【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及纳米材料科学及电化学生物传感领域，尤其是一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传感器及方法。
技术介绍
磁性纳米材料作为一种纳米材料，不但具有比表面积大、生物相容性好、富含表面功能基团、表面自由能高等优点，广泛用于高效固定大量生物分子，而且基于其独特磁性在磁分离富集和磁热疗等领域备受重视。然而，当前磁珠涉及的应用主要基于磁性，其本身化学/电化学性质的应用鲜有开拓。生物传感研究中，信号输出和放大是决定检测性能的最关键因素之一，当前基于纳米材料优异性质而实现信号输出和放大是研究前沿和应用热点。当前研究中，磁性材料常用于在样品中快速和高效分离目标物，在信号输出方面应用极少。其它纳米材料，如贵金属纳米颗粒、碳纳米管/纤维和半导体量子点等，因具有优异表面修饰功能和独特的光、电、热等性质而广泛用于信号输出，但前期修饰和功能化过程中涉及大量分离步骤，频繁使用离心、超滤和透析等手段，繁琐而耗时。因此，可快速分离且信号输出/放大功能丰富的新材料和新方法可望显著便利生物传感器构建与检测，提升性能。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传感器及方法，基于磁珠标记物高效放大信号进行禽流H5N1生物传感检测。本专利技术采用以下技术方案：一、一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传感器：包括由磁珠转化而成的普鲁士蓝和三电极系统，三电极系统以饱和甘...
【技术保护点】
一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传感器，其特征在于包括由磁珠转化而成的普鲁士蓝和三电极系统，三电极系统以饱和甘汞电极为参比电极，碳电极为对电极，Con A修饰磁珠标记电极为工作电极。
【技术特征摘要】
1.一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传感器，其特征在于包括
由磁珠转化而成的普鲁士蓝和三电极系统，三电极系统以饱和甘汞电极为参比
电极，碳电极为对电极，ConA修饰磁珠标记电极为工作电极。
2.根据权利要求1所述的一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传
感器的制备方法，制备获得作为参比电极的饱和甘汞电极和作为对电极的碳电
极，其特征在于，所述ConA修饰磁珠标记电极和普鲁士蓝具体制备过程如下：
1)处理磁珠水溶液制备获得ConA修饰磁珠分散液；
2)由ConA修饰磁珠分散液处理获得ConA修饰磁珠标记电极；
3)将ConA修饰磁珠标记电极置于铁氰化钾和硫酸钾混合溶液中，采用三
电极系统，ConA修饰磁珠标记电极为工作电极，甘汞电极为参比电极，碳棒为
对电极，进行多电位阶越扫描获得普鲁士蓝。
3.根据权利要求2所述的一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传
感器的制备方法，其特征在于，所述步骤1)具体如下：
1.1)将磁珠水溶液在工作频率为40kHz，功率为160W的超声作用下分散
5min，得到分散均匀的磁珠分散液；
1.2)将用于羧基化磁珠的柠檬酸与磁珠分散液混合，静置于旋转仪上12h
过夜得到羧基化磁珠分散液，柠檬酸的含量为0.1mmol-0.3mmol每毫克磁珠；
1.3)将上述羧基化磁珠分散液依次进行磁性分离、去除上清液，然后将磁
珠用磷酸盐缓冲液清洗三次，然后分散于MES缓冲液中，使得磁珠的最终浓度
约为1mg/mL，4℃下保存；
1.4)将EDC(2mg，10mM)和NHS(0.35mg，15mM)加入到1mL上
述羧基化磁珠的MES分散液中，常温下搅拌反应2小时，用磷酸缓冲液(pH6.0)
磁性分离、去除上清液，重复清洗三次，得到活化磁珠，分散在1mL磷酸缓冲
液中；
1.5)取活化磁珠与伴刀豆球蛋白A(ConA)于常温下反应，用磷酸缓冲液
(pH6.0)磁性分离、去除上清液，重复清洗三次，得到ConA修饰磁珠，分散
在1mL磷酸缓冲液中，在冰箱中4℃保存。
4.根据权利要求2所述的一种磁珠转化普鲁士蓝的禽流感病毒免疫生物传
感器的制备方法，其特征在于，所述步骤1)具体如下：
2.1)将干净的金磁电极在二硫双琥珀酰亚胺基丙酸酯(DTSP)的丙酮溶液
中浸泡，丙酮洗3次，然后超纯水洗3次，获得DTSP修饰金磁电极；
2.2)在DTSP修饰金磁电极上滴加伴刀豆球蛋白A溶液，常温下反应，用
PBS缓冲液(pH7.0)清洗，获得蛋白A修饰金磁电极；
2.3)在伴刀豆球蛋白A修饰金磁电极表面滴加禽流感病毒H5N1抗体溶液，
常温下反应，用PBS缓冲液(pH7.0)清洗，获得抗体修饰金磁电极；
2.4)在抗体修饰金磁电极表面滴加牛血清白蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：傅迎春，李玲艳，李延斌，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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