本发明专利技术提供的了一种乌苯美司水解中间体(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸的制备方法，直接利用水解后调节pH的方法游离拆分剂，选择适当浓度和体积的盐酸溶液进行水解，使操作更适合工业化生产，达到理想的收率和纯度利用DMF溶剂结晶，进一步提高产品质量，得到纯度更高，旋光度更高的白色晶体。本发明专利技术的方法操作简便，节约溶剂和能源，收率高，适合工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及有机化学领域，进一步涉及乌苯美司水解中间体的制备方法。
技术介绍
乌苯美司(外文名Ubenimex，Bestalin)是从链霉菌属(Streptomyces ofivorecticuli)的培养液中分离所得的二肽化合物，可竞争性地抑制氨肽酶B(aminopeptidase B)及亮氨酸肽酶(Leucineamino Peptidase)和半胱天冬酶(Caspase)，增强T细胞的功能，使NK细胞的杀伤活力增强，且可使集落刺激因子合成增加而刺激骨髓细胞的再生及分化。能干扰肿瘤细胞的代谢，抑制肿瘤细胞增生，使肿瘤细胞凋亡，并激活人体细胞免疫功能，刺激细胞因子的生成和分泌，促进抗肿瘤效应细胞的产生和增殖。可配合化疗、放疗及联合应用于白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症及造血干细胞移植后的治疗，以及其他实体瘤患者。乌苯美司化学名为N-[(2S，3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸，其结构式如下：从乌苯美司的结构式可以看出，分子中存在着三个手性中心，最早合成乌苯美司的报道是通过生物化学的细菌发酵培养。随着不对称合成的不断发展，越来越多的化学合成方法被报道出来。含有两个手性中心的中间体即4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酸的合成是研究的重点，现有的合成该中间体的方法存在合成步骤长，超低温反应，使用危险试剂等各种缺点，且合成的是消旋体，需经过复杂的拆分操作后才能进一步合成具有光学活性的乌苯美司。其中J.Antib.1983，36(6)，695-9报道的方法原料成本低，不使用危险试剂，且得到的是合成乌苯美司所需要的光学异构体(2S，3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酸，较早进行拆分可以提高收率，简化后续步骤，适合工业生产使用。该文献报道的方法反应路线如下：其中中间体4a即(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐可以先制备得到5a但不分离纯化，继续加浓盐酸进行水解反应得到中间体6即(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸。该方法利用碳酸氢钠将上步拆分产物溶解，将拆分剂游离，用乙酸乙酯萃取三次除去S(-)-α-苯乙胺，水相用浓盐酸酸化，减压浓缩至约一定体积，再加入浓盐酸回流2小时，反应液继续减压浓缩至干，加水溶解，于冰浴下用氢氧化钠水溶液调节pH＝5-6，析出固体，过滤，洗涤，干燥得到水解中间体(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸，收率63.8％，旋光+32.5°(C＝0.76，1N HCl)。该方法的工艺将除拆分剂和水解分步进行，使用乙酸乙酯萃取三次，两次减压浓缩水溶液，浪费溶剂且耗能多，不适合大规模生产。
技术实现思路
本专利技术提供了一种乌苯美司水解中间体(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸的制备方法，该制备方法为将(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺进行水解得到，同时除去拆分剂，该方法操作简便，节约能源，收率高，适合工业化生产。本专利技术提供的一种乌苯美司水解中间体的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：1)水解：将(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐加入4-6N的盐酸溶液中40～85℃反应3～5小时；2)析晶：用氢氧化钠溶液调pH值至4.5～9.5，析出固体，抽滤，干燥得(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸粗品；3)重结晶：粗品用DMF-水作重结晶溶剂进行重结晶纯化。本专利技术所述工艺的原料(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐按照J.Antib.1983，36(6)，695-9报道的方法制备。(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐与水解所用盐酸溶液的质量比为1∶3～6，将(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐加入不同浓度的盐酸溶液中，于50～60℃进行反应，利用高效液相色谱进行反应监控，不同反应条件下产物与原料HPLC面积百分比结果如下表：可见选用浓度为4～6N的盐酸溶液水解反应的效率较高，而采用1～3N的浓度的盐酸溶液反应时间严重滞后以致在短时间内反应不完全，而采用浓度大于6N的盐酸溶液时，由于盐酸溶液体积过少，不便于析晶时的搅拌。另外，(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐与水解所用盐酸溶液的质量比为1∶3～6时更适合搅拌和析晶。步骤2)利用3～8N浓度氢氧化钠溶液调节反应体系pH值，同时达到游离拆分剂与析晶的目的。专利技术人将100g(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐在4N盐酸溶液中水解，反应完成后，利用4N氢氧化钠溶液调节至不同pH值，析出粗品抽滤干燥后结果如下： pH值 3.5 4.5 5.5 6.5 7.5 8.5 9.5 10.5 粗品重 21.2g 48.6g 52.3g 52.2g 54.9g 55.0g 49.7g 18.3g由上表结果可知，在pH值过酸或者过碱，例如pH3.5和pH10.5的条件下，产物大部分残留在溶剂体系中，而pH7.5～8.5析出粗品最多，优选调pH至7.5～8.5，最优选8.2。本专利技术所述的重结晶溶剂为50～70％的DMF-水溶液，优选60％的DMF-水溶液，以达到去除粗品中残留的拆分剂和反应中杂质，提高产物品质的目的，粗品与重结晶溶剂的质量比为1∶6～12，优选1∶9。专利技术人曾尝试其他浓度的DMF水溶液，发现在DMF过多的情况下造成析晶困难，而水过多的情况造成粗品溶解困难。专利技术人将产物粗品用质量体积比为1∶9的60％的DMF水溶液进行重结晶，结晶后产物与粗品经过HPLC与旋光对比，结果如下： HPLC纯度 旋光度 产物粗品 95.4％ +28.6 重结晶产物 98.6％ +31.7由结果可知，DMF-水溶液重结晶可以有效去除粗品中残留的拆分剂及杂质，提高产品品质。本专利技术提供的了一种乌苯美司水解中间体(2S，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酸的制备方法，与文献J.Antibiotics，36(1983)，695～699记载的方法相比，本专利技术直接利用水解后调节pH的方法游离拆分剂，省去碳酸氢钠水溶液溶解进而用乙酸乙酯洗涤三次的步骤，节省大量溶剂；同时省去两次对于所用水溶液的蒸本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种乌苯美司水解中间体的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
1)水解：将(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁酸S(-)-α-苯乙胺盐加入4～6N的盐
酸溶液中40～85℃反应3～5小时；
2)析晶：用氢氧化钠溶液调pH值至4.5～9.5，析出固体，抽滤，干燥得(2S，3R)-3-氨
基-2-羟基-4-苯丁酸粗品；
3)重结晶：粗品用DMF-水作重结晶溶剂进行重结晶纯化。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述反应温度为50～60℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)(2S，3R)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-苯丁
酸S(-)-α-苯乙胺盐与盐酸溶液的质量比...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈轶之，张广明，钱建彬，钱怀伟，
申请(专利权)人：深圳万乐药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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