一种ＤＡＢ２ＩＰ基因的实时荧光ＰＣＲ检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种ＤＡＢ２ＩＰ基因的实时荧光ＰＣＲ检测试剂盒，主要包括特异性引物和荧光探针、ＰＣＲ缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和ＤＮＡ聚合酶，所述特异性引物和荧光探针序列如下：上游引物：５′－ＴＧＴＧＡＡＧＴＧＧＡＣＣＣＡＡＧＣＡＡ－３′，下游引物：５′－ＡＣＧＣＡＧＴＡＧＧＡＧＴＴＧＡＴＧＡＴＴＴＴＧ－３′，荧光探针：５′－ＦＡＭ－ＣＣＣＧＡＧＣＡＣＣＡＧＧＧＣＡＡＣＣＴＣ－ＴＡＭＲＡ－３′，其中ＦＡＭ为荧光报告基团，ＴＡＭＲＡ为荧光淬灭基团。本发明专利技术的有益效果主要体现在：采用本发明专利技术方法，ＤＡＢ２ＩＰ基因的检测灵敏度高，特异性好，降低了常规ＰＣＲ扩增的假阳性率；可实现对ＤＡＢ２ＩＰ基因快速、准确、特异检测和分析，也可加入标准品进行定量检测，同时还可以加入管家基因（如β－ａｃｔｉｎ基因等）进行相对定量检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种DAB2IP基因的实时荧光PCR检测试剂盒及其检测方法。
技术介绍
自适应及自我加速生长是恶性肿瘤发生发展的必经之路，作为重要的表达网络调 节者，DAB2IP归属于RAS-GTP酶激活蛋白家族，具有抑制肿瘤细胞增殖的活性，能通过多种 复杂的通路抑制肿瘤生长及转移。DAB2IP可减弱H-RAS，R-RAS和TC21等癌基因的表达， 并与TNF-a介导的肿瘤细胞凋亡相关。作为EZH2的靶基因，DAB2IP可能参与EZH2参与的 肿瘤表观遗传学沉默调节。此外，DAB2IP可介导PI3K-Akt通路失活，该通路是重要的肿瘤 细胞信号传导途径，调节肿瘤的增殖，存活和转移。最新研究发现，04821 还可通过顺-!^8 途径阻断肿瘤转移，并在关键的上皮-间质转化(EMT)过程中具有潜在的调节能力。因此， DAB2IP的表达高低与肿瘤生长，转移以及侵袭等多种重要特性密切相关，精确检测DAB2IP 可明晰这一独特的抑癌基因在人体的表达，指导个体化抗肿瘤研究，治疗及预后判断。目前DAB2IP研究方兴未艾，常规测定DAB2IP表达的方法仍然以免疫组化及半定 量PCR为主，前者较难在外周本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ＤＡＢ２ＩＰ基因的实时荧光ＰＣＲ检测试剂盒，主要包括特异性引物和荧光探针、ＰＣＲ缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物和ＤＮＡ聚合酶，其特征在于所述特异性引物和荧光探针序列如下：上游引物：５′－ＴＧＴＧＡＡＧＴＧＧＡＣＣＣＡＡＧＣＡＡ－３′下游引物：５′－ＡＣＧＣＡＧＴＡＧＧＡＧＴＴＧＡＴＧＡＴＴＴＴＧ－３′荧光探针：５′－ＦＡＭ－ＣＣＣＧＡＧＣＡＣＣＡＧＧＧＣＡＡＣＣＴＣ－ＴＡＭＲＡ－３′其中ＦＡＭ为荧光报告基团，ＴＡＭＲＡ为荧光淬灭基团。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：方维佳，林才照，徐农，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]