一种竹红菌素脂质体制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种竹红菌素脂质体制剂及其制备方法。本发明专利技术所提供的竹红菌素脂质体制剂，含有如下重量份的组分：竹红菌素１～５份，磷脂４０～２００份，胆固醇２．４～１２份，冻干保护剂５０～１００份。本发明专利技术利用高压均质法制备的竹红菌素脂质体制剂，其特点是不含吐温系列表面活性剂；而且，制剂的药物含量可由０．６％提高到１．２％以上，复溶药物浓度达１ｍｇ／ｍｌ，提高了１００％。本发明专利技术用高压均质法制备替代超声法制备，使质量可控、产量极大提高，能够满足竹红菌素－脂质体药物的工业生产和临床应用双重要求；用急速预冻的方法代替逐步预冻，获得单分散性好、复溶后形貌更稳定的红菌素脂质体固体粉末制剂。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种竹红菌素脂质体制剂及其制备方法。
技术介绍
微血管类疾病，包括鲜红斑痣、视网膜黄斑变性等，临床医学分类属于常见病范畴，发病率均在3 — 5%。，前者90%以上发病于面部，给患者带来极大的精神痛苦； 后者被认为是老年人致盲的首要原因，据统计，仅在美国此类病人就高达百万以上。 目前证明，光动力疗法是治疗微血管类疾病的唯一特效或首选疗法，然而，微血管类 疾病光动力药物目前是此类疾病临床应用的瓶颈问题。多年来，光动力疗法主要以抗肿瘤为目标，因此，光动力药物也主要以抗肿瘤功 能为主要评价，例如为了实体肿瘤的治疗效率，规定肿瘤的光疗窗口在600 — 900nm，此波长范围光的组织穿透深(3 — 10毫米)，利于实体肿瘤的疗效。然而，微 血管类疾病的病灶深度小于1毫米，此时用穿透深度更深的长波长光反而有可能造成 正常组织的伤害！此外，临床治疗技术上，在肿瘤光动力治疗中，给药后到照光的时 间间隔较长，通常数小时到数十小时，以使药物在病灶上富集；而微血管类疾病的耙 体是畸生微血管壁细胞，给药后即时光照治疗。因此可见，微血管类疾病药物制剂要 求药物快速释放，要求药物代谢速度快。因此，针对疾病特点研发个性化光动力药物 是光动力医疗的新战略。目前，世界上唯一批准上市的用于视网膜黄斑变性的光动力 药物苯卟啉衍生物单元酸(BPD—MA)，通用名维替泊芬(Vert印orfin)，其最大 光吸收波长为690nm，其主吸收光的组织有效穿透深度3 — 5毫米(见以下讨论)，目 前市场价格为16000元人民币/10毫克，此外，卟啉类药物的一般特点是在体内代谢 慢，且代谢产物原卟啉仍然有光敏活性，会使光敏副作用持续数天乃至数月。其它一 些正在开发的光动力药物的光动力活性低限制了其应用范围。竹红菌素是从特产于我国云南箭竹上的一种寄生真菌一竹红菌(Hypocrdla bambusae(B.etBr.)Sacc.)中提取的一类天然光敏色素，包括竹红菌甲素(HA)和竹红 菌乙素(HB)。竹红菌素的主吸收光(470nm)的组织有效穿透深度不足1毫米，恰好 与微血管类疾病的病灶深度相符，此外，其光敏活性高、暗毒性低、体内代谢快(24 一48小时)，在光动力疗法治疗微血管病中具有特殊优势。竹红菌素母体分子是脂溶 性有机分子，直接静脉注射会引起自聚集而造成毛细血管栓塞；而完全水溶性的竹红菌素衍生物在体内几乎完全丧失其生物光动力活性(由于低的细胞摄取率)。近年来， 本实验室以改善水溶性和生物相容性为目标，研制了一系列竹红菌素一生物材料的纳 米制剂，包括脂质体制剂、竹红菌素一蛋白、竹红菌素一多糖纳米制剂(专利号 03148147 )、竹红菌素一脂肪乳纳米制剂(专利号200610001677.2 )。生物学实 验证明这些制剂都具有良好的水溶性和光动力活性，且生物相容性好，不引入新的毒 性。客观地说，针对微血管类疾病的光动力治疗，竹红菌素水溶性纳米粒是由蛋白交 联制备，使纳米粒子释放药物速度慢，而光敏剂治疗微血管病需要光敏剂的快速释放 以达到与微血管病灶快速结合以发挥药效；竹红菌素微乳尺度分布均匀(40—60nm)、 生物光动力活性高，目前最大问题则是保存时间不超过6个月，不能满足保存性要求。 前期制备的竹红菌素脂质体及其固体粉末(靳玄烨等， 一种竹红菌素脂质体固体 粉末制剂及其制造方法，专利号ZL03110618.8)具有很高的耙向性和快速药物释放性， 冻干后的脂质体粉剂具有较高的稳定性、足够长的保存期，复溶后具有良好的生物光 动力活性，是目前静脉注射竹红菌素的最理想药物剂型。但在配方中无例外地加入吐 温系列表面活性剂(4.30-6.50%)，目前，国家食品药品管理局对吐温类辅料做了 更严格的明确限制，其注射浓度目前限制在100pg/ml以下，原固体粉末复溶后吐温的 浓度为10mg/ml，超限100倍；最大载药浓度为0.5 mg/ml，载药量偏低；所用的制备 方法为超声法，由于脂质体尺度均一性和脂质体形貌由超声场强决定，批次之间成品 质量不易控制；在专利公布的冷冻干燥流程中使用逐步预冻的方法，产生大冰晶可能 破坏双分子层磷脂膜，影响脂质体固体粉末单分散性和复溶后形貌的稳定性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种不含吐温系列表面活性剂、药物容量大、单分散性好、 复溶后形貌更稳定的竹红菌素脂质体制剂及其制备方法。本专利技术所提供的竹红菌素脂质体制剂，含有如下重量份的组分竹红菌素1~5份， 磷脂 40~200份，胆固醇 2.4~12份，冻干保护剂 50~100份。 其中，磷脂可选自卵磷脂、氢化卵磷脂、氢化大豆磷脂中的一种或几种。 冻干保护剂选自甘油、二甲基亚砜、蔗糖、甘露糖、海藻糖、葡萄糖、聚乙烯吡 咯垸酮和纤维素中的一种或几种。该竹红菌素脂质体制剂的制备方法，包括如下步骤1)将竹红菌素、磷脂、胆固醇和水乳化制备成粒径为1000nm以下的多层脂质体；2) 在高压均质机中，先在5—25MPa下将所得多层脂质体初均，然后，加压至 均质压力下循环均质若干次获得脂质体；3) 加入冻干保护剂、超滤灭菌、分装后急速预冻，然后，再冷冻干燥得到冻干 的竹红菌素脂质体制剂。其中，上述制备过程中，制备原料配比如下竹红菌素1 5份，磷脂40~200 份，胆固醇2.4 12份，水977 4885份，冻干保护剂50 ~ 100份。步骤2)均质的温 度为0'C ~15°C。步骤2)所述均质压力等于或大于50MPa，均质循环次数为2 20 次。步骤2)所述脂质体的粒径为40—200nm。步骤3)所述预冻的温度为-60 ~-80°C 。为了能更好的保存本专利技术制剂，对冻干脂质体粉剂以惰性气体密封保存。高压均质法，是通过高压均质机柱塞的往复运动，使柱塞压縮的物料内形成强大 的高压能，通过调节限流阀座微小间隙，使物料瞬间在湍流、剪切、碰撞、空穴等复 合力的作用下达到均质目的。本专利技术利用高压均质法制备的竹红菌素脂质体制剂，其 特点是不含吐温系列表面活性剂，更符合现代医药的要求；而且，制剂的药物含量可 由0.6%提高到1.2%以上，复溶药物浓度达lmg/ml，提高了100%。本专利技术用高压均 质法制备替代超声法制备，使质量可控、产量极大提高，能够满足竹红菌素一脂质体 药物的工业生产和临床应用双重要求；用急速预冻的方法代替逐步预冻，获得单分散 性好、复溶后形貌更稳定的红菌素脂质体固体粉末制剂。附图说明图1为实施例1乳化后竹红菌甲素多层脂质体的粒径分布图2为实施例1 (180MPa)和实施例4 (lOOMPa)循环次数对脂质体最大粒径的影响；图3为实施例1中180MPa循环5次竹红菌甲素冻干前脂质体和复溶后脂质体的 粒径分布图4为实施例4中lOOMPa循环6次竹红菌乙素冻干前脂质体和复溶后脂质体的 粒径分布图5为实施例1中180MPa循环5次竹红菌甲素冻干前脂质体稀释至0. 05mg/ml 的透射电镜图。图6为光照实施例1和4与竹红菌乙素的9,10-DPA随时间变化的漂白图。 具体实施例方式本专利技术主要是利用高压均质方法制备竹红菌素脂质体制剂1) 首先，将竹红菌素、优质高纯磷脂、胆固醇、水按一定比例乳化制备成粒径为1000nm以下的多层脂质体。2) 然后，将所得多层脂质体在高压均质机均质。为防止多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种竹红菌素脂质体制剂，含有如下重量份的组分：　竹红菌素１～５份，　磷脂４０～２００份，　胆固醇２．４～１２份，　冻干保护剂５０～１００份。

【技术特征摘要】
1.一种竹红菌素脂质体制剂，含有如下重量份的组分竹红菌素1～5份，磷脂40～200份，胆固醇2. 4～12份， 冻干保护剂50～100份。2、 根据权利要求l所述的竹红菌素脂质体制剂，其特征在于所述磷脂选自卵 磷脂、氢化卵磷脂、氢化大豆磷脂中的一种或几种。3、 根据权利要求1或2所述的竹红菌素脂质体粉末，其特征在于所述冻干保 护剂选自甘油、二甲基亚砜、蔗糖、甘露糖、海藻糖、葡萄糖、聚乙烯吡咯垸酮和纤 维素中的一种或几种。4、 权利要求1所述竹红菌素脂质体制剂的制备方法，包括如下步骤1) 将竹红菌素、磷脂、胆固醇和水乳化制备成粒径为1000nm以下的多层脂质体；2) 在高压均质机中，先在5—25MPa下将所得多层脂质体初均，然后，加压至 均质压力下循环均质若干次...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵井泉，张杨，谢杰，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]