蛋白质纯化制造技术

本发明专利技术涉及从周质细胞提取物中纯化抗体片段的方法，其包括第一阳离子交换色谱步骤及第二阴离子交换色谱步骤。

Protein purification

The invention relates to a method for purifying antibody fragments from periplasmic cell extracts, which comprises the first cation exchange chromatography step and the two anion exchange chromatography step.

【技术实现步骤摘要】
蛋白质纯化本申请是申请日为2011年7月26日、申请号为201180036421.4、专利技术名称为“蛋白质纯化”的专利技术专利申请的分案申请。专利
本专利技术为蛋白质纯化领域。更具体地，其涉及用于纯化抗体片段的方法。专利技术背景对蛋白质进行大规模的经济型纯化已经成为生物技术工业中越来越重要的问题。通常，蛋白质是由细胞培养物生产的，使用的是通过插入含有编码所述蛋白质的基因的重组质粒而工程改造为生产目的蛋白质的哺乳动物或细菌细胞系。由于所使用的细胞系为活的生物体，所以其必须以复杂的生长基质进行饲养，所述生长基质含有糖类、氨基酸，以及生长因子。必须将目的蛋白质从饲养给细胞的化合物的混合物中及从细胞自身的副产物(原料流)中分离出来以达到可足够用于人类治疗剂的纯度。卫生当局对用于人类施用的蛋白质中原料流的杂质设立的标准非常高。本领域已知的许多用于蛋白质的纯化方法包括的步骤要求应用例如低或高pH、高盐浓度或其他可能不可逆地损害要纯化的蛋白质的生物学活性的极端条件，因此并不适合。所以，分离所需蛋白质达到足够的纯度提出了艰难的挑战。在历史上，认为蛋白质纯化方案是基于分子特性如大小、电荷及溶解性本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于从周质细胞提取物中纯化抗体片段的方法，其包括：a)第一色谱步骤以捕获抗体片段，其中含有抗体片段浓度为至少1.5g/L的混合物进行阳离子交换色谱并随后洗脱以产生含有所述抗体片段的第一洗脱物；以及b)第二色谱步骤，其中第一洗脱物进行阴离子交换色谱以捕获杂质并产生含有抗体片段的流出液。

【技术特征摘要】
2010.07.27 GB 1012603.51.用于从周质细胞提取物中纯化抗体片段的方法，其包括：a)第一色谱步骤以捕获抗体片段，其中含有抗体片段浓度为至少1.5g/L的混合物进行阳离子交换色谱并随后洗脱以产生含有所述抗体片段的第一洗脱物；以及b)第二色谱步骤，其中第一洗脱物进行阴离子交换色谱以捕获杂质并产生含有抗体片段的流出液。2.根据权利要求1的方法，其中的方法包含不超过两个色谱步骤。3.用于从周质细胞提取物中纯化抗体片段的方法，其基本上由以下步骤构成：a)第一色谱步骤以捕获抗体片段，其中含有抗体片段浓度为至少1.5g/L的混合物进行阳离子交换色谱并随后洗脱以产生含有所述抗体片段的第一洗脱物b)对第一洗脱物进行的第一次超滤；c)第二色谱步骤，其中纯化的第一洗脱物进行阴离子交换色谱以捕获杂质并产生含有抗体片段的流出液；以及d)对流出液进行的第二次超滤。4.根据权利要求1-3中任何一项的方法，其中所有色谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·斯皮塔利，J·西蒙斯，R·怀特康比，M·R·皮尔斯黑金斯，
申请(专利权)人：UCB医药有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE