一种突变蛇毒纤溶酶工程菌株，其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种重组蝮蛇蛇毒蛋白的制备方法。利用人工合成的美国铜斑蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎ　ｃｏｎｔｏｒｔｒｉｘ）突变蛇毒纤溶酶Ａｌｆｉｍｅｐｒａｓｅ基因，其核苷酸序列如ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ．２所示。将其连接到酵母表达质粒ｐＰＩＣ９Ｋ中构建高效表达载体ｐＰＩＣ９Ｋ－Ｈｉｓ－Ａｌｆ，导入毕赤酵母株ＧＳ１１５，命名为ＦＹ－Ａｌｆ。甲醇诱导表达，表达的重组蛋白经纯化后，用平板溶圈法验证其活性，结果表明含ｐＰＩＣ９Ｋ－Ｈｉｓ－Ａｌｆ质粒的酵母菌株ＧＳ１１５表达的重组蛋白Ａｌｆｉｍｅｐｒａｓｅ具有较高纤溶活性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种酵母表达载体，其出发载体为ｐＰＩＣ９Ｋ，其特征在于，含有突变蛇毒纤溶酶基因，所述的突变蛇毒纤溶酶基因的核苷酸序列如ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ．２所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄飞，盛太奎，鞠岚岚，余宏燕，
申请(专利权)人：蚌埠丰原涂山制药有限公司，
类型：发明
国别省市：34[]