流感疫苗和治疗制造技术

本发明专利技术总体披露了M1多肽，所述M1多肽可用作疫苗和/或抗原，用于产生抗M1多肽抗体，用于预防性治疗易受流感病毒感染的个体。本发明专利技术的抗M1多肽抗体可用于治疗感染了流感病毒的个体，或可用于预防性治疗易受流感病毒感染的个体，或用于不能产生有效抗体反应的免疫受抑制的个体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及M1多肽类，包含M1多肽类的疫苗，结合至M1多肽类的抗体，以及使用所述抗体的流感治疗。本专利技术的抗体和多肽类还可用于诊断。
技术介绍
流感是由通过呼吸道飞沫传播而扩散的流感病毒引起的一种急性、呼吸道传染性疾病。无并发症的流感表征为突然发生的全身和呼吸道症状，所述症状通常在一周内消除。在某些人中，流感可能加重现有的身体状况并可能导致危及生命的并发症。流感病毒是世界上最普遍存在的一种病毒，影响人类、犬类、鸟类和家畜。流感还对老年人和非常小的孩子有重大影响。流感导致经济上的负担、发病甚至死亡，是值得注意的。流感病毒是包膜、负义/负链RNA病毒，具有节段基因组属于正粘病毒科。它们根据其核心蛋白被分类为三种不同的类型：A、B和C(甲型、乙型、丙型)[Cox NJ,FukudaK.Influenza.Infect.Dis.Clin.NorthAm.1998;12:27-38]。甲型流感病毒可以感染一定范围的哺乳动物和鸟类，而乙型(宿主范围人类和海豹)和丙型基本上限于人类。甲型和乙型流感病毒对人类患病负主要责任，其中甲型是最致病的。甲型和乙型流感病毒的主要抗原决定簇是两种表面糖蛋白：神经氨酸酶（NA）和血凝素（HA），两者均能够诱发人类的免疫应答。HA参与受体结合和膜融合。NA促进子代病毒从受感染细胞的分裂、阻止病毒聚集、并辅助运动通过粘膜呼吸道上皮细胞。目前已知三种类型的流感病毒（甲型、乙型和丙型），甲型病毒对动物和人类状况负责，而乙型和丙型病毒尤其对人类是致病的。甲型病毒根据血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）(病毒包膜的主要糖蛋白)的抗原结构被细分成亚型。显示出16种亚型的HA（H1-H16）和9种亚型的NA（N1-N9）。甲型病毒的亚型因而由存在于病毒包膜中的HA亚型和NA亚型来限定。野鸟构成所有甲型流感病毒亚型的储存宿主。甲型流感病毒的某些亚型地方性地或流行性地（年度流行疾病）感染家禽（不同的亚型包括H5N1和H9N2），马（主要是H3N8），猪（主要是H1N1，H3N2和H1N2）以及还有人类（主要是H1N1和H3N2）。狗、猫和其它野生物种也可能偶尔被某些亚型（对于狗是H3N8和H5N1；对于猫是H5N1）感染。流行病两次暴发之间的流感疫苗目前主要由在受精鸡蛋中生长的病毒制备或者是灭活流感疫苗或活流感疫苗。灭活流感疫苗由三种可能形式的抗原制剂组成：全灭活病毒，亚病毒粒子，其中纯化的病毒粒子用洗涤剂或其它试剂破坏以使脂质包膜（所谓的“裂解”疫苗）或纯化的HA和NA（亚单元疫苗）溶解。这些灭活疫苗目前可以进行肌内给药（i.m.），皮下给药（s.c），或者鼻内给药（i.n.）。根据世界卫生组织（WHO）的建议，季节性流感疫苗通常包含45ug的来自三种同时流行的人菌株的HA抗原（通过单向放射免疫扩散（SRD）测量）（J.M.Wood等人：An improved single radial immunodiffusion technique for the assay of influenza haemagglutinin antigen:adaptation for potency determination of inactivated whole virus and subunit vaccines.J.Biol.Stand.5(1977)237-247；J.M.Wood等人：International collaborative study of single radial diffusion and immunoelectrophoresis techniques for the assay of haemagglutinin antigen of influenza virus.J.Biol.Stand.9(1981)317-330））。它们一般包含源自两种甲型流感病毒株和一种乙型流感菌株（例如H1N1，H3N2和B）的抗原。标准的0.5ml可注射剂量在大多数情况包含（至少）15μg的来自各菌株的血凝素抗原成分。疫苗接种在控制年度流感流行中起关键性作用。此外，在大流行期间，抗病毒药可能不足以或不能有效覆盖需求，并且处于流感风险的个人数量要大于流行病两次暴发之间期间的人数。开发可能大量生产并具有有效分配和管理潜能的长效、广泛保护性的疫苗是本专利技术的一个目的。流感病毒每年影响数百万人，在美国导致超过20万人住院和2万人死亡。此外，流感的致命菌株间或出现（例如，1918年的西班牙流感），几乎没有有效的治疗方式。季节性流感疫苗提供了某些保护，前提是致病株自疫苗配方时起没有发生变化。血凝素和神经氨酸酶的表面表达的病毒蛋白的高变异性要求每年重新配方。种群/人类每年应进行再免疫以便有效保护。这种必要性意味着生产成本高，并且可用性取决于对疫苗的每种病毒成分的滴定度（可达到四种不同的病毒构成目前的疫苗）。目前已采用重组细胞培养方法而非鸡蛋来生产抗原并且两种疫苗产品最近已被FDA批准。Flucelvax是通过哺乳动物细胞培养制成的重组病毒制剂（3种灭活病毒）。是通过昆虫细胞培养制成的重组HA疫苗（3种不同的HA蛋白）。这些产品寻求解决疫苗供应的问题，但是没有解决与基于HA的疫苗相关的抗原性漂移问题。本专利技术的一个目的是通过提供会年年保持效力的一种新的流感疫苗来克服每年流感疫苗开发的需要和成本。本专利技术的另一目的是提供会不受新的流感(病毒)菌株感染的流感疫苗。本专利技术的另一目的是提供一种流感治疗方法，以便治疗已受流感感染的个体或对个体进行预防性治疗。本专利技术的一个目的是利用包括结合至M1多肽的抗体或抗体片段的组合物减轻受感染患者的流感病毒感染的严重程度，和/或缩短受流感病毒感染的患者的流感症状的持续时间。
技术实现思路
本专利技术涉及对应一部分的流感M1蛋白的多肽。这些多肽对应来自蛋白的C-末端区的M1序列。在一个实施例中，至少一部分的M1多肽序列已被发现对流感病毒是表面暴露的，并因而是免疫防护的目标。在一个实施例中，多肽跨氨基酸残基215-252。在一个实施例中，多肽跨氨基酸残基215-241。在另一个实施例中，M1多肽跨氨基酸残基220-236。在一个实施例中，M1多肽跨在残基215-252找到的M1多肽的7-37连续的氨基酸。在一个实施例中，M1多肽包括至少15-50个氨基酸。在一个实施例中，M1多肽包括7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20，21，22，23，24，25，26，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甲型流感疫苗，所述甲型流感疫苗包括M1多肽。

【技术特征摘要】
2013.09.23 US 61/881,3251.一种甲型流感疫苗，所述甲型流感疫苗包括M1多肽。
2.根据权利要求1所述的疫苗，其中M1多肽包括M1蛋白的氨基酸残基
220-236。
3.根据权利要求1所述的疫苗，其中M1多肽包括M1蛋白的氨基酸残基
215-241之间的至少7个连续的氨基酸。
4.根据权利要求1所述的疫苗，其中M1多肽由M1蛋白的氨基酸残基220-252
组成。
5.根据权利要求3所述的疫苗，其中M1多肽结合至载体。
6.根据权利要求3所述的疫苗，其中M1多肽存在于支架。
7.根据权利要求1所述的疫苗，还包括佐剂。
8.根据权利要求1所述的疫苗，其中M1多肽还包括糖基化的氨基酸。
9.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·奥福尼特，D·布赫，M·霸尔，
申请(专利权)人：恩金生物有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US