用于实体瘤治疗的EphA3抗体制造技术

本发明专利技术提供用于实体瘤治疗的包含抗ＥｐｈＡ３抗体的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于实体瘤治疗的EphA3抗体相关申请的交叉引用本申请要求享有2007年3月8日提交的美国临时申请号60/893，848的权益，该申请以参考的方式并入本文。专利技术背景Eph受体酪氨酸激酶(Ephs)属于一大类受体酪氨酸激酶(RTKs)，即在酪氨酸残基上磷酸化蛋白的激酶。Ephs和它们的膜结合ephrin配体(ephrins)控制细胞定位和组织结构(Poliakov, et al. , Dev Cell 7 :465-80, 2004)。与其他受体酪氨酸激酶相反，Eph受体活化不仅需要配体结合和二聚化，而且需要预先形成的配体寡聚体的参与。因此，Eph受体的酪氨酸磷酸化需要ephrin配体以它们的聚集或膜粘附形式存在(Davis et al. ,Science266:816-819,1994)。功能和生化Eph应答在更高的配体寡聚状态时发生(Stein et al.，Genes Dev 12 :667-678,1998)。在其他模式功能中，各种Ephs和ephrins已被证明在血管发育中起作用。EphB4和ephrin_B2的敲除导致缺乏将毛细血管床重建成血管的能力(Poliakov, et al.,上文)及胚胎致死性。在新形成的成人微血管中还观察到一些Eph受体和ephrins的持续表达(Brantley-Sieders, et al. , Curr Pharm Des 10 :3431-42, 2004 ；Adams, J Anat 202 105-12,2003)。在成年人中还观察到一些ephrins及其受体不受调节(de_regulated)的再现导致肿瘤侵袭、转移和新生血管发生(Nakamoto, et al.，MicroscRes Tech 59 :58-67, 2002 ；Brantley-Sieders, et al.,上文)。此外，已经发现一些Eph家族成员在多种人类肿瘤的肿瘤细胞上过表达(Brantley-Sieders, D. et al.,上文)；Marme, Ann Hematol 81 Suppl2 S66,2002 ；Booth,et al.，Nat Med 8 :1360-1,2002)。显性失活的可溶性EphA2或A3蛋白在体外显示对ephrin诱导的内皮细胞功能的作用，在体内显示对肿瘤血管发生和进展的作用(Brantley,et al Oncogene 21 :7011-26,2002 ；Cheng,et al Neoplasia5 :445-56,2003 ；Dobrzanski,et al Cancer Res 64 :910-9,2004)。但是，因为ephrin-A家族成员对Eph A受体不具备特异性,这些研究没有指示EphA3自身是否在肿瘤或者正常组织的血管内皮中起作用。总之，在本专利技术之前，一直没有证据显示EphA3在肿瘤血管中存在的内皮细胞上表达。事实上，在EphA3敲除小鼠中没有报道过血管异常(参见，例如，Vaidya et al. Mol.Cell. Biol. 23 :8092-8098，2003)。因此，尽管某些Eph受体和印hrins已经被提及在血管发生及肿瘤形成和进展中发挥作用，但一直没有靶向于肿瘤内皮细胞上EphA3表达的特异性疗法。因此本专利技术提供了新的治疗靶标及肿瘤治疗方法。专利技术概述本专利技术基于EphA3在实体瘤的血管上表达这一发现。因此，一方面，本专利技术提供一种抑制不在肿瘤细胞上表达EphA3的实体瘤的生长的方法，该方法包括施用抗EphA3抗体。在一些实施方案中，抗EphA3抗体在表达EphA3的细胞(尤其是肿瘤血管的内皮细胞)表面，通过例如Fe受体结合来聚集EphA3。在一些实施方案中，EphA3抗体活化EphA3，即使EphA3结合了天然配体。本专利技术还提供一种抑制肿瘤生长的方法，包括给患有实体瘤的患者施用a)例如通过Fe受体结合聚集EphA3的抗EphA3抗体，和b)癌症治疗剂。在一些实施方案中，癌症治疗剂破坏微管蛋白组装。所述治疗剂可以与抗EphA3抗体同时施用，或在用抗EphA3抗体治疗后施用。在一些实施方案中，所述治疗剂与抗EphA3抗体共价连接。在其他实施方案中，所述治疗剂是不与EphA3抗体连接的单独的分子。在一些实施方案中，抗EphA3抗体与单克隆抗体IIIA4(mAb IIIA4)竞争结合EphA3并聚集EphA3。在一些实施方案中，所述抗体活化EphA3。另一方面，本专利技术提供一种包括具有活性人类同种型的抗EphA3抗体的组合物，其中所述抗体例如通过Fe受体结合聚集EphA3。在一个实施方案中,抗EphA3抗体与mAbIIIA4竞争结合EphA3。在一些实施方案中，所述抗体与mAb IIIA4竞争结合EphA3，并且不阻断ephrin (例如ephrin-A5)与EphA3的结合。在另一个实施方案中，所述抗体结合EphA3并聚集EphA3，但不与mAb IIIA4竞争结合EphA3。在一些实施方案中，所述抗体活化EphA3。本专利技术的组合物还可以包括抑制肿瘤生长的另一种药剂，例如抑制微管蛋白组装的药剂。用于本专利技术方法和/或组合物的抗EphA3抗体可以是重组或嵌合抗体。在另一个实施方案中，所述抗体是人类抗体，例如，humaneered抗体或人源化抗体。在再一个实施方案中，所述抗体是多克隆抗体。可选择地，所述抗体可以是单克隆抗体。在另外一个实施方案中，所述抗体是包含抗体片段(即Fab，Fab'或Fv)的多价抗体。在另一个实施方案中，所述抗体具有结合免疫效应细胞上的Fe受体的活性人类同种型，例如，IgGl、IgG3、IgM、IgA或IgE。因此，在一些实施方案中，所述抗体包含人类重链恒定区，例如，IgGl或IgG3 Y区。在一些实施方案中，所述抗体可以是化学地交联的IgG。在一些实施方案中，用于本专利技术方法和/或组合物的抗体包括mAbIIIA4的Vh和/区。在其他实施方案中，所述抗体包含mAb IIIA4的VH&'区⑶R1、⑶R2和⑶R3。在其他实施方案中，所述抗体包括mAb IIIA4的乂11区⑶R3和'区⑶R3。在一些实施方案中，所述抗体包含表I的重链⑶R1XDR2和⑶R3及表I的轻链⑶R1XDR2和⑶R3。在其他实施方案中，所述抗体包括表I的重链CDR3和表I的轻链CDR3。本专利技术还提供通过施用单体的、非积聚的抗体制品抑制实体瘤(不管肿瘤细胞是否表达EpA3)生长的方法，其中所述抗体可聚集EphA3。这种抗体，例如，具有活性同种型，例如，具有人类IgGl或IgG3 Y区。在一些实施方案中，所述抗体活化EphA3。所述抗体可以是重组或嵌合抗体。在另一个实施方案中，所述抗体是人类抗体，例如,humaneered抗体或人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体是多价形式的Fab、Fab'或Fv,例如tri_Fab。在一些实施方案中，用于本专利技术方法和/或组合物的抗体包含mAb IIIA4的VH和VL区。在其他实施方案中，所述抗体包含mAb IIIA4的Vh和/区⑶R1XDR2和⑶R3 ;或表I的重链⑶R1、⑶R2和⑶R3及表I的轻链⑶R1、⑶R2和⑶R3。在其他实施方案中，所述抗体包含mAb IIIA4的Vh区⑶R3和/本文档来自技高网...

【技术保护点】
抑制肿瘤细胞上不表达ＥｐｈＡ３的实体瘤的生长的方法，所述方法包括给个体施用聚集ＥｐｈＡ３的抗ＥｐｈＡ３抗体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丁莱克曼，安德鲁马克斯科特，克里斯托弗R贝炳东，杰弗里T亚兰东，
申请(专利权)人：卡罗拜奥斯制药公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]