一种禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种禽肉中泰乐菌素用的试剂盒，所述试剂盒的内部放置有磷酸二氢铵溶液、无水磷酸二氢铵、磷酸、二水合磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、正己烷、甲醇、石油醚、三蒸水和二氯甲烷，一种禽肉中泰乐菌素检测方法，检测方法包括如下步骤：S1，用移液器取出0.1‑0.5mol/L的磷酸二氢铵溶液，用电子天平称取0.1‑0.5g的无水磷酸二氢铵，放入烧杯内溶解。该禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒，实用性能好，检测更加方便，省时省力，检测精确度更高，能够对禽肉内的残留泰乐菌素进行精确的检测，有效的避免了泰乐菌素对人们健康的危害，成本更低，检测效率高。

Methods and kits for the detection of a tylosin in poultry

Kit of the invention discloses a poultry tylosin in use, the inside of the kit is placed two hydrogen ammonium phosphate solution and anhydrous phosphoric acid two ammonium hydrogen phosphate, sodium dihydrogen phosphate, potassium dihydrogen phosphate, two water, two potassium hydrogen phosphate trihydrate, n-hexane, methanol, petroleum ether, dichloromethane and distilled water three. The detection method of tylosin in poultry. The detection method comprises the following steps: S1, with pipettors removed 0.1 0.5mol/L two hydrogen ammonium phosphate solution, using the electronic balance two ammonium hydrogen phosphate anhydrous 0.1 0.5g, dissolved into a beaker. Method and kit for tylosin detecting the poultry, the practical performance is good, more convenient, time-saving, high detection accuracy, can the residual tylosin on poultry in for accurate detection, effectively avoid the tylosin harm to people's health, lower cost, high detection efficiency.

【技术实现步骤摘要】
一种禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒
本专利技术涉及泰乐菌素检测
，具体为一种禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒。
技术介绍
泰乐菌素(tylosin)是弗氏链霉菌产生的一种大环内酯类抗生素，自80年代开始，泰乐菌素在国际上被广泛地用作禽畜专用的抗菌促生剂，对治疗禽畜的支原体疾病和革兰氏阳性菌的感染、促禽畜生长、降低死亡率和提高饲料转化率有明显的作用，泰乐菌素在动物组织中的残留，会威胁到食品安全，对人类的健康造成危害，我国农业部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》对泰乐菌素在动物性食品中残留制定了最高残留限量，其中，规定了泰乐菌素在鸡肝组织中的最高残留限量为0.13mg/kg，泰乐菌素在猪肉组织中的最高残留限量为0.2mg/kg。近年来，食品安全问题一直为人们所讨论的热门话题，禽肉中残留的泰乐菌素经常被提起，禽肉中残留的泰乐菌素严重危害了人们的健康，现有泰乐菌素的检测方法大多为微生物法和仪器分析法，但微生物法的精确度低，仪器分析法的成本过高，过于繁琐，检测效率低，为此，我们提出一种高效快捷的禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒。
技术实现思路
（一）解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒，解决了检测效率低的问题。（二）技术方案为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种禽肉中泰乐菌素用的试剂盒，所述试剂盒的内部放置有磷酸二氢铵溶液、无水磷酸二氢铵、磷酸、二水合磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、正己烷、甲醇、石油醚、三蒸水和二氯甲烷。一种禽肉中泰乐菌素检测方法，检测方法包括如下步骤：S1，用移液器取出0.1-0.5mol/L的磷酸二氢铵溶液，用电子天平称取0.1-0.5g的无水磷酸二氢铵，放入烧杯内溶解，在4-10℃的环境下，反应5-10min；S2，量取12-14mL的磷酸，加水定容至800-1000mL，并标记为A液，称取30-32g的二水合磷酸二氢钠，加水定容至800-1000mL，并标记为B液，取A液450-455mL，451.6mL、453.5mL、454.1mL、B液545-550mL，548.4mL、546.5mL、545.9mL，配制成PH为2.1-2.5的磷酸盐缓冲液I，并用PH值测定仪经常实时监测；S3，用电子天平称取4-5g的磷酸二氢钾和0.5-0.8g的三水合磷酸氢二钾，放入烧杯内溶解，加水定容至450-500mL，配制成PH为5.5-5.8的磷酸盐缓冲液II，并用PH值测定仪经常实时监测；S4，称取10-20g的禽肉样品，粉碎后用滤纸包好放入索氏提取器中，加入0.5-1g的正己烷，用60-75℃水浴脱脂至无色，并取出晾干备用；S5，称取1-2g的脱脂后样品，并放入冷冻离心机的离心管内，加入10-15mL的甲醇，超声提取25-30min，提取完毕后，在5-10℃的环境下，8000-10000r/min离心10-15min，取上清液，残渣再次提取2次，合并3次提取液，在4-10℃的环境下，4500-5000r/min离心5-10min，并将提取液标记为甲液；S6，当S5完成后，取出30-50mL的甲液并放入125mL的分液漏斗中，取30-40mL的石油醚并加入分液漏斗内，振荡1-3min，静置分层后，取下层溶液于300mL的分液漏斗中，并加入10-20mL的三蒸水和20-30mL的二氯甲烷，振荡3-5min，静置分层后，将下层溶液收集在烧瓶中，再向300mL的分液漏斗加入20-30mL的二氯甲烷，振荡3-5分钟，静置分层后，将下层溶液再次收集在烧瓶中；S7，将两次收集的二氯甲烷层在50-60℃的环境下蒸干，并标记为A残渣，取0.5-1g的A残渣、3-5mL的磷酸盐缓冲液I和0.5-1mL的乙腈放入烧杯内，反应3-5min，取0.5-1g的A残渣、3-5mL的磷酸盐缓冲液II和0.5-1mL的乙腈放入另一个烧杯内，反应3-5min，供高效液相色谱检测。优选的，所述离心管的容量为50mL。优选的，所述烧杯、分液漏斗和离心管的数量均至少为五个。优选的，所述电子天平的型号为AL204。优选的，所述索氏提取器的型号为SXT-06。优选的，所述PH值测定仪的型号为BPH-200A。优选的，所述冷冻离心机的型号为X-15R。（三）有益效果本专利技术提供了一种禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒，具备以下有益效果：（1）该禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒，本申请所提出的检测方法，实用性能好，通过磷酸盐缓冲液I和磷酸盐缓冲液II，配合高效液相色谱的效果，能够对样品内部的泰乐菌素进行有效的检测，检测更加方便，省时省力，检测精确度更高。（2）该禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒，通过设置有试剂盒，配合本申请所提出的泰乐菌素检测方法，能够对禽肉内的残留泰乐菌素进行精确的检测，有效的避免了泰乐菌素对人们健康的危害，成本更低，检测效率高。（3）该禽肉中泰乐菌素检测方法及试剂盒，通过配套多个烧杯、分液漏斗和离心管，能够进行多次检测和对比，保证了实验的相对精确性，本申请所提到的设备，其型号均为优选型号，精确度更好，实验效果更好，有效的降低了检测的偏差。具体实施方式基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供一种技术方案：一种禽肉中泰乐菌素用的试剂盒，试剂盒的内部放置有磷酸二氢铵溶液、无水磷酸二氢铵、磷酸、二水合磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、正己烷、甲醇、石油醚、三蒸水和二氯甲烷。实施例1一种禽肉中泰乐菌素检测方法，检测方法包括如下步骤：S1，用移液器取出0.1mol/L的磷酸二氢铵溶液，用电子天平称取0.1g的无水磷酸二氢铵，放入烧杯内溶解，在4℃的环境下，反应5min；S2，量取12mL的磷酸，加水定容至800mL，并标记为A液，称取30g的二水合磷酸二氢钠，加水定容至800mL，并标记为B液，取A液451.6mL，B液548.4mL，配制成PH为2.1的磷酸盐缓冲液I，并用PH值测定仪经常实时监测；S3，用电子天平称取4g的磷酸二氢钾和0.5g的三水合磷酸氢二钾，放入烧杯内溶解，加水定容至450mL，配制成PH为5.5的磷酸盐缓冲液II，并用PH值测定仪经常实时监测；S4，称取10g的禽肉样品，粉碎后用滤纸包好放入索氏提取器中，加入0.5g的正己烷，用60℃水浴脱脂至无色，并取出晾干备用；S5，称取1g的脱脂后样品，并放入冷冻离心机的离心管内，加入10mL的甲醇，超声提取25min，提取完毕后，在5℃的环境下，8000r/min离心10min，取上清液，残渣再次提取2次，合并3次提取液，在4℃的环境下，4500r/min离心5min，并将提取液标记为甲液；S6，当S5完成后，取出30mL的甲液并放入125mL的分液漏斗中，取30mL的石油醚并加入分液漏斗内，振荡1min，静置分层后，取下层溶液于300mL的分液漏斗中，并加入10mL的三蒸水和20mL的二氯甲烷，振荡3min，静置分层后，将下层溶液收集在烧瓶中，再向300mL的分液漏斗加入20mL的二氯甲烷，振荡3分钟，静置分层后，将下层溶液再次收集在烧瓶中；S7，将两次收集的二氯甲烷层在50℃的环境下蒸干，并标记为A残渣，取0本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种禽肉中泰乐菌素用的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的内部放置有磷酸二氢铵溶液、无水磷酸二氢铵、磷酸、二水合磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、正己烷、甲醇、石油醚、三蒸水和二氯甲烷。

【技术特征摘要】
1.一种禽肉中泰乐菌素用的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的内部放置有磷酸二氢铵溶液、无水磷酸二氢铵、磷酸、二水合磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、正己烷、甲醇、石油醚、三蒸水和二氯甲烷。2.一种禽肉中泰乐菌素检测方法，其特征在于：检测方法包括如下步骤：S1，用移液器取出0.1-0.5mol/L的磷酸二氢铵溶液，用电子天平称取0.1-0.5g的无水磷酸二氢铵，放入烧杯内溶解，在4-10℃的环境下，反应5-10min；S2，量取12-14mL的磷酸，加水定容至800-1000mL，并标记为A液，称取30-32g的二水合磷酸二氢钠，加水定容至800-1000mL，并标记为B液，取A液450-455mL，451.6mL、453.5mL、454.1mL、B液545-550mL，548.4mL、546.5mL、545.9mL，配制成PH为2.1-2.5的磷酸盐缓冲液I，并用PH值测定仪经常实时监测；S3，用电子天平称取4-5g的磷酸二氢钾和0.5-0.8g的三水合磷酸氢二钾，放入烧杯内溶解，加水定容至450-500mL，配制成PH为5.5-5.8的磷酸盐缓冲液II，并用PH值测定仪经常实时监测；S4，称取10-20g的禽肉样品，粉碎后用滤纸包好放入索氏提取器中，加入0.5-1g的正己烷，用60-75℃水浴脱脂至无色，并取出晾干备用；S5，称取1-2g的脱脂后样品，并放入冷冻离心机的离心管内，加入10-15mL的甲醇，超声提取25-30min，提取完毕后，在5-10℃的环境下，8000-10000r/min离心10-15min，取上清液，残渣再次提取2次，合并3次提取液，在4-10℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵春城，徐静，吴敏芳，胡勇，蒋韦艳，刘金杰，
申请(专利权)人：无锡艾科瑞思产品设计与研究有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32