本发明专利技术涉及具有中和ｈＣＭＶ的高效价的中和抗体和其抗体片段，其中所述抗体和抗体片段对于一个、或组合的两个或更多ｈＣＭＶ基因ＵＬ产物是特异性的。本发明专利技术还涉及产生这些抗体和抗体片段的永生化Ｂ细胞，并且涉及结合这些抗体和抗体片段的抗原表位。另外，本发明专利技术涉及抗体、抗体片段和抗原表位在筛选方法以及疾病诊断、预防或治疗中的应用。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人巨细胞病毒中和抗体及其应用本申请要求于2008年7月16日提交的美国临时申请No. 61/081，334的优先权， 其所披露的内容通过引用完整地包含于此。
技术介绍
人巨细胞病毒(hCMV)是一种广泛分布的病原体，其可在有免疫抑制的成人中以及在感染胎儿后导致严重的病理，并参与诸如动脉粥样硬化等慢性疾病。hCMV能感染多种细胞类型，包括成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞和造血细胞。体外培殖的hCMV减毒株正被开发作为候选疫苗，其已经丧失了对内皮细胞的嗜性，但是仍然保留感染成纤维细胞的能力。hCMV的细胞嗜性被认为是由两种病毒糖蛋白复合物调控的。糖蛋白如gH、gL 和g0的复合物似乎是感染成纤维细胞所需要的，而gH、gL和由UL131-UL128基因编码的蛋白质的复合物参与内皮细胞、上皮细胞和树突状细胞的感染。超免疫球蛋白已经商业化用于预防移植相关的hCMV疾病，并且最近的证据表明它们对妊娠的妇女有治疗效果。该治疗方法受限于低剂量的可以转移的中和抗体，由此，具有高中和能力的人抗体(如人单克隆抗体)的可用性将是非常希望的。尽管一些针对gH、gB以及UL128和UL130基因产物的抗体已经证明具有体外中和活性，并且一种抗gH的抗体已经在临床实验中进行了评估(由于缺乏治疗效果而终止)，但迄今为止分离的抗体的中和效价不高。当抗体浓度范围是0.5-20 μ g/ml时可以观察到这些抗体的中和作用。此外，目前的方法通常使用成纤维细胞作为靶细胞测定抗-hCMV抗体的中和效价。然而，已知hCMV通过感染其它细胞类型诸如内皮细胞、上皮细胞以及白细胞也能引起病理。已知的UL128和UL130的抗体显示极低的中和内皮细胞感染的效价，并且似乎没有任何能够以高效价中和非成纤维细胞靶细胞感染的单克隆抗体。因此，人们需要能够以高效价中和hCMV感染，特别是非成纤维细胞靶细胞的hCMV 感染的抗体，以及这些抗体结合的靶标的说明。专利技术概述本专利技术部分程度上是基于能够以高效价中和hCMV感染的新抗体以及本专利技术的抗体结合的新抗原表位的发现。因此，一方面，本专利技术包括一种具有中和hCMV的高效价的抗体以及其抗原结合片段。在本专利技术的一外实施方案中，本专利技术包括一种单克隆抗体，或其抗原结合片段，其能够与hCMV UL128蛋白的抗原表位结合，其中该抗体中和hCMV感染。本专利技术的另一实施方案中，本专利技术包括一种抗体，或其抗原结合片段，其能够与由hCMV蛋白gH、gL、UL128和 UL130，hCMV蛋白UL128、UL130和UL131A，或hCMV蛋白UL130和UL131A形成的抗原表位结合，其中所述抗体中和hCMV感染。在本专利技术的又一实施方案中，本专利技术包括一种抗体，或其抗原结合片段，其含有至少一个与 SEQ ID NOs :188-193，204，205，210，174-177，149，178，65-70，81-86，97-102， 129-134，145-150，113，161-164，1-6,17-22，33-38，49-54 或 114-118 中的任一序列至少有 95%序列同一性的互补决定区(“⑶R”)序列，其中所述抗体中和hCMV感染。在本专利技术的又一实施方案中，本专利技术包含选自SEQ ID NOs =188,174,65,81,97, 129，145，113，1，17,33 和 49 的重链 CDRl ；选自 SEQ ID NOs :189，204，175，66，82，98，130， 146，161,2,2,18，34，50 和 114 的重链 CDR2 ；和选自 SEQ ID NOs 190，205，210，176,67,83, 99，131，147，162，3，19，35，51和115的重链CDR3，其中所述抗体中和hCMV感染。本专利技术的又一实施方案中，本专利技术包括一种抗体，或其抗原结合片段，其包含选自SEQ ID N0s:191, 177,68,84,100，132，148，163，4，20，36，52 和 116 的轻链 CDRl ；选自 SEQ ID NOs :192，149， 69,85,101，133，5，21，37，53 和 117 的轻链 CDR2 ；和选自 SE Q ID NOs :193，178,70,86,102， 134，150，164，6，22，38，54和118的轻链CDR3，其中所述抗体中和hCMV感染。在本专利技术的另一实施方案中，本专利技术包括一种抗体，或其抗原结合片段，其中该抗体含有一包含SEQ ID NO :200所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID N0:201所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :200所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :213所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID N0:208所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :201所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :208所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :213所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :212所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :201所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :212所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :213所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID N0:184所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO 185所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :77所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :78所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :93所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID N0:94所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO: 109所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO 110所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID N0:141所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO: 142所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO: 157所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO 158所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO 170所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID N0:171所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :13所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO 14所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID N0:29所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :30所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO :45所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :46所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO 61所示氨基酸序列的重链可变区和一包含SEQ ID NO :62所示氨基酸序列的轻链可变区；或一包含SEQ ID NO: 125所示氨基酸序列的重链可变区和一包含 SEQ ID NO 126所示氨基酸序列的轻链可变区，并且所述抗体中和hCMV感染。在本发本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种结合人巨细胞病毒（ｈＣＭＶ）ＵＬ１２８蛋白的抗原表位的单克隆抗体，或其抗原结合片段，其中所述抗体中和ｈＣＭＶ感染。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·兰扎维奇雅，
申请(专利权)人：生物医学研究学会，
类型：发明
国别省市：CH
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