【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析领域，具体涉及合成硼替佐米原料药的中间体中的三种杂质包括乙酰胺、六甲基二硅氧烷和三甲基硅醇的检测方法。
技术介绍
1、硼替佐米是一种癌症治疗药物，是全球第一个合成的蛋白酶体抑制剂(proteasomeinhibitor)，可延缓、停止及治疗多发性骨髓瘤和被套细胞淋巴瘤恶化的情况，属于标靶治疗的新型抗癌药，2003年经fda批准上市，并于2008年6月被美国fda批准作为多发性骨髓瘤的一线治疗用药。该药物的发现曾获得医药界广泛关注，其作用机理获得2004年度诺贝尔化学奖，2006年获制药界最高荣誉—国际盖伦奖，被誉为“肿瘤治疗的革命，多发性骨髓瘤治疗的重大进步”。
2、硼替佐米化学名为[(1r)-3-甲基-1-[[(2s)-1-氧-3-苯基-2-[(呲嗪羧基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸，结构式如下：
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4、wo2009004350a1公开了硼替佐米的合成路线：
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6、该合成路线中ppna是合成硼替佐米的一个重要中间体，ppna化学名为n-(2-吡嗪基羰基)-l-苯丙氨酸钠盐，结构式如下：
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8、在ppna的合成过程中使用了n,o-双(三甲基硅基)乙酰胺(bsa)保护剂，bsa不稳定，极易降解生成乙酰胺、三甲基硅醇、六甲基二硅氧烷，这三种杂质的存在会进一步影响制备得到的硼替佐米原料药的质量，影响用药安全，因此需要建立相应分析方法，应用在硼替佐米中间体的检测中，对原料药及相关制剂的质量进行有效控制具有重要的意义。p>
9、上述三种杂质中，三甲基硅醇、六甲基二硅氧烷为液体形态，易挥发，乙酰胺为颗粒状固体，不易挥发，结构式分别如下：
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11、目前未检索到在同时对硼替佐米中间体ppna中三种杂质乙酰胺、三甲基硅醇和六甲基二硅氧烷进行检测的相关专利。专利技术专利(公开号：cn115248266a)公布了一种测定伏立康唑中间产品中可挥发杂质六甲基二硅氧烷和三甲基硅醇的检测方法，采用以100％-二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管色谱柱用气相色谱法测定，该法仅适用于非极性杂质的测定，对乙酰胺这种极性物质检测不适用，无法获得乙酰胺的正常色谱峰，无法同时检测乙酰胺、三甲基硅醇和六甲基二硅氧烷这三种杂质。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种硼替佐米中间体n-(2-吡嗪基羰基)-l-苯丙氨酸钠盐(ppna)中乙酰胺、三甲基硅醇、六甲基二硅氧烷杂质的检测方法，该方法采用气相色谱法能同时检测三种杂质，准确快速，能够有效用于该中间体的质量控制。
2、本专利技术提供的硼替佐米中间体n-(2-吡嗪基羰基)-l-苯丙氨酸钠盐(ppna)中杂质的检测方法，其特征在于，采用气相色谱法测定，其中色谱柱采用以聚乙二醇为固定相的毛细管色谱柱；采用的溶剂为体积百分含量为50～97％的n,n-二甲基甲酰胺的水溶液；柱温采用程序生温的方式，升温程序为37～43℃维持4～10min后升温，升温速度5～20℃/min，升温至220～280℃，维持1～10min。
3、现有技术分析三甲基硅醇、六甲基二硅氧烷杂质这两个非极性杂质采用100％-二甲基聚硅氧烷为固定相的db-1毛细管柱，但采用该色谱柱在分析硼替佐米中间体ppna中三种杂质乙酰胺、三甲基硅醇和六甲基二硅氧烷这三种杂质时发现，无法得到乙酰胺的正常峰，因此专利技术人对色谱柱进行了筛选研究。尝试采用适用性广的，极可能能同时分析非极性和极性杂质的db-624弱极性色谱柱，即以6％氰丙基苯、94％二甲基硅氧烷为固定相的色谱柱，但仍无法得到正常的乙酰胺色谱峰，出峰拖尾严重。研究中意外发现采用极性的以聚乙二醇为固定相的毛细管色谱柱，代表型号为agilent公司的db-wax色谱柱能够同时获得三个杂质的较好峰形，因此采用该色谱柱进行本专利技术检测分析方法的研究。
4、本专利技术在研究ppna中乙酰胺、三甲基硅醇和六甲基二硅氧烷这三种杂质的气相色谱检测方法过程中，发现选用常用的溶剂包括常用的乙腈、甲醇或二甲基亚砜作为溶剂时，检测结果发现溶剂峰对目标杂质峰存在干扰，因此不能选择上述三种常用溶剂作为溶剂。另外由于ppna是一种盐，与三种杂质无法都同时完全溶解于有机溶剂中，而单用水溶解，则会导致非极性杂质三甲基硅醇和六甲基二硅氧烷回收率不合格。因此选用合适的溶剂进行ppna中乙酰胺、三甲基硅醇和六甲基二硅氧烷这三种杂质检测遇到了困难。经实验发现，采用混合溶剂即体积百分含量为50～97％的n,n-二甲基甲酰胺的水溶液作为溶剂，能够使中间体ppna和三种杂质都能够溶解并达到测试浓度的要求，得到准确的检测结果。优选体积百分含量95％的n,n-二甲基甲酰胺水溶液。
5、本专利技术提供的检测方法，硼替佐米中间体ppna的测定浓度为1mg/ml～20mg/ml，根据ppna在溶剂中的溶解性以及杂质检测的灵敏度，当ppna浓度在1～20mg/ml满足测定要求，优选10mg/ml。
6、本专利技术提供的检测方法，其中用于进行气相色谱法测试的乙酰胺对照品溶液是如下方式配制的：取乙酰胺加溶剂溶解并定量稀释制成5μg～500μg/ml的溶液，杂质定位溶液优选500μg/ml，配制混合对照品溶液时，乙酰胺的浓度优选50μg/ml。
7、本专利技术提供的检测方法，其中用于进行气相色谱法测试的三甲基硅醇对照品溶液是如下方式配制的：取三甲基硅醇加溶剂溶解并定量稀释制成5μg～500μg/ml的溶液，杂质定位溶液优选500μg/ml，配制混合对照品溶液时，三甲基硅醇的浓度优选50μg/ml。
8、本专利技术提供的检测方法，其中用于进行气相色谱法测试的六甲基二硅氧烷对照品溶液是如下方式配制的：取六甲基二硅氧烷加溶剂溶解并定量稀释制成5μg～500μg/ml的溶液，杂质定位溶液优选500μg/ml，配制混合对照品溶液时，六甲基二硅氧烷的浓度优选50μg/ml。
9、本专利技术所述气相色谱法使用的色谱柱内径为0.18～0.53毫米，优选色谱柱的内径0.32毫米；色谱柱柱长为30～60m，优选色谱柱的柱长为30m；色谱柱中固定相液膜厚度为0.18μm～0.3μm，优选液膜厚度为0.25μm。
10、本专利技术提供的检测方法，进样方式为直接进样，进样体积为1.0μl。
11、本专利技术提供的检测方法，其中所述气相色谱法检测时，载气为氮气等惰性气体，载气流速为0.9～1.1ml/min，优选载气流速为1.0ml/min。
12、本专利技术提供的检测方法，所述气相色谱法分流比为1:1～10:1，优选2:1；检测器温度为245℃～255℃，优选250℃；进样口温度为245℃～255℃，优选250℃。
13、本专利技术提供的检测方法，所述气相色谱法色谱柱柱温采用程序升温的方式，优选的升温程序为40℃维持5分钟，然后升温，升温速率10℃/分钟，升温至230℃，维持1分钟。
14、本专利技术的检测方法具体包括以下步骤：
15、1)供试本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.硼替佐米中间体N-(2-吡嗪基羰基)-L-苯丙氨酸钠盐中三种杂质包括乙酰胺、六甲基二硅氧烷和三甲基硅醇的检测方法，其特征在于，采用气相色谱法测定，其中色谱柱采用以聚乙二醇为固定相的毛细管色谱柱；采用的溶剂为体积百分含量为50～97％的N,N-二甲基甲酰胺的水溶液；柱温采用程序生温的方式，升温程序为37～43℃维持4～10min后升温，升温速度5～20℃/min，升温至220～280℃，维持1～10min。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述气相色谱法的色谱柱的型号为DB-WAX。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述溶剂为体积百分含量95％的N,N-二甲基甲酰胺水溶液。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述升温程序为40℃维持5分钟，然后升温，升温速率10℃/分钟，升温至230℃，维持1分钟。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述气相色谱法的色谱条件还包括载气为氮气；载气流速为0.9～1.1ml/min；分流比为1:1～10:1；检测器温度为245℃～255℃；进样口温度为245
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于所述载气流速为1ml/min；分流比为1:1～10:1；检测器温度为250℃；进样口温度为250℃。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述气相色谱法进样方式为直接进样，进样体积为1.0μl。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于硼替佐米中间体PPNa的测定浓度为1mg/ml～20mg/ml。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于硼替佐米中间体PPNa的测定浓度为10mg/ml。
10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于具体包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.硼替佐米中间体n-(2-吡嗪基羰基)-l-苯丙氨酸钠盐中三种杂质包括乙酰胺、六甲基二硅氧烷和三甲基硅醇的检测方法，其特征在于，采用气相色谱法测定，其中色谱柱采用以聚乙二醇为固定相的毛细管色谱柱；采用的溶剂为体积百分含量为50～97％的n,n-二甲基甲酰胺的水溶液；柱温采用程序生温的方式，升温程序为37～43℃维持4～10min后升温，升温速度5～20℃/min，升温至220～280℃，维持1～10min。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述气相色谱法的色谱柱的型号为db-wax。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述溶剂为体积百分含量95％的n,n-二甲基甲酰胺水溶液。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述升温程序为40℃维持5分钟，然后升温，升温速率10℃/分钟，升温至230℃，维持1分钟。
...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗唐，钟剑，于玉根，袁庆，翟丽平，陈博，
申请(专利权)人：深圳万乐药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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