本发明专利技术涉及应用B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白治疗自身免疫性疾病领域，更具体地说，涉及优化的TACI-Fc融合蛋白用于制备治疗系统性红斑狼疮药物的应用。本发明专利技术所述的药物对于治疗系统性红斑狼疮安全有效，并且利于降低本类重组蛋白质药物的成本，适用于工业化推广应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及应用B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白治疗自身免疫性疾病领 域，更具体地说，涉及优化的TACI-Fc融合蛋白用于制备治疗系统性红斑狼疮药物的应用。
技术介绍
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种慢性、多系统受累 的自身免疫性疾病，以B淋巴细胞异常激活并异常分化为浆细胞和记忆性效应细胞，产生 大量的自身抗体为特征，严重威胁了人类健康。目前临床上缺乏针对SLE特异性的治疗药 物，对于SLE的常规治疗主要还是糖皮质激素和免疫抑制剂为主，皮质激素是全部治疗方 案的基础，环磷酰胺是目前治疗重症狼疮性肾炎的重要药物，但不良反应较大限制了其临 床使用。虽然SLE的发病机制目前尚不完全清楚，但近年来的研究结果显示，B细胞作为经 典的免疫效应细胞在SLE自身免疫过程中发挥了不可替代的作用。SLE病人的B淋巴细胞 高度活化并产生大量的自身抗体，引起溶血性贫血和肾小球肾炎等临床表现。B淋巴细胞 还产生肿瘤坏死因子、IL-4、IL-10等多种促炎症细胞因子，影响其它效应细胞，产生炎症反 应。SLE易感基因BLK和BANKl可能直接参与B细胞抗原受体(BCR)信号通路的活化、导致 B细胞免疫耐受的丧失，提示BCR信号通路相关的B细胞失耐受是SLE发病的重要环节。B 细胞参与SLE发病机制的分子水平的其他证据还包括FCGR基因的多态性对自身反应性B 细胞激活、记忆B细胞的产生和维持、效应细胞抗体介导的免疫应答的影响；参与调控B细 胞寿命及活化的分子如肿瘤坏死因子家族BLyS、参与凋亡产物和自身抗原加工和处理的相 关分子等均在SLE发病机制中发挥作用。另外，B细胞还可能通过非抗体依赖的机制影响T 细胞激活而参与自身免疫。因此，在SLE发病过程中，B淋巴细胞被认为与SLE的发病机制 有更直接的关联，其治疗新药的研究热点也主要集中在B淋巴细胞。研究表明，BLyS基因敲除小鼠的成熟B淋巴细胞减少，免疫球蛋白降低，而BLyS转 基因小鼠则出现严重B淋巴细胞增生、高滴度抗dsDNA自身抗体、蛋白尿和免疫复合物在肾 脏沉积等狼疮样表现；在两种SLE小鼠模型MRL/lpr和NZB/WF1中，发病时均存在血清BLyS 水平增高，并与肾脏损害相关，阻断BLyS的作用可显著改善狼疮样症状小鼠的生存。在一 些SLE患者的血清和血浆中，BLyS的水平也较正常人显著升高，且生物学活性较正常水平 明显增强。动物实验研究和人体外实验研究结果提示，BLyS过表达是参与SLE发病的重要 机制之一，因此作用于BLyS靶点、清除B淋巴细胞就成为非常有希望的SLE治疗策略。目前，针对BLyS治疗SLE的靶向生物制剂已成研究热点。可能用于SLE治疗的 BLyS拮抗剂包括BLyS单克隆抗体、由BLyS受体与IgG-Fc段构成的融合蛋白、能结合于 BAFF-R但不能启动信号传导的BLyS拟似物以及非激动性BLyS受体抗体等。B 淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulators，BLyS)是 1999 年发现的 TNF 超家族新成员，主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞分泌产生。BLyS通过与其相应受体结合发挥其调控B淋巴细胞成熟、促进免疫球蛋白类别转换、辅助T细胞 活化和参与自身免疫等功能。BLyS由285个氨基酸组成，作为II型跨膜蛋白表达于细胞 表面，剪切后释放的171Λ可溶性片段具有生物活性，以同源三聚体形式参加循环。目前已 知 BLyS 受体有三个BCMA(B cell maturation antigen)、BAFF-R(BAFF receptor, BR3)、 禾口 TACI (transmembrane activater and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor, TACI)。BAFF-R是BLyS的专有受体，而TACI和BCMA除与BLyS结合外，还能与 APRIL结合。BLyS的三种受体在与BLyS结合时发挥的作用不同。BLyS促进小鼠过渡期B 细胞成熟、延长小鼠和人成熟B细胞的寿命以及辅助T细胞活化的作用主要是通过BAFF-R 实现的。TACI受体对小鼠B细胞的活化具有双重效应一方面TACI缺陷的小鼠表现为外周 B细胞增多、抗原合成增加，出现自身免疫甚至致死性淋巴增殖现象，提示TACI为BLyS的抑 制性受体；另一方面TACI又参与T细胞非依赖性抗原(Tl)的免疫应答。BCMA则具有维持 浆母细胞存活和促进成熟B细胞的抗原呈递作用。由于TACI受体对BLyS和APRIL这两者 均有很强的亲和力，因此TACI-Fc融合蛋白较其他两种融合蛋白为优，是首选的药物结构。TACI最早是由美国著名学术机构St. Jude儿童医院科学家Von Bulow和Bram发 现的，但后来的研究发现，TACI细胞外区的自然序列存在蛋白质易于降解的问题，不适合作 为药物生产。此后，有几家公司对TACI原分子做了改进，包括美国著名的生物技术公司基 因泰克(Genentech)、Amgen禾口 ZymoGenetics0 目前,ZymoGenetics公司与瑞士默克雪兰诺 公司合作的TACI融合蛋白Ataci^pt已针对SLE、类风湿性关节炎、淋巴瘤等疾病进行临床 试验，结果表明Ataci^pt具有明确的生物学活性，无明显的副作用。申请人:采用蛋白质前体加工酶人工神经网络计算机软件系统的独特方法找 到了 TACI自然序列降解的原因，进而用基因工程构建了优化的TACI-Fc融合蛋白 (CN200710111162.幻，研究结果表明优化的TACI-Fc融合蛋白具有更好的生物学活性，具 有抑制自身免疫疾病的作用，对SLE、类风湿性关节炎等自身免疫病有潜在的治疗前景。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供优化的TACI-Fc融合蛋白用于制备治疗系统性红斑狼疮药 物的应用。申请人研究了优化的TACI-Fc融合蛋白的具体作用机制并确认其对系统性红斑 狼疮的疗效，本专利技术所提供的治疗系统性红斑狼疮药物具有生物学活性高、用量小、安全有 效的优点。申请人:通过蛋白质前体加工酶人工神经网络分析找到了天然TACI降解的位点， 最大限度的保留TACl氨基末端区的大部分氨基酸残基，使优化的TACI-Fc融合蛋白解决了 TACI降解的难题并具有更好的生物学活性。本专利技术所述的优化的TACI-Fc融合蛋白的TACI部分包括来自TACI胞外区从氨基 酸残基13开始的氨基术端区序列，富半胱氨酸区的全部序列，和柄区的部分序列，融合蛋 白的免疫球蛋白Fc包括铰链区，CH2区和CH3区，TACI序列与Fc序列之间是直接融合或经 连接序列融合。本专利技术所述的优化的TACI-Fc融合蛋白的TACI序列优选TACI的第13至108氨 基酸序列或第13至118氨基酸序列。本专利技术所述的免疫球蛋白Fc序列选自人或动物的免疫球蛋白Fe，是Fc全长或是部分序列，Fc选自IgG,，IgM, IgD, IgA，每种免疫球蛋白类型包括各亚型，如IgGl, IgG2， IgG3，IgG4，优选 IgGl。本专利技术所述的优化的TACI-Fc融合蛋白的TACI序列与免疫球蛋白Fc序列之间可本文档来自技高网...
【技术保护点】
优化的ＴＡＣＩ－Ｆｃ融合蛋白用于制备治疗系统性红斑狼疮的药物的应用，所述融合蛋白的ＴＡＣＩ部分包括来自ＴＡＣＩ胞外区从氨基酸残基１３开始的氨基末端区序列，富半胱氨酸区的全部序列，和柄区的部分序列，融合蛋白的免疫球蛋白Ｆｃ包括铰链区，ＣＨ２区和ＣＨ３区，ＴＡＣＩ序列与Ｆｃ序列之间是直接融合或经连接序列融合。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：房健民，
申请(专利权)人：烟台荣昌生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：37
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。