本发明专利技术涉及植物提取领域，具体涉及一种银杏内酯的提取分离方法。本发明专利技术所解决的技术问题是提供一种银杏内酯的提取分离方法，该提取分离方法可得到组分固定的银杏内酯。该方法经提取、萃取、过柱、析晶、混晶步骤所得银杏内酯中，含白果内酯(C15H18O8)25.0％～50.0％、银杏内酯A(C20H24O9)20.0％～45.0％、银杏内酯B(C20H24O10)10.0％～30.0％、银杏内酯C(C20H24O11)5.0％～15.0％，且白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C总量大于95％。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物提取领域，具体涉及。
技术介绍
自上世纪60年代开始，许多国家采用现代分离技术对银杏叶的化学成分进行研究，经药理实验和临床验证，发现银杏叶的多方面生物活性与其所含特定化学成分有关。德国Dr. Willar Schwabe首次注册了银杏叶的一种简单提取物,于1972年申请了专利(WSchwabe DE 176708和DE 2117429)，定名为EGb761，用于治疗心脑血管疾病和神经系统疾病，具有显著疗效，且无毒副作用，银杏内酯类化合物(ginkgolids)具有强血小板活化因子(PAF)拮抗作用。银杏制剂被列为治疗药物的国家有德国、法国和中国，其他国家均用为保健食品或非处方用药，美国开发出的银杏保健食品已经获得FDA批准。银杏内酯属于萜类化合物，称为萜类内酯，由倍半萜内酯和二萜内酯组成，是银杏叶中一类重要的活性成分。白果内酯(bilobalide)属倍半職内酯，由R. T. Major于1967年和K. Weinges于1969年分离得到，目前从银杏叶中发现的唯一的一个倍半職内酯化合物，银杏内酯 A、B、C、M、J(ginkgolidA、B、C、M、J)为二萜内酯化合物，于 1932 年由 S. Furukawa首次从银杏叶中分离出来，1967年才由K. Nakanish>M. Maruyama和K. Okabe等人进一步分离和确定其化学结构。从结构上看，白果内酯类分子骨架由15个碳原子组成，具有互相稠合在一起的4个五元环，其中有I个五元碳环，3个五元内酯碳环，五元环上连有I个天然产物中罕见的叔丁基。白果内酯有很强的生物活性，具有促进神经生长的作用，可防止脑细胞线粒体氧化应激引起的功能改变，改善老年记忆功能，防止老年痴呆的发生，以及防止脑、脊髓神经脱髓鞘作用，其神经营养、神经保护作用比银杏内酯强。银杏内酯B有抗炎、抗休克、保护心脑血管、治疗急性胰腺炎等作用。而银杏内酯类化合物的分子骨架由20个碳原子组成，具有6个五元环，其中有2个五元碳环，3个五元内酯环，I个四氢呋喃环，两个五元碳环以螺环的形式连接在一起，其余的环以稠合的方式连接，形成一个刚性茏状的特殊立体化学结构。银杏内酯分子中均具有天然产物中罕见的叔丁基。银杏内酯包括二萜类和倍半萜类内酯，二萜类内酯主要有银杏内酯A、B、C、J、M等，半萜类内酯有白果内酯。自20世纪70年代初发现了PAF后，药理学家对银杏内酯进行了研究，明确银杏萜内酯是强血小板活化因子拮抗剂，免疫系统、中枢神经系统、缺血损伤有保护作用，并有抗休克、抗过敏及抗炎作用。银杏内酯A、B、C、M、J结构差别在于含有的羟基数目和羟基连接的位置不同。银杏内酯均为强血小板活化因子拮抗剂，是银杏叶中特殊生理活性的关键成分。权利要求1.银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤如下 A、提取粉碎银杏叶，加有机溶剂提取，浓缩提取液中加抗氧化保护剂，用pH调节剂调pH值至4 5,浓缩、冷藏； 其中，步骤A所述提取有机溶剂为乙醇、丙酮或乙酸乙酯，浓度为50 80 % v/v,用量为5 12倍量； B、萃取将冷藏后的浓缩液先用正己烷或石油醚萃取2 3次；水相用脂溶性溶剂萃取4 5次，再用水饱和仲丁醇-乙酸乙酯混合溶剂或水饱和正丁醇-乙酸乙酯混合溶剂萃取4 5次,合并有机相萃取液,减压浓缩； C、过柱将萃取浓缩液过聚酰胺树脂柱，依次用I 5BV水、3 5BV20% 40% v/v乙醇、2 3BV 60% 90% v/v乙醇洗脱，控制洗脱液流速为2 3BV/h ;合并洗脱液；减压浓缩，干燥； D、析晶将过柱后的干燥物加入沸水中，搅拌溶解，冷却，上清液用等体积乙酸乙酯、甲酸乙酯或丙酮萃取4 5次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，加5 8倍量30 % 50 % v/v乙醇加热搅拌溶解，过滤，冷藏，析出晶体，滤过，滤液I备用，晶体用30% 50% v/v乙醇洗涤，减压干燥，得到晶体I ; 滤液I浓缩至含醇量为10% 30% v/v,冷藏，析出晶体，滤过，滤液II备用；用30% 50% v/v乙醇洗漆,减压干燥,得晶体II ； 浓缩滤液II，加O. I % O. 5%活性炭吸附，过滤，滤液浓缩至含醇量为10% 30% v/V,冷藏,析出晶体,滤过,滤液III备用；晶体用30% 50% v/v乙醇洗漆,减压干燥,得晶体 III ; 滤液III浓缩，过活性炭-硅胶柱，先用30% 50% v/v乙醇洗脱，再用70% 90%v/v乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩至含醇量为10% 30% v/v，冷藏，析出晶体，滤过，滤液IV备用；晶体用30% v/v乙醇洗涤，减压干燥，得晶体IV ； 滤液IV浓缩，冷藏，析出晶体，滤过，晶体用30% v/v乙醇洗涤，减压干燥，得晶体V ； E、混晶将晶体I、II、III、IV、V混合均匀，粉碎，即得银杏内酯。2.根据权利要求I所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤A所述提取的方式为回流提取或煎煮提取。3.根据权利要求2所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于所述回流提取采用乙醇、丙酮或乙酸乙酯提取，其中，不同提取溶剂的浓度及提取条件如下 乙醇浓度为50% 80% v/v，提取温度75 85°C，提取次数2 3次，时间每次I 2小时； 丙酮浓度为50% 80% v/v，提取温度45 55°C，提取次数2 3次，时间每次I 2小时； 乙酸乙酯浓度为50% 80% v/v，提取温度55 65°C，提取次数2 3次，时间每次I 2小时； 进一步，优选提取条件为提取3次，每次I. 5小时；乙醇浓度65% v/v ;丙酮浓度50%v/v;乙酸乙酯浓度60% v/v。4.根据权利要求2所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于所述煎煮提取采用乙醇、丙酮或乙酸乙酯提取，其中，不同提取溶剂的浓度及提取条件如下乙醇浓度为50% 80% v/v，提取温度80 90°C，提取次数2 3次，时间每次I 2小时； 丙酮浓度为50% 80% v/v，提取温度50 60°C，提取次数2 3次，时间每次I 2小时； 乙酸乙酯浓度为50% 80% v/v，提取温度60 65°C，提取次数2 3次，时间每次I 2小时； 进一步，优选提取条件为提取3次，每次I. 5小时；乙醇浓度65% v/v ;丙酮浓度50%v/v;乙酸乙酯浓度60% v/v。5.根据权利要求I所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤A所述抗氧化保护剂为中性氣基酸； 进一步，抗氧化保护剂优选丝氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺或苏氨酸中的至少一种； 进一步，抗氧化保护剂最优选蛋氨酸。6.根据权利要求I所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤A所述pH调节剂为有机弱酸； 进一步，pH调节剂优选枸橼酸、苹果酸或山梨酸中的至少一种； 进一步，pH调节剂最优选枸橼酸。7.根据权利要求I所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤B所述脂溶性溶剂为乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、丁酮中的至少一种。8.根据权利要求I所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤C过柱所述聚酰胺树脂柱中聚酰胺树脂的粒度为30 60目。9.根据权利要求I所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于步骤D析晶中所述活性炭-硅胶柱中活性炭与硅本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孙毅，朱永红，童正兵，王婕，
申请(专利权)人：成都百裕科技制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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