本发明专利技术公开了一种可特异性结合TRB3的多肽或所述多肽的衍生物在制备治疗和/或预防类风湿性关节炎的药物中的应用；所述的多肽的氨基酸序列为如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示序列中的任一种；所述多肽的衍生物为所述多肽与细胞穿膜肽接连所形成的嵌合肽。本发明专利技术的多肽或多肽衍生物能够特异性地与TRB3结合，从而阻断TRB3与P62蛋白的相互作用，该肽段的衍生物Pep2-A1，Pep2-A2，Pep2-A3可以治疗或预防类风湿性关节炎引发的各类病症。
【技术实现步骤摘要】
一种多肽在制备治疗或预防类风湿性关节炎药物中的应用
本专利技术涉及一种多肽及其衍生物在制备治疗和/或预防类风湿性关节炎的药物中的应用。
技术介绍
类风湿关节炎(Rheumatoidarthritis，RA)是一种以慢性侵蚀性关节炎为特征的全身性自身免疫病。类风湿关节炎的病变特点为滑膜炎，以及由此造成的关节软骨和骨质破坏，最终导致关节畸形。如果不经过正规治疗，约75％的患者在3年内出现残废。类风湿关节炎分布于世界各地，在不同人群中的患病率为0.18％～1.07％，其发病具有一定的种族差异，印地安人高于白种人，白种人高于亚洲黄种人。在我国的总患病人数逾500万。类风湿关节炎在各年龄中皆可发病，高峰年龄在30～50岁左右，一般女性发病多于男性。类风湿关节炎的发病原因尚不明确，一般认为与遗传、环境、感染等因素密切相关。类风湿关节炎的主要病理改变为滑膜炎，表现为滑膜增生和炎性细胞浸润。类风湿关节炎的滑膜改变可分为炎症期、血管翳形成期和纤维化期。血管翳形成是类风湿关节炎滑膜的重要病理特征，在类风湿关节炎软骨和骨破坏过程中发挥重要作用。关节外表现的主要病理基础为血管炎。类风湿结节是其特征性表现，结节中心为类纤维素样坏死组织，周围有“栅状”排列的组织细胞，成纤维细胞及巨噬细胞等。在类风湿关节炎疾病中，炎症由免疫系统细胞因子和响应这些因子的T细胞介导。目前的药物治疗主要采用：1)非甾体类抗炎药(NSAID)通过抑制环氧合酶(COX)活性，减少前列腺素合成而具有抗炎、止痛、退热及减轻关节肿胀；2)免疫抑制剂改善病情抗风湿药(DMARDs)，如甲氨蝶呤等；3)生物制剂如肿瘤坏死因子(TNF)–α拮抗剂、白细胞介素(IL)-l和IL-6拮抗剂、抗CD20单抗以及T细胞共刺激信号抑制剂，该类药物是目前积极有效控制炎症的主要药物，减少骨破坏，减少激素的用量和骨质疏松，是开发治疗类风湿关节炎疾病药物的热点领域。自噬是生物进化过程中产生的一种细胞蛋白和细胞器的循环利用机制，参与多种疾病如神经退行性疾病、癌症及心脏疾病等的病理过程。自噬过程广泛存在于正常的生理过程中，作为细胞对不良环境的一种防御机制，参与内质网应激引起的异常蛋白和受损细胞器的降解、炎症和氧自由基的清除以维持正常细胞稳态；但是自噬过度往往会导致胞内重要组分被降解，细胞发生死亡，因此自噬也被认为是另一种形式的程序性细胞死亡。无论是自噬过度还是自噬不足都可能导致疾病发生。最近研究表明自噬在类风湿性关节炎关节损伤过程中发挥着重要作用，如在炎症过程中出现的一些前炎性细胞因子包括白介素-1、白介素-6，白介素-23以及TLR配体等促进自噬的发生。同时自噬也控制炎性细胞因子的释放，调控着与自身免疫性疾病有牵连的细胞。自噬可能是新的抗炎疗法作用靶标。TRB3(TribblesHomologue3)是Tribbles同源蛋白家族成员之一，最早在果蝇中被鉴定到，并发现该蛋白能抑制有丝分裂，调节发育过程中细胞的增殖、迁移及形态形成。在哺乳动物中，有三种Tribbles同源蛋白：TRB1，TRB2和TRB3，它们都是假激酶蛋白家族成员。这三种蛋白都含有Ser/Thr蛋白激酶样结构域(Kinaselikedomain,KD)，但却缺乏ATP的结合位点和催化残基，因此没有激酶活性。尽管如此，Tribbles蛋白却具有接头蛋白样的功能，参与多种蛋白复合体的组装。在哺乳动物Tribbles家族成员中，TRB3的研究最为深入，其相互作用蛋白包括转录因子、泛素连接酶、细胞膜上II型BMP受体以及MAPK、PI3K信号通路成员。通过与这些蛋白相互作用，TRB3参与了糖脂代谢、脂肪细胞分化、凋亡、应激和胶原表达等的调控。近来研究证据表明，TRB3在关节炎的发生发展过程中都具有重要的调节作用，在正常的人软骨细胞可以检测到TRB3信使RNA。TRB3蛋白水平低，在正常软骨细胞中TRB3低表达而在关节炎的软骨中高表达。过表达TRB3可以抑制Akt磷酸化，减少软骨细胞的生存和蛋白多糖的合成。Tang等人发现终末糖基化产物(AGEs)激活TRB3/MAPK信号通路介导的I型和III型胶原表达。Cravero等人发现TRB3可以抑制Akt活性，TRB3高表达将促进细胞死亡以及减少软骨细胞对胰岛素样生长因子1(IGF-1)的反应。因此，研究和开发TRB3蛋白的抑制剂，或者阻断其与P62蛋白结合的物质，将为类风湿性关节炎的临床治疗提供有效且崭新的手段。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对目前缺乏能有效利用的TRB3蛋白抑制剂的现状，而提供一种能特异性结合TRB3的多肽及其在制备预防和/或治疗类风湿性关节炎的药物中的应用。本专利技术的专利技术人在研究的过程中发现，肿瘤细胞内TRB3的过度表达能降低自噬关键性抑制因子mTOR蛋白水平，并抑制多个自噬相关蛋白，例如II型LC3、Becline-1、PI3K3C表达增多，进而造成自噬相关货车蛋白P62产生堆积，证明肿瘤细胞内TRB3表达能诱导自噬受到抑制。P62是反映自噬动态过程的重要指标，作为“货车蛋白”，P62蛋白结构域中的泛素相关结构域(Ubiquitinassociateddomain,UBA)能与泛素化蛋白(Ubiquitin,Ub)结合，并把它们募集到自噬体膜上与LC3结合，这个过程主要通过P62蛋白的LIR(LC3-InteractingRegion,LIR)结构域与LC3结合，介导泛素化蛋白的降解，P62的表达水平也随之降低。自噬受到抑制时，P62与其结合的泛素化蛋白不能及时降解，在胞浆内堆积而表达升高。专利技术人还进一步发现肿瘤细胞内的TRB3主要与P62蛋白发生相互作用，进而阻断其他泛素化蛋白与P62蛋白的结合，造成自噬通路被抑制，诱导肿瘤细胞的发生和转移。基于专利技术人的研究工作，本专利技术提供下述技术方案。本专利技术提供的技术方案是：一种可特异性结合TRB3的多肽或所述多肽的衍生物在制备预防和/或治疗类风湿性关节炎的药物中的应用；所述的多肽的氨基酸序列为如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示序列中的任一种；所述多肽的衍生物为所述多肽与细胞穿膜肽接连所形成的嵌合肽。本专利技术中，所述的如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示的氨基酸序列中，可适当引入氨基酸替换，缺失或添加，只要改变后的氨基酸序列仍然能够形成能与TRB3特异性结合的多肽且该多肽仍然保持改变前的活性即可。本专利技术中，所述的细胞穿膜肽为本领域常规所述的细胞穿膜肽，只要其能辅助将所述多肽送入细胞以发挥作用即可，一般而言，所述的细胞穿膜肽为由10～30个氨基酸组成的短肽分子。所述的细胞穿膜肽较佳地为Pep2多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：4所示；即在本专利技术中，所述的多肽衍生物较佳地为以Pep2多肽连接如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示序列中的任一种多肽后所形成的嵌合多肽。所述的细胞穿膜肽还可以为HIV-1病毒反转录激活因子(Trans-activatortranscription，Tat)蛋白的TAT肽(YGRKKRRQRRR，其氨基酸序列如SEQID：5所示)、果蝇触角同源异型蛋白的转录因子Antp肽(RQIKIWFQNRRMKWK本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种可特异性结合TRB3的多肽或所述多肽的衍生物在制备治疗和/或预防类风湿性关节炎的药物中的应用；所述的多肽的氨基酸序列为如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示序列中的任一种；所述多肽的衍生物为所述多肽与细胞穿膜肽接连所形成的嵌合肽。
【技术特征摘要】
1.一种可特异性结合TRB3的多肽或所述多肽的衍生物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的应用；所述的多肽的氨基酸序列为如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示序列中的任一种；所述多肽的衍生物为所述多肽与细胞穿膜肽接连所形成的嵌合肽。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述细胞穿膜肽的氨基酸序列如序列表中SEQIDNO:4～SEQIDNO:9中的任一种所示。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述嵌合肽为如序列表中SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示序列中的任一种的多肽的N端与细胞穿膜肽连接。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述嵌合肽为如序列表中SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：3所示序列中的任一种的多肽的C端与细胞穿膜...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡卓伟，花芳，孙巍，
申请(专利权)人：胡卓伟，
类型：发明
国别省市：北京;11
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