因子Ⅶ多肽类的含水液体药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及针对化学和／或物理降解进行了稳定化的含有因子Ⅶ多肽类的含水液体药物组合物，并涉及这类组合物的制备和使用方法以及含有这类组合物的小瓶和这类组合物在治疗因子Ⅶ－反应性综合征中的应用。主要的实施方案由含水液体药物组合物代表，其中包含：至少０．０１ｍｇ／ｍＬ的因子Ⅶ多肽（ｉ）；适合于将ｐＨ保持在约４．０－约９．０的缓冲剂（ｉｉ）；和至少一种含有－Ｃ（＝Ｎ－Ｚ↑［１］－Ｒ↑［１］）－ＮＨ－Ｚ↑［２］－Ｒ↑［２］基元的稳定剂（ｉｉｉ），例如苄脒化合物和胍化合物，诸如精氨酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】因子VII多肽类的含水液体药物组合物专利
本专利技术涉及含有因子VII多肽类的含水液体药物组合物和这类组合物的制备和使用方法，以及含有这类组合物的容器和这类组合物在治疗因子VII-反应性综合征中的应用。更具体地说，本专利技术涉及针对化学和/或物理降解进行了稳定化的液体组合物。专利技术背景已经鉴定了涉及凝血过程的各种因子，包括因子VII(FVII)，一种血浆糖蛋白。通过在损伤血管壁后暴露于血液循环的组织因子(TF)与以相当于总FVII蛋白质质量约1％的量存在于循环中的FVIIa之间形成复合物而启动凝血。FVII主要作为单链酶原存在于血浆中，它可以被FXa裂解成双链活化形式FVIIa。已经将重组的活化因子VIIa(rFVIIa)开发为促止血剂(pro-haemostatic agent)。给予rFVIIa在存在出血的血友病受试者中提供了快速和高度有效的促止血反应，该血友病受试者因抗体形成而不能用其它凝固因子产品治疗。还可以用FVIIa成功地治疗因子VII缺乏的受试者或存在正常凝固系统、但发生过量出血的受试者中的出血。需要拥有适合于储存和递送的因子VIIa的给药剂型。理想的情况是，将药物产品作为液体储存和给药。或者，将药物产品冻干，即冷冻干燥，然后在患者使用前通过添加合适的稀释剂再溶解。理想的情况是，药物产品足够稳定，能够长期储存，即6个月以上。以液体形式维持药物成品或将其冻干的决定通常基于的是蛋白质药物在那些剂型中的稳定性。蛋白质的稳定性特别可以受到诸如离子强度、pH、温度、重复冷冻/融化循环和接触剪切力这类因素的影响。举几个例子来说，由于包括变性和聚集(可溶性和不溶性聚集物形成)-->在内的物理不稳定性和包括例如水解、脱酰氨化和氧化在内的化学不稳定性，可以导致活性蛋白质损耗。蛋白质药物稳定性的一般综述参见例如Manning等，《药物研究》(Pharmaceutical Research)6：903-918(1989)。尽管已经广泛认识到蛋白质可能存在不稳定性，但是无法预测特定蛋白质的特定不稳定性问题。任意这些不稳定性均可以导致形成具有降低的活性、增加的毒性和/或增加的免疫原性的蛋白质副产物或衍生物。实际上，蛋白质沉淀可以导致血栓形成、剂型和量的不均匀性以及注射器阻塞。此外，翻译后修饰，诸如N-末端某些谷氨酸残基的γ羧化和碳水化合物侧链的添加提供了在储存时易于修饰的可能位点。此外，因子VIIa还有一特别之处，由于它是一种丝氨酸蛋白酶，可能会由于自我催化而发生片段化(酶促降解)。因此，蛋白质的任意组合物的安全性和功效与其稳定性直接相关。维持液体形式的稳定性一般不同于维持冻干形式的稳定性，这是因分子运动的可能性高度增加、由此分子相互作用的可能性增加所致。维持浓缩形式的稳定性也不同于上述情况，因为在蛋白质浓度增加时有聚集物形成倾向。当开发液体组合物时，要考虑许多因素。短期(即6个月以下)的液体稳定性一般取决于避免宏观的结构改变，诸如变性和聚集。这些过程被描述在许多蛋白质文献中，并且有许多稳定剂的实例存在。众所周知，有效地使一种蛋白质稳定的试剂可能会使另一种蛋白质不稳定。一旦该蛋白质针对宏观结构改变实现了稳定化，那么研发长期稳定性(例如6个月以上)的液体组合物就取决于进一步使该蛋白质稳定化而免于发生该蛋白质所特有的降解类型。更具体类型的降解可以包括：例如二硫键混乱、某些残基氧化、脱酰氨基化、环化。尽管并不是总能够准确地确定各降解种类，但已研发出了试验方法，用于监测微小的改变，以便监测具体赋形剂独特地使目的蛋白质稳定化的能力。理想的是组合物的pH在注射/输注时处于生理上合适的范围内，否则就可能使患者产生疼痛和不适。-->有关蛋白质组合物的一般性综述参见例如：Cleland等：″稳定蛋白质组合物的开发：蛋白质聚集、脱酰氨基化和氧化上的密切关注″(The development of stable protein compositions：Acloser lookat protein aggregation，deamidation和oxidation)-《治疗药物载体系统的关键综述》(Critical Reviews in Therapeutic DrugCarrier Systems)1993，10(4)：307-377；和Wang等″蛋白质和肽类的非肠道组合物：稳定性和稳定剂″(Parenteral compositions ofproteins and peptides：Stability and stabilizers)-《非肠道科学和技术杂志》(Journal of Parenteral Science and Technology)1988(增刊)，42(2S)。因子VIIa通过几种降解途径，尤其是聚集(二聚化)、氧化和自溶裂解(肽主链剪切或“重链降解”)。此外，可能发生沉淀。可以通过从蛋白质中除去水而显著减缓许多这些反应。然而，研发因子VIIa的含水组合物具有消除再溶解误差的优点，由此可增加给药精确性，简化产品的临床应用，从而增加患者的顺应性。理想的情况是，因子VIIa的组合物应在广泛的蛋白质浓度范围内稳定6个月以上。这样就可能使给药方法比较灵活。一般来说，更高浓度的剂型允许给予较低的体积，这从患者观点来看是非常理想的。液体组合物在给药和使用的便利性方面可以具有许多超过冻干产品的优点。目前，仅有的可商购型重组制备型FVII多肽组合物为冷冻干燥的因子FVIIa产品，它在使用前再溶解；它含有相对低浓度的因子VIIa，例如约0.6mg/mL。一个NovoSeven小瓶(1.2mg)(Novo Nordisk A/S，Denmark)含有1.2mg重组人因子VIIa、5.84mg NaCl、2.94mg CaCl2，2 H2O、2.64mg甘氨酰甘氨酸(GlyGly)、0.14mg聚山梨酸酯80和60.0mg甘露糖醇；用2.0mL注射用水(WFI)将其再溶解至pH5.5。当再溶解时，该蛋白质溶液可稳定使用24小时。因此，目前尚无商购的随时可用的液体或浓缩因子VII产品。因此，本专利技术的目的在于提供含水液体因子VII多肽药物组合物，它提供了可接受的对化学和/或物理降解产物，诸如酶促降解或自我催-->化产物的控制。专利技术概述本专利技术者已经发现，因子VII或其类似物(“因子VII多肽类”)在与包含-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基元的至少一种稳定剂(iii)一起配制成液体含水药物组合物时，会表现出改善的稳定性，由此允许在实际使用前长期储存。因此，本专利技术的一个方面涉及含水液体药物组合物，包含：至少0.01mg/mL的因子VII多肽(i)；适合于将pH保持在约4.0-约9.0范围内的缓冲剂(ii)；和至少一种含有-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基元的稳定剂(iii)，其中Z1和Z2独立地选自-O-、-S-、-NRH-和单键组成的组，其中RH选自氢、C1-4-烷基、芳基和芳基甲基组成的组，并且R1和R2独立地选自氢、可选取代的C1-6-烷基、可选取代的C2-6烯基、可选取代的芳基、可选取代的杂环基组成的组；或Z2和R2如上所述，并且-C＝N-Z1-R1形成杂环的组成部分；或Z1和R1如本文档来自技高网...

【技术保护点】
含水液体药物组合物，其中包含：　　　　至少０．０１ｍｇ／ｍＬ的因子Ⅶ多肽（ｉ）；　　　　适合于将ｐＨ保持在约４．０－约９．０范围内的缓冲剂（ｉｉ）；和　　　　至少一种含有－Ｃ（＝Ｎ－Ｚ↑［１］－Ｒ↑［１］）－ＮＨ－Ｚ↑［２］－Ｒ↑［２］基元的稳定剂（ｉｉｉ），其中　　　　Ｚ↑［１］和Ｚ↑［２］独立地选自－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ↑［Ｈ］－和单键组成的组，其中Ｒ↑［Ｈ］选自氢、Ｃ↓［１－４］－烷基、芳基和芳基甲基组成的组，并且Ｒ↑［１］和Ｒ↑［２］独立地选自氢、可选取代的Ｃ↓［１－６］－烷基、可选取代的Ｃ↓［２－６］－烯基、可选取代的芳基、可选取代的杂环基组成的组；或　　　　Ｚ↑［２］和Ｒ↑［２］如上所述，并且－Ｃ＝Ｎ－Ｚ↑［１］－Ｒ↑［１］形成杂环的组成部分；或　　　　Ｚ↑［１］和Ｒ↑［１］如上所述，并且－Ｃ－ＮＨ－Ｚ↑［２］－Ｒ↑［２］形成杂环的组成部分；或　　　　－Ｃ（＝Ｎ－Ｚ↑［１］－Ｒ↑［１］）－ＮＨ－Ｚ↑［２］－Ｒ↑［２］形成杂环，其中－Ｚ↑［１］－Ｒ↑［１］－Ｒ↑［２］－Ｚ↑［２］－为二价基。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】DK 2003-8-14 PA 2003 01161;US 2003-8-20 60/496,4431.含水液体药物组合物，其中包含：至少0.01mg/mL的因子VII多肽(i)；适合于将pH保持在约4.0-约9.0范围内的缓冲剂(ii)；和至少一种含有-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基元的稳定剂(iii)，其中Z1和Z2独立地选自-O-、-S-、-NRH-和单键组成的组，其中RH选自氢、C1-4-烷基、芳基和芳基甲基组成的组，并且R1和R2独立地选自氢、可选取代的C1-6-烷基、可选取代的C2-6-烯基、可选取代的芳基、可选取代的杂环基组成的组；或Z2和R2如上所述，并且-C＝N-Z1-R1形成杂环的组成部分；或Z1和R1如上所述，并且-C-NH-Z2-R2形成杂环的组成部分；或-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2形成杂环，其中-Z1-R1-R2-Z2-为二价基。2.权利要求1所述的组合物，其中R1和R2中至少一个为氢。3.权利要求1或2所述的组合物，其中Z1和Z2中至少一个为单键。4.权利要求1所述的组合物，其中R1和R2均为氢且Z1和Z2均为单键。5.权利要求1-4中任意项所述的组合物，其中稳定剂(iii)为选自下列化合物组成的组中的至少一种：含有-C-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基元的脒化合物和含有＞N-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基元的胍类化合物。6.权利要求5所述的组合物，其中稳定剂(iii)为选自由含有基元-C6H4-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2的苄脒类组成之组中的至少一种脒化合物，其中C6H4表示可选取代的苯环。-->7.权利要求6所述的组合物，其中苄脒类含有基元＞N-C6H4-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2，其中C6H4表示可选取代的苯环。8.权利要求5所述的组合物，其中稳定剂(iii)为选自由含有-CH2-NH-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基元的胍类化合物组成之组中的至少一种胍化合物。9.权利要求8所述的组合物，其中所述胍化合物选自由精氨酸、精氨酸衍生物和含有至少一个精氨酸残基的2-5个氨基酸残基的肽组成的组。10.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中稳定剂具有通式Y-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2，其中Y为有机基团。11.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中稳定剂的分子量最高为1000Da。12.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中稳定剂(iii)的浓度至少为1μM。13.权利要求12所述的组合物，其中稳定剂(iii)为苄脒，并且所述试剂的浓度至少为1mM，诸如至少2mM。14.权利要求12所述的组合物，其中稳定剂(iii)为对-氨基-苄脒且所述试剂的浓度至少为0.001mM。15.权利要求12所述的组合物，其中稳定剂(iii)为S-2-[3-(4-氨甲基亚氨基苯基)-脲基]-N-[1-(3-甲氧基苯基)-乙基]-乙酰胺且所述试-->剂的浓度至少为0.001mM。16.权利要求12所述的组合物，其中稳定剂(iii)为S-2-[3-(4-氨甲基亚氨基苯基)-脲基]-N-(1-苯基乙基)-乙酰胺且所述试剂的浓度至少为0.001mM。17.权利要求12所述的组合物，其中稳定剂(iii)为N-(3-溴苄基)-2-[3-(4-氨甲基亚氨基苯基)-脲基]-乙酰胺且所述试剂的浓度至少为0.001mM。18.权利要求12所述的组合物，其中稳定剂(iii)为精氨酸且所述试剂的浓度至少为10mM，诸如至少为50mM。19.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中因子VII多肽为人因子VIIa。20.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中因子VII多肽为因子VII序列变体。21.权利要求20所述的组合物，其中当在如本文所述的″体外蛋白水解试验″(试验2)中测试时，因子VII多肽的活性与天然人因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之比至少为1.25。22.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中因子VII多肽的存在浓度为0.01-20mg/mL。23.上述权利要求中任意项所述的组合物，它具有的pH值在约4.0-约8.0的范围内。-->24.上述权利要求中任意项所述的组合物，其中缓冲剂(ii)包含至少一种选自下述组成之组中的成分：MES、PIPES、ACES、BES、TES、HEPES、TRIS、组氨酸、咪唑、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸、甘氨酰胺、磷酸、乙酸、乳酸、戊二酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、马来酸和琥珀酸的酸和盐。25.权利要求2 2所述的组合物，其中缓冲剂(ii...

【专利技术属性】
技术研发人员：MB延森，AK彼得森，AN鲍勒，
申请(专利权)人：诺和诺德医疗保健公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]