公开了具有组蛋白脱乙酰酶抑制活性的异羟肟酸衍生物在制备抗炎药物中的应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及具有组蛋白脱乙酰酶抑制活性的异羟肟酸衍生物在制备抗炎药物中的应用。一些抑制组蛋白脱乙酰酶的异羟肟酸衍生物是已知的。那些最充分研究的是N-辛二酰苯胺(suberoylanilide)异羟肟酸(SAHA)、N-羟基-3--苯甲酰胺(CBHA)和制滴菌素(TSA)。其他衍生物描述于Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，3003-3007，1998；Tumori，2001年11月-12月，87(6)S12-4；AnticancerDrugs，2002年1月，13(1)1-13；Nature Rev Cancer，2001年12月，1(3)194-202；Curr Opin Oncol，2001年11月，13(6)477-83；Cancer Chemother Pharmacol，2001年8月，48 Suppl 1S20-6；CancerChemother Pharmacol，2001年8月，48 Suppl 1S17-9；Haematologica，2001年9月，86(9)908-17。这些化合物主要作为潜在的抗肿瘤药物进行研究一种从吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)分离的抗真菌抗生素制滴菌素是鼠红白血病细胞分化的有力诱导物(Cancer Res.47，3288-3691，1987)，而SAHA和CBHA已由Sloan Kettering Institute(WO95/31977)作为肿瘤细胞分化的诱导剂进行了研究。组蛋白脱乙酰酶抑制剂治疗肿瘤的治疗应用描述于AnticancerRes.20，1471-1486，2000和Exp.Opin.Invest.Drugs 8(10)，1611-1621，1999。现在已发现已知的具有组蛋白脱乙酰酶抑制活性的异羟肟酸衍生物尤其是制滴菌素和SAHA抑制促炎细胞因子的合成，且因此可用于治疗可通过抑制那些细胞因子而减轻的病症。具有炎症和/或自身免疫基础的这种病症的例子包括多发性硬化、Crohn氏疾病和溃疡性结肠炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、牛皮癣、脊椎关节病(anchilosating spondilitis、牛皮癣性关节炎、与溃疡性结肠炎相关的关节炎)、AIDS-相关的神经病、哮喘、慢性阻塞性肺疾病、支气管炎、胸膜炎、急性和慢性肝炎(病毒性的、细菌性的或毒性的)、急性肾小球肾炎以及广而言之所有具有炎症成分的病症。对于考虑的治疗应用，依赖于涉及的病症和正被讨论的化合物的药理毒理学特征，异羟肟酸衍生物将以1～500mg之间的剂量每日一次或多次给予，该衍生物可以以适当的口服、肠胃外或局部制剂的形式给予。下面的实施例更详细地阐明了本专利技术。实施例1-体外细胞因子生产的抑制用脂多糖(LPS)对淋巴细胞的处理诱导了各种促炎细胞因子的生产，如TNFα、IL-1β和IFNγ(J.Biol.Chem.1990；265(18)10232-10237；Science，1998；2811001-1005)。SAHA和TSA的作用已通过估计该化合物对来自用LPS刺激的健康志愿者(2～6个供体)外周血单核细胞(PBMC)的细胞因子生产的抑制作用而进行了研究。使用了来自健康志愿者的外周血液或棕黄层样品。将样品通过用Ficoll-Hypaque在密度梯度上进行离心而分离，并将这样获得的PBMC接种于96孔的皿中(500,000细胞/孔)，与各种剂量的SAHA或TSA温育60分钟，然后用来自大肠杆菌(E.coli)O55B5的LPS(10ng/ml)在该化合物存在时刺激24小时。在处理末期，促炎细胞因子TNFα、IL-1β通过使用特异性的商业抗体的电化学发光测定(ECL)来测量。干扰素γ(IFNγ)是用商业上可购得的ELISA测定进行测量的。细胞因子IFNγ是由T淋巴细胞在由促炎细胞因子尤其是IL-12和IL-18刺激之后生产的(Dinarello C.A.和Moldawer L. L.Proinflammatory and anti-inflammatory cytokines in rheumatoidarthritis.A Primer for clinicians.2nd Edition，Amgen Inc.，2000)。在此基础上估计了SAHA和TSA对IFNγ合成的作用，该IFNγ合成是通过在体外用IL-12和IL-18刺激PBMC来诱导的。将PBMC接种于圆底的96-孔皿上(500,000细胞/皿)，并与各种剂量的SAHA或TSA温育60分钟。最后，在该化合物存在时通过同时加入重组的IL-12(10ng/ml)和重组的IL-18(20ng/ml)而对细胞刺激48小时。产生的IFNγ量是用商业上的ELISA测定确定的。各种剂量的SAHA和TSA的作用是作为相对于未处理的对照细胞对细胞因子生产的抑制百分数而测量的。能够诱导50％的细胞生长抑制(IC50)的浓度通过线性回归确定。结果总结于下表中SAHA TSA细胞因子IC50(nM) IC50(nM)TNFα20050IL-1β 100100IFNγ 50 10IFNγ(来自IL-12+IL-18) 740490这些结果清楚地显示SAHA和TSA抑制所有由LPS诱导的炎症细胞因子的合成，并且具有纳摩尔范围(50-200mM)内的IC50。SAHA和TSA也抑制T淋巴细胞对IFNγ的合成，如当所用的刺激物为对该细胞系特异性的IL-12和IL-18的组合时由其功效所证明的(各自的IC50为740nM和490nM)。实施例2-体内细胞因子生产的抑制已知LPS向实验室动物的全身给予诱导了促炎细胞因子的快速、大量生产(Immunopharmacol.1992；14(6)1045-1050)。将雌性BALB/c小鼠(20-22克)用SAHA在所示的各种剂量进行口服处理，然后于60分钟后用来自大肠杆菌O55B5的LPS(30mg/Kg腹腔内施用)进行处理。给予内毒素90分钟之后，从所有处理的动物中获取血液样品(10个动物/组)，并用商业ELISA测定测量细胞因子。结果陈述于下表中，并表达为细胞因子生产的抑制百分数％TNFα的 IL-1β的 IL-6的抑制处理抑制 抑制SAHA0.1 mg/Kg 4013101mg/Kg5315310mg/Kg 6735725mg/Kg 68372550mg/Kg 未做5129上述结果显示SAHA是口服活性的且能够在剂量依赖的程度上抑制小鼠体内由给予内毒素诱导的促炎细胞因子的合成，从而证实了在体外获得的结果。实施例3.伴刀豆凝集素A(Con A)诱导的肝损伤。向C57B16小鼠腹腔内(i.p.)注射水载体或SAHA，且1小时后静脉内(i.v.)注射Con A，如描述于Proc.Natl.Acad.Sci.USA，(2000)，97，2367-2372中的。24小时后，测量了血清中的氨基-丙氨酸转移酶。Con A的静脉内注射导致12-24小时内肝细胞的死亡，并且具有肝中的酶如丙氨酸转氨酶(ALT)显著升高的血清水平。在Con A之前用腹腔内(i.p.)给予单剂量的SAHA(50mg/kg)预处理的小鼠中，与在载体处理的本文档来自技高网...
【技术保护点】
具有组蛋白脱乙酰酶抑制活性的异羟肟酸衍生物在制备抗炎药物中的应用。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：P玛斯卡尼，F莱昂尼，G泊罗，P帕加尼，G多纳，P泊滋，C迪纳勒罗，G范图兹，B斯格曼德，L勒尼克弗，P布弗勒，SH金，B泊密尔安特兹，
申请(专利权)人：伊塔尔法马科联合股份公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]
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