反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂及制备方法技术

反义脱氧寡核苷酸ＩＳＩＳ２３６６５脂质体制剂，是以ＩＳＩＳ２３６６５作为反义寡核苷酸模型药物，其具体序列为（５′－３′）ｄ（ｃｇａ　　ｔｇｇｃａｃ　　ｇｇｃ　　ｇｃａ　　ｃｔｔ），此制剂在每５ｍｌ注射液中含有：反义脱氧寡核苷酸ＩＳＩＳ２３６６５　　１－５００ｍｇ、注射用磷脂５－２５０ｍｇ、胆固醇０－１００ｍｇ、抗氧剂０．２５－２．５ｍｇ、配体０－２５００ｍｇ、保护剂１０－５００ｍｇ、缓冲溶液调ｐＨ至３．０－９．０。该脂质体注射液与反义寡核苷酸ＩＳＩＳ２３６６５药物相比，对肝癌ＨｅｐＧ２细胞表现出更高的抗肿瘤活性，并且提高了反义药物的稳定性，降低了用药量及药物的毒副作用；该肝主动靶向脂质体注射液，赋予反义脱氧寡核苷酸药物主动肝靶向性；相应的注射用脂质体冻干制剂及主动肝靶向脂质体冻干制剂进一步解决了制剂的稳定性问题，方便了制剂的储存与流通，为反义脱氧寡核苷酸药物的临床应用及产业化生产提供了制剂学基础研究资料。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，确切地说是含反义脱氧寡核苷酸ISIS23665药物的脂质体制剂及制备方法，反义脱氧寡核苷酸ISIS23665药物肝主动靶向脂质体注射液及其冻干制剂。
技术介绍
反义脱氧寡核苷酸药物是基因水平治疗疾病的一种具体应用手段，它是通过人工设计并合成的一段序列已知的单链脱氧核糖核苷酸结构，根据设计序列的不同反义脱氧寡核苷酸药物具有不同的疗效。中国专利CN98111018.5公开的抑制乙肝病毒复制的反义脱氧寡核苷酸就是利用设计序列的不同反义脱氧寡核苷酸药物来制备抑制乙肝病毒复制的药物的。本文采用的反义脱氧寡核苷酸ISIS23665是针对肝癌细胞中高表达的survivin基因设计的一段含18个碱基的序列为(5′-3′)d(cga tgg cac ggc gca ctt)寡聚脱氧核苷酸，它可以抑制并封闭survivin基因的正常表达，从基因水平达到杀死癌细胞的作用。作为基因水平治疗的一种药物反义脱氧寡核苷酸药物具有如下优势1.缩短了新药的研发周期，降低了新药的研发成本。这是由于传统的新药开发是通过合理的药物设计合成一系列的新化合物后，进行结构检测和活性筛选。要找到新的活性物质就本文档来自技高网...

【技术保护点】
反义脱氧寡核苷酸ＩＳＩＳ２３６６５脂质体制剂，以反义脱氧寡核苷酸药物ＩＳＩＳ２３６６５为有效药物成份，其特征在于：在每５ｍｌ注射液中含有：反义脱氧寡核苷酸ＩＳＩＳ２３６６５　　１－５００ｍｇ、注射用磷脂５－２５０ｍｇ、胆固醇０－１００ｍｇ、抗氧剂０．２５－２．５ｍｇ、配体０－２５００ｍｇ、保护剂１０－５００ｍｇ、缓冲溶液调ｐＨ至３．０－９．０。

【技术特征摘要】
1.反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂，以反义脱氧寡核苷酸药物ISIS23665为有效药物成份，其特征在于在每5ml注射液中含有反义脱氧寡核苷酸ISIS23665 1-500mg、注射用磷脂5-250mg、胆固醇0-100mg、抗氧剂0.25-2.5mg、配体0-2500mg、保护剂10-500mg、缓冲溶液调pH至3.0-9.0。2.根据权利要求1所述反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂，其特征在于该制剂为反义脱氧寡核苷酸药物脂质体注射液，反义脱氧寡核苷酸药物肝靶向脂质体注射液，注射用反义脱氧寡核苷酸药物脂质体冻干制剂及注射用反义脱氧寡核苷酸药物肝靶向脂质体冻干制剂。3.根据权利要求1所述反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂，其特征在于所述的注射用磷脂，为注射用卵磷脂、羟基卵磷脂、大豆磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、蛋黄卵磷脂中的一种或一种以上的混合物；抗氧剂，为维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、二叔丁基对甲酚(BHT)、半胱氨酸、蛋氨酸中的一种或一种以上的混合物；保护剂，为海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、山梨醇中的一种或一种以上的混合物；缓冲溶液，为磷酸二氢钠(钾)、磷酸氢二钠(钾)、Tris碱、硼酸、过硫酸铵、盐酸、磷酸、枸橼酸(钠)、氢氧化钠(钾)、冰醋酸中的一种或一种以上的混合物。4.根据权利要求1所述反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂，其特征在于肝主动靶向脂质体注射液中配体为自制，其合成过程为，(1)乳糖酸溶液的制备称取乳糖酸钠1g，加水溶解摇匀，吸取此溶液10ml，放入离子交换管中，开启活塞，以每分钟1-2ml的流速放出，待溶液全部进入树脂后，再加入蒸馏水冲洗、收集洗液，洗液pH约为3-4，(2)乳糖酸内酯的制备将(1)中收集的乳糖酸溶液真空干燥，分别依次加入甲醇，乙醇减压蒸馏，反复几次，得乳糖酸内酯，(3)N-SLBA的制备乳糖酸内酯1.0g，3mmoL，十八胺0.808g，3mmoL，于10ml甲醇中，微热使其溶解，室温下搅拌12小时以上，过滤，用冷甲醇洗，室温下干燥，用甲醇重结晶几次，得到白色粉末状物质。5.一种如权利要求1所述反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂制备方法，以制备5ml为例，其特征在于称取注射用磷脂5-250mg、胆固醇0-250mg、抗氧剂0.25-25mg、配体0-2500mg溶于无水乙醇中，于20-50℃恒温水浴减压旋转蒸除有机溶剂，抽至形成均匀的薄膜。将反义脱氧寡核苷酸ISIS23665 1-500mg、保护剂10-500mg溶于pH3.0-9.0缓冲溶液，水化，分别过0.80、0.40、0.20、0.10和0.05μm滤膜，低温冰箱中冷冻，以10-50℃孵化，反复操作三次，过0.22μm滤膜整粒，分装，充氮绝氧即得；加入甘露醇50-500mg或乳糖50-500mg，融解，冷冻干燥，除去水分，制得注射用冻干制剂，所得反义脱氧寡核苷酸药物脂质体制剂粒径范围为0.05-1μm。6.一种如权利要求1或2所述反义脱氧寡核苷酸ISIS23665脂质体制剂制备方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王思玲，于凤波，张景海，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]