组合物，所述抗体和包含其的组合物在治疗、例如治疗/调节疼痛中的用途，以及用于产生和制备所述抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】功能修饰性NAV1.7抗体本公开涉及抗NavL 7抗体及其片段，其具有功能修饰特性；包含所述抗体的药物组合物；所述抗体和包含其的组合物在治疗(例如治疗/调节疼痛)中的用途，以及用于产生和制备所述抗体的方法。离子通道是孔形成蛋白，其通过允许离子流下其电化学梯度而帮助建立和控制所有活细胞的细胞膜电势。它们存在于围绕所有生物学细胞的膜中。人基因组含有超过400个离子通道基因，其代表大的多样性并在许多细胞过程(例如分泌、肌肉收缩以及在心脏和神经组织中产生和传送动作电位)中起到关键性的作用。离子通道是集成性膜蛋白，其可采用基于数个蛋白的组装的大分子结构。此类“多亚单位”组装通常涉及这样的排布穿过膜平面或脂双层而围绕充水孔紧密填装的相同或同源蛋白。形成孔的亚单位(通常称为α-亚单位)可与帮助控制离子通道蛋白的活性和 细胞表面表达的辅助亚单位(膜结合的或细胞质的)相缔合。最近解析了各种离子通道的X 射线结构(Doyle 等人 Science 280:69(1998) ; Jiang 等人，Nature423 :33(2003) ；Long等人，Science 309:897(2005))并表明孔结构的组织在离子通道家族成员中是大部分保守的。离子通道孔的开和关(称作门控过程)可被各种细胞或生物化学过程触发。电压门控和配体门控的离子通道是离子通道蛋白家族中最突出的成员。电压门控离子通道(例如钙，钠和钾通道)的活性是由细胞膜电势中的变化控制的，而配体门控离子通道(例如GABA-A受体，乙酰胆碱受体...)是由特定的细胞内或细胞外配体的结合控制的。门控机制是非常复杂的，这涉及各种膜、孔和细胞质的结构，并且在离子通道的类别之间有差异。电压门控的离子通道(有时称作电压敏感性离子通道)是在心脏和神经组织中提供细胞应激性的基础的一类跨膜蛋白。这些通道被细胞超极化或去极化活化并产生引起控制细胞膜电势的离子流。电压门控的钠通道一般负责动作电位的起始，而电压门控的钾通道介导细胞膜再极化。各种电压门控离子通道之间经微调的相互作用对于塑造心脏和神经动作电位是关键的。电压门控钠通道的类别包含九个不同的同种型(Navi. 1_1.9)，并且已描述了四种不同的钠通道特异性附属蛋白(SCNlb-SCMb)。已描述了各种神经细胞类型中(Llinas 等人，J. Physiol. 305 197-213 (1980) ；Kostyuk 等人，Neuroscience 6:2423-2430(1981) ；Bossu 等人，Neurosci. Lett. 51 :241-246(1984) 1981 ；Gilly 等人，Nature309 :448-450 (1984) ；French 等人，Neurosci. Lett. 56 :289-294(1985) ；Ikeda 等人，J. Neurophysiol. 55 :527-539 (1986) Jones 等人，J. Physiol. 389 :605-627 (1987)；Alonso & Llinas, 1989 ;Gilly 等人，J. Neurosci. 9 :1362-1374(1989))及骨骼肌中(Gonoi等人，J. Neurosci. 5 :2559-2564(1985) ；ffeiss 等人，Science233 :361-364(1986))那些同种型的不同功能活性。NavL 5和NavL 4通道分别是心脏和肌肉组织中所表达的主要钠通道同种型，而NavL 1,1. 2,1. 3，I. 6，I. 7，I. 8和I. 9在中枢和外周神经系统中特异性地表达。使用天然存在的毒素河豚毒素(TTX)允许了基于它们对毒素的亲和力而建立钠通道同种型的药理学分类。因此，将电压门控钠通道分类为TTX抗性(NavL 5，I. 8，I. 9)和TTX敏感性的。某些离子通道与疼痛的调节相关(见例如PNAS Nov 6,2001. vol98ηο· 2313373-13378 和 The Journal of Neuroscience 22，200424(38)832_836)。离子通道NavL 7被认为具有调节疼痛(例如神经性疼痛)的能力，因此，其对于治疗性干预而言是特别感兴趣的靶标。NavL 7是电压活化的、河豚毒素敏感性钠通道，其由基因SCN9A编码。NavL 7的获得功能和失去功能的突变都引起人类中明显的疼痛相关的异常。起初，通过连锁分析将SCN9A中的获得功能突变鉴别为红斑性肢痛病(或原发性红斑肢痛症)和阵发性剧痛症(以前称为常见直肠痛)的原因。红斑性肢痛病是罕见的常染色体显性病症，其与灼烧痛的发作以及四肢的发热和发红相关。其它方面健康的个体完全不能感知疼痛(没有神经病变)是非常罕见的表型。最近，由Cox等人(2006)和Goldberg等人(2007)报道的两个研究描述了这种表型，其作为常染色体隐性性状被定位至染色体2q24. 3上，此区域含有基因SCN9A。在这两个研究中，详细的神经学测试显示出这些人能够区分锐/钝和热/冷刺激，但是具有对痛觉的整体丧失。都通过咬自己而具有唇和/或舌的损伤。都具有经常性的青肿和切口，且大多数遭受了骨折或骨髓炎。 这些数据构成强的证据表明在没有神经病变或认知，情绪或神经病症的条件下，引起离子通道NavL 7丧失功能的SCN9A通道病变与对于疼痛的不敏感相关，并且在临床上证实了 NavL 7是疼痛相关的靶标。此外，从KO研究和动物疼痛模型将显示，NavL 7在炎性疼痛中起主要作用。图2a是NavL 7的图示，其包含四个结构域A，B，C和D(也称为结构域I，II，III和IV)。每个结构域包含6个跨膜蛋白螺旋51，52，53，54，55和56。每个跨膜蛋白的确切氨基酸数目取决于所采用的数据库录入而变化，但是UniProtKB/Swiss-Prot提供了下列关于NavL 7的信息在结构域A中，跨膜蛋白SI，S2，S3，S4，S5和S6分别被指定了氨基酸122-145，154-173，187-205，212-231，248-271 和 379-404 ；在结构域B中，跨膜蛋白SI，S2，S3，S4，S5和S6分别被指定了氨基酸739-763，775-798，807-826，833-852，869-889 和 943-968 ；在结构域C中，跨膜蛋白S1，S2，S3，S4，S5和S6分别被指定了氨基酸1188-1211，1225-1250，1257-1278，1283-1304，1324-1351 和 1431-1457 ;以及在结构域D中，跨膜蛋白S1，S2，S3，S4，S5和S6分别被指定了氨基酸1511-1534，1546-1569，1576-1599，1610-1631，1647-1669 和 1736-1760。在公共数据库中可获得许多序列的天然变化，例如见UniProtKB/Swi ss-ProtQ158580在本公开中，SI，S2，S3，S4，S5和S6是指上面所描述的实体或NavL 7中的相应实体，包括向其给予了不同的氨基酸指定且包括天然或非天然变体中的相应实体，以及它们的不同同种型。每个结构域还含有细胞外亲水性环E1，E2和E3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.10.27 US 61/255,2021.NavL 7结合实体，其在结合后功能性地修饰离子通道的活性。2.抗NavL7抗体或其结合片段，其在结合NavL 7离子通道后对其进行功能性修饰。3.根据权利要求2的抗NavL7抗体或其片段，其结合NavL 7离子通道的El细胞外区域。4.根据权利要求3的抗NavL7抗体或其片段，其结合来自NavL 7离子通道的结构域A，B，C或D的El细胞外区域。5.根据权利要求2-4中任一项的抗NavL7抗体或其片段，其结合选自下组的NavL 7肽SEQ ID NO 211、216、218 和 219。6.根据权利要求2的抗NavL7抗体或其片段，其结合NavL 7离子通道的E 3细胞外区域。7.根据权利要求6的抗NavL7抗体或其片段，其结合来自所述离子通道的结构域A，B，C或D的E3细胞外区域。8.根据权利要求6的抗NavL7抗体或其片段，其结合选自下组的NavL 7肽SEQ ID NO207、208、209、210、212、213、214、215、217、220 和 221。9.根据权利要求2-8中任一项的抗NavL7抗体或其片段，其是克隆性的。10.根据权利要求2-9中任一项的抗NavL7抗体或其片段，其是单克隆的、全人的或人源化的。11.根据权利要求1-10中任一项的抗NavL7抗体或其片段，其中在体外膜片钳测定中，所述抗体以至少5%抑制NavI. 7的功能。12.具有对于人NavL7的特异性的功能修饰性抗体，其包含重链，其中所述重链的可变结构域包含下列的至少一个具有序列SEQ ID NO:28或SEQ ID NO :40或SEQ ID NO 82的 CDR 用于 CDR-Hl，具有 SEQ ID NO: 29 或 SEQ ID N0:41 或 SEQ ID NO : 83 中的序列的 CDR用于CDR-H2和具有SEQ ID NO 30或SEQ ID NO 42或SEQ ID NO 84中的序列的CDR用于 CDR-H3。13.根据权利要求12的抗体，其中所述重链的可变结构域包含SEQID NO:28中的序列用于CDR-H1，SEQ ID NO :29中的序列用于CDR-H2以及SEQ ID NO :30中的序列用于CDR-H3。14.根据权利要求12的抗体，其中所述重链的可变结构域包含SEQID NO 40中的序列用于⑶R-Hl，SEQ ID NO 41中的序列用于⑶R-H2以及SEQ ID NO:42中的序列用于CDR-H3。15.根据权利要求12的抗体，其中所述重链的可变结构域包含SEQID NO:82中的序列用于CDR-H1，SEQ ID NO :83中的序列用于C...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·M·米勒，M·R·德里克，C·G·J·沃尔夫，A·D·G·劳森，H·M·菲尼，T·S·巴克，
申请(专利权)人：UCB医药有限公司，
类型：发明
国别省市：