本发明专利技术提供一种由动物肝脏水解得到的多肽的药物组合物，该药物组合物用于治疗肝炎、肝硬化疾病。所述药物组合物由肝水解肽原液、右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠制备而成：将肝水解肽原液配制成水溶液，加入右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠，用超滤器过滤；冷冻干燥。所述肝水解肽原液由下法制得：取健康的猪或牛的肝脏，冲洗后绞碎。将绞碎的肝脏与注射用水混合，匀浆，调pH，加胰酶，恒温水解，调水解液pH，加入胃蛋白酶，水解。往水解液中加入活性炭，滤膜过滤除炭，离心，取上清液，调pH，过滤，超滤得肝水解肽原液。本发明专利技术肝水解肽原液具有较高的多肽含量。本发明专利技术的肝水解肽药物组合物质量好，具有较好的复溶性和稳定性。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种治疗肝炎、肝硬化疾病的肝水解肽药物组合物。
技术介绍
肝水解肽是由健康牛、猪的肝脏经酶水解提取制得的含有多肽类、氨基酸、核酸类的物质。肝水解肽有以下主要作用1、保肝、护肝作用苦参碱可减少肝细胞损伤，并促进其再生，改善肝脏微循环，以利胆红素的摄取、结合与排泄，从而达到抗炎、保肝护肝以及退黄降酶的功效，最终使肝病理组织学得到明显改善；2、抗病毒苦参碱对HBV — DNA的复制有明显的抑制作用；3、抗肿纤维化主要通过保护肝细胞膜，抑制纤维化因子的释放，调控贮脂细胞(HSO)的功能等多个环节发挥抗肝纤维化的作用；4、双向调控免疫，有效改善病理性组织；5、抗肿瘤作用主要通过抑制细胞膜上Nak — ATP酶并激活腺苷酸环化酶，进而 抑制肿瘤细胞生长作用；同时，苦参碱还可抑制肿瘤细胞与内皮细胞的粘附，从而减少肿瘤的转移等；6、毒理试验证实苦参碱对动物呼吸系统及心血管系统无明显影响，急性毒性LD50为64.4mg / kg。长期毒性试验未发现有毒理上的病理损伤，致突变试验均为阴性，表明本品没有明显毒性。本专利技术人研制了一种有效成分含量高的肝水解肽原液的制备方法、药物质量稳定性高的肝水解肽药物组合物及其制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种用于治疗肝炎、肝硬化疾病、药物质量稳定性高的肝水解肽药物组合物。肝水解肽的治疗作用主要取决于成份中的多肽，本专利技术药物组合物的制备过程中肝水解肽原液的制备方法可以取得较高的多肽含量，肝水解肽原液具体制备方法如下 I、取健康的猪或牛的肝脏，去除非肝脏组织，先用0. 5%的氯化钠溶液冲洗，洗净血水，再用无菌注射用水冲洗3次后绞碎。将绞碎的肝脏与注射用水按I :1. 6 2. 2的质量比混合，用高速组织捣碎机匀浆，将匀浆加热至45 50°C，恒温I小时。2、用KOH将上述匀浆调pH至7. 5 8. 0，加肝脏质量的0. 4%的胰酶，保持45 500C，连续恒温水解8小时，期间保持pH在7. 5 8. 0之间。用HCL将上述水解液调pH至2.5 3. 0，按每IL水解液加入4g胃蛋白酶的比例加入胃蛋白酶，保持40 45°C，水解6小时，期间保持pH在2. 5 3. 0之间。3、往水解液中加入0. 1% (g/ml)的活性炭，边搅拌边加热至90 95°C，保持30分钟，迅速冷却至室温，用0. 45 y m滤膜过滤除炭，4000rpm离心25分钟，取上清液，将上清液调pH至6. 2 6. 5之间，保持38 42°C放置12小时，用0. 22 y m滤膜过滤，10000分子量超滤膜超滤得肝水解肽原液，测定多肽含量。本专利技术还提供了肝水解肽药物组合物，由肝水解肽原液、右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠按下述包括以下步骤的方法制备而成1.将上述肝水解肽原液配制成水溶液，使IOOmL水溶液含2000mg多肽，加入右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠，使右旋糖酐40的含量为10g/100mL和羧甲基纤维素钠的含量为0.05g/100mL，调节pH值为6. 0 7. 0，用超滤器过滤； 2.无菌分装于西林瓶中； 3.冷冻干燥 ①预冻将步骤2中分装溶液半加塞置于预先降温至一30°C 一 35°C冷冻箱内，保持I小时，匀速降温至一 52°C 一 47°C，保温3小时； ②升华开启真空装置，控制真空度14 16Pa，匀速升温(彡I0C/min)至一 30°C 一260C ;在此温度保持2小时，I小时内匀速升温至一 15°C 一 12°C，在此温度保持10小时； ③干燥4小时内，匀速升温至25°C，干燥6小时，密塞轧盖，包装得肝水解肽药物组合物。上述步骤3①中的匀速降温速度彡I0C /min ;步骤3②中匀速升温至一 30°C 一26°C的升温速度彡I0C /min。专利技术人经过大量实验发现按照上述工艺制备肝水解肽原液跟现有技术相比具有较高的多肽含量。本专利技术提供以下试验及对比结果 I、样品I (按照CN100542602C方法制备的肝水解肽原液)2、样品2(按照CN102228676A方法制备的肝水解肽原液)3、样品3(按照CN101091722A方法制备的肝水解肽原液) 4.样品4(按照CN1903357B方法制备的肝水解肽原液)5、样品5 (本专利技术制备的肝水解肽原液) 以上样品制备过程中的原料肝脏为同一来源，混合均匀的新鲜、健康肝脏。将样品I 5分别按照福林酚法测定多肽含量，结果见表I : 表I多肽含量比较权利要求1.肝水解肽原液，由下法制得 (1)取健康的猪或牛的肝脏，去除非肝脏组织，先用O.5g/100ml的氯化钠溶液冲洗，洗净血水，再用无菌注射用水冲洗3次后绞碎；将绞碎的肝脏与注射用水按I :1. 6 2. 2的质量比混合，用高速组织捣碎机匀浆，将匀浆加热至45 50°C，恒温I小时； (2)用KOH将上述匀浆调pH至7.5 8. 0，加肝脏质量的O. 4%的胰酶，保持45 50°C，连续恒温水解8小时，期间保持pH在7. 5 8. O之间，得水解液I ;用HCL将上述水解液I调pH至2. 5 3. 0，按每IL水解液I加入4g胃蛋白酶的比例加入胃蛋白酶，保持40 450C，水解6小时，期间保持pH在2. 5 3. O之间，得水解液II ； (3)往水解液II中加入O.lg/100ml的活性炭，边搅拌边加热至90 95°C，保持30分钟，迅速冷却至室温，用O. 45 μ m滤膜过滤除炭，4000rpm离心25分钟，取上清液，将上清液调pH至6. 2 6. 5之间，保持38 42°C放置12小时，用O. 22 μ m滤膜过滤，10000分子量超滤膜超滤得肝水解肽原液。2.肝水解肽药物组合物，其特征在于由权利要求I所述的肝水解肽原液、右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠按下述方法制备而成 (1)将权利要求I所述肝水解肽原液配制成水溶液，使IOOmL水溶液含2000mg多肽，加入右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠，使右旋糖酐40的含量为10g/100mL和羧甲基纤维素钠的含量为O. 05g/100mL,调节pH值为6. O 7. 0，用超滤器过滤； (2)无菌分装于西林瓶中； (3)冷冻干燥 ①预冻将(2)中分装溶液半加塞置于预先降温至一30°C 一 35°C冷冻箱内，保持I小时，匀速降温至一 52°C 一 47°C，保温3小时； ②升华开启真空装置，控制真空度14 16Pa，匀速升温至一30°C 一 26°C ;在此温度保持2小时，I小时内匀速升温至一 15°C 一 12°C，在此温度保持10小时； ③干燥4小时内，匀速升温至25°C，干燥6小时，密塞轧盖，包装得肝水解肽药物组合物。3.根据权利要求2所述的肝水解肽药物组合物，其特征在于步骤(3)①中的匀速降温速度彡I0C /min ;步骤(3)②中匀速升温至一 30°C 一 26°C的升温速度彡1°C /min。4.权利要求2所述肝水解肽药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)将权利要求I所述肝水解肽原液配制成水溶液，使IOOmL水溶液含2000mg多肽，加入右旋糖酐40和羧甲基纤维素钠，使右旋糖酐40的含量为10g/100mL和羧甲基纤维素钠的含量为O. 05g/100mL,调节pH值为6. O 7.本文档来自技高网...
【技术保护点】
肝水解肽原液，由下法制得：（1）取健康的猪或牛的肝脏，去除非肝脏组织，先用0.5g/100ml的氯化钠溶液冲洗，洗净血水，再用无菌注射用水冲洗3次后绞碎；将绞碎的肝脏与注射用水按1：1.6～2.2的质量比混合，用高速组织捣碎机匀浆，将匀浆加热至45～50℃，恒温1小时；（2）用KOH将上述匀浆调pH至7.5～8.0，加肝脏质量的0.4%的胰酶，保持45～50℃，连续恒温水解8小时，期间保持pH在7.5～8.0之间，得水解液Ⅰ；用HCL将上述水解液Ⅰ调pH至2.5～3.0，按每1L水解液Ⅰ加入4g胃蛋白酶的比例加入胃蛋白酶，保持40～45℃，水解6小时，期间保持pH在2.5～3.0之间，得水解液Ⅱ；（3）往水解液Ⅱ中加入0.1g/100ml的活性炭，边搅拌边加热至90～95℃，保持30分钟，迅速冷却至室温，用0.45μm滤膜过滤除炭，4000rpm离心25分钟，取上清液，将上清液调pH至6.2～6.5之间，保持38～42℃放置12小时，用0.22μm滤膜过滤，10000分子量超滤膜超滤得肝水解肽原液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：曾艺，胡成忠，
申请(专利权)人：湖北济生医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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