一种阴道炎联合检测试剂盒制造技术

本发明专利技术的目的是提供一种可同时评估受检者阴道微生态环境、清洁度和细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎致病菌状况的细菌性阴道炎联合检测试剂盒。采用如下技术方案提供一种阴道炎联合检测试剂盒，包括反应装置、稀释液和显色液，所述反应装置为含有六个反应盲孔的孔式盒状反应装置，盲孔内分别放入过氧化氢浓度检测试剂垫，白细胞酯酶检测试剂垫，唾液酸苷酶检测试剂垫，脯氨酸氨基肽酶检测试剂垫，乙酰氨基葡萄糖苷酶检测试剂垫，pH检测试纸。通过联合检测，可以检测由绝大多数BV病原菌，白色念珠菌和滴虫引起的阴道炎，极大程度上避免了单纯检测一种酶活性导致的BV漏检，提高了检测的可靠性和准确度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种阴道炎的联合检测试剂盒，特别用于辅助诊断女性三种阴道疾病细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎。
技术介绍
细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis,BV)过去称为非特异性细菌性阴道病。1955 年Gardner和Dukes首先从非特异性细菌性阴道病患者中分离出阴道嗜血杆菌，因而称此病为阴道嗜血杆菌性细菌性阴道病。到80年代人们发现此菌和其它嗜血杆菌不同，定名为阴道加特纳菌，改称此病为加特纳菌性细菌性阴道病。1983年在斯德哥尔摩国际会议上选定了最为简明的名称-细菌性阴道病，理由是其病原体不仅是阴道加特纳菌，而且还有其它厌氧菌；另外此病炎症不明显，阴道分泌物中白细胞稀少，称为阴道病比细菌性阴道病更为恰当。细菌性阴道病是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病，在细菌学上表现为生殖道正常菌群(产过氧化氢的乳酸杆菌)数量减少，而由多种致病性厌氧菌感染(主要是阴道加德纳菌)引起的无明显黏膜炎症的一种疾病。本病常见，国内最早关于此病的调查为1990 年，全国性病防治研究中心在南京地区发现其患病率在成年健康妇女中为18. 92%。细菌性阴道病是由于病原微生物(包括淋病双球菌、霉菌、滴虫等微生物)感染而引起的细菌性阴道病症。细菌性阴道病根据年龄和感染源的不同，可分为老年性细菌性阴道病、滴虫性细菌性阴道病、霉菌性细菌性阴道病、淋病性细菌性阴道病、阿米巴性细菌性阴道病、阴道嗜血杆菌性细菌性阴道病、婴幼儿细菌性阴道病、气肿性细菌性阴道病和非特异性细菌性阴道病。1983年Amsel等经过多年的研究及临床观察，提出四项综合临床指标作为诊断BV 的依据，即①用精密试纸测定阴道PH值，阴道分泌物pH值> 4. 5 ；②胺试验阳性，用棉拭子取阴道分泌物，加1滴KOH闻有无鱼腥样气味，若有为阳性；③查见线索细胞，线索细胞为阴道脱落上皮细胞表面黏附许多小杆菌，边缘不清；④革兰染色镜检找到大量阴道加特纳菌(CV)，而乳酸杆菌少(1 5个/HP)，甚至缺乏。具备以上4项指标中至少3项，其中线索细胞阳性为必备条件，即可确诊BV。该方法被认为是诊断BV的“金标准”，习惯上称为 Amsel 法。Amsel法4项指标中除镜检发现线索细胞外，其他标准影响因素较多，如精液中碱性物质的刺激可使胺试验呈阳性，胺试验对诊断与否均可导致上生殖道及围产期并发症。因此Amsel诊断标准不易掌握，易受人为因素影响，而采用细菌培养，结果繁琐，费时， 不利于患者及时诊治，限制了推广应用。因此国内外许多厂商推出了商品试剂盒来测定阴道分泌物酶活性，如BVBlue和安图公司的白细胞酯酶和唾液酸苷酶联合检测(申请号 200610056827. X)但大多厂家都采用单项或两性酶活性测定，如唾液酸苷酶+白细胞酯酶、 唾液酸苷酶+三甲胺测定、唾液酸苷酶+过氧化氢等。考虑到商业成本问题，这些产品大都以单项的形式出售，用户使用不便，且分析成本高，不便普及使用。由于BV经常为多种致病性厌氧菌感染，同时测定一两种酶的活性不足以判定BV感染的具体情况，有时甚至造成错4判和误判。BV的敏感度最低，其结果判断易受主观因素影响，阴道灌洗、用药等可影响阴道 PH值，阴道pH升高对诊断BV敏感性高，但特异性低，约91 %的BV患者pH > 5. 0。同时约 50% BV患者无临床症状，而BV患者存在临床症状念珠菌通常是一种腐败物寄生菌，可生活在正常人体的皮肤、粘膜、消化道或其他脏器中，经常在阴道中存在而无症状。白带增多的非孕妇女中，约有10%、孕妇中约有30% 在阴道内有此菌寄生，当阴道糖原增加、酸度升高时，或在机体抵抗力降低的情况下，便可成为致病的原因，长期应用广谱抗生素和肾上腺皮质激素，可使霉菌感染大为增加。因为上述两种药物可导致机体内菌群失调，改变了阴道内微生物之间的相互制约关系，抗感染的能力下降。此外，维生素缺乏(复合维生素B)、严重的传染性疾病，和其他消耗性疾病均可成为白色念珠菌繁殖的有利条件。妊娠期阴道上皮细胞糖原含量增加，阴道酸性增强，加之孕妇的肾糖阈降低，常有营养性糖尿，小便中糖含量升高而促进白色念珠菌的生长繁殖。念珠菌感染最常见的症状是白带多，外阴及阴道灼热瘙痒，外因性排尿困难，外阴地图样红斑。典型的白带呈凝乳状或为片块状，阴道粘膜高度红肿，可见白色鹅口疮样斑块附着，易剥离，其下为受损粘膜的糜烂基底，或形成浅溃疡，严重者可遗留瘀斑。但白带并不都具有上述典型特征，从水样直至凝乳样白带均可出现，如有的完全是一些稀薄清澈的浆液性渗出液，其中常含有白色片状物。妊娠期霉菌性阴道炎的瘙痒症状尤为严重，甚至坐卧不宁，痛苦异常，也可有尿频、尿痛及性交痛等症状。另外，尚有10%左右的妇女及30%孕妇虽为念珠菌携带者，却无任何临床表现。念珠菌性阴道炎通常靠目检阴道排泄物或是阴道分泌物镜检和念珠菌培养来确诊。目检主观性大，容易造成误诊，镜检和念珠菌培养过程太繁琐。滴虫阴道炎(trichomonasvaginitis)是常见的阴道炎，由阴道毛滴虫所引起。临床上以白带增多、质稀有泡沫、秽臭，阴道瘙痒为主要表现。发病是由于感染的阴道毛滴虫消耗了阴道内的糖原，破坏了阴道的自净防御机能，继发细菌感染所致。滴虫呈梨形，后端尖，约为多核白细胞的引起滴虫性阴道炎的滴虫2 3倍大小。虫体顶端有鞭毛4根，体部有波动膜，后端有轴柱凸出。活的滴虫透明无色，呈水滴状，诸鞭毛随波动膜的波动而摆动， 滴虫的生活史简单，只有滋养体而无包囊期，滋养体生活力较强，能在3 5°C生存2日；在 46°C时生存20 60分钟；在半干燥环境中约生存10小时；在普通肥皂水中也能生存45 120分钟。在pH5以下或7. 5以上的环境中则不生长，滴虫阴道炎患者的阴道pH值一般为 5. 1 5. 4。隐藏在腺体及阴道皱襞中的滴虫于月经前后，常得以繁殖，引起炎症的发作。它能消耗或吞噬阴道上皮细胞内的糖原，阻碍乳酸生成。滴虫不仅寄生于阴道，还常侵入尿道或尿道旁腺，甚至膀胱、肾盂以及男性的包皮褶、尿道或前列腺中。滴虫性阴道炎是感染了阴道毛滴虫后引起的一种阴道炎症。是最常见的阴道炎症之一。白带增多及外阴瘙痒滴虫阴道炎的主要症状是稀薄的泡沫状白带增多及外阴瘙痒，若有其他细菌混合感染则排出物呈脓性，可有臭味，瘙痒部位主要为阴道口及外阴，间或有灼热、疼痛、性交痛等。若尿道口有感染，可有尿频、尿痛，有时可见血尿。检查时可见阴道粘膜充血，严重者有散在的出血斑点，后穹窿有多量白带，呈灰黄色、黄白色稀薄液体或为黄绿色脓性分泌物，常呈泡沫状。带虫者阴道粘膜可无异常发现。少数患者阴道内有滴虫存在而无炎症反应，称为带虫者。有人认为滴虫单独存在时不能引起炎症，因其消耗阴道上皮细胞内糖原，改变了阴道酸碱度，破坏了防御机制，促进继发性的细菌感染，故常在月经期前后、妊娠期或产后等阴道PH改变时，引起炎症发作。滴虫性阴道炎的诊断较易，若能在阴道分泌物中找到滴虫即可确诊，目前主要的诊断方法有滴虫病悬滴法，滴虫病涂色染色法，滴虫病培养法，免疫学方法如荧光抗体检查法，ELISA法，胶乳凝集法等。这些方法中悬滴法是检查阴道毛滴虫最简单方法，但要制作涂片，仍是比较繁琐的方法。目前没有同时对上述三种阴道炎进行同时检测的产品，每种病菌要单独检测，多采用本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种阴道炎联合检测试剂盒，其特征在于，包括反应装置、稀释液和显色液，所述反应装置为含有六个反应盲孔的孔式盒状反应装置，盲孔内分别放入过氧化氢浓度检测试剂垫，白细胞酯酶检测试剂垫，唾液酸苷酶检测试剂垫，脯氨酸氨基肽酶检测试剂垫，乙酰氨基葡萄糖苷酶检测试剂垫，ｐＨ检测装置，所述稀释液为生理盐水与ＭＥＳ缓冲液混合而成的溶液，所述显色液为固紫Ｂ溶液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：练惠辉，胡守旺，姚铭锋，谢佐福，周晓强，阳卫超，陈宁，
申请(专利权)人：泰普生物科学中国有限公司，
类型：发明
国别省市：35