一种霍乱弧菌分型及毒力基因检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种霍乱弧菌分型及毒力基因检测试剂盒及其检测方法。本发明专利技术试剂盒包含ＤＮＡ提取液；ＰＣＲ反应液：由ＰＣＲ反应缓冲液、四对霍乱弧菌特异性的正、反向引物、四条霍乱弧菌特异性的探针组成，引物和探针分别根据溶血素基因、Ｏ１３９型霍乱弧菌Ｏ抗原基因、Ｏ１型霍乱弧菌Ｏ抗原基因和霍乱毒素（ＣＴＸ）毒力基因的核酸序列的特异性保守区进行设计；Ｔａｑ酶系；阳性质控品；阴性质控品。本发明专利技术结果可靠稳定，操作简单，快速，能够实现对霍乱弧菌分型及其是否具备毒力基因的快速判定，利于霍乱弧菌引起的公共卫生事件的溯源和检测工作，同时也利于霍乱弧菌的常规监测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种霍乱弧菌分型及毒力基因检测试剂盒，其特征在于：包括下列组成：　　（１）ＤＮＡ提取液；　　（２）ＰＣＲ反应液：由ＰＣＲ反应缓冲液、四对霍乱弧菌特异性的正、反向引物、四条霍乱弧菌特异性的荧光探针组成，引物和探针分别根据溶血素基因、Ｏ１３９型霍乱弧菌Ｏ抗原基因、Ｏ１型霍乱弧菌Ｏ抗原基因和霍乱毒素（ＣＴＸ）毒力基因的核酸序列的特异性保守区进行设计；荧光探针由荧光报告基团与荧光淬灭基团双色标记；　　（３）Ｔａｑ酶系：主要成份热为启动Ｔａｑ酶；　　（４）阳性质控品：为克隆构建并经测序确认的Ｏ１３９型霍乱弧菌Ｏ抗原基因、Ｏ１型霍乱弧菌Ｏ抗原基因、溶血素基因和ＣＴＸ毒力基因四个基因ＰＣＲ扩增产物拼接的ＤＮＡ片段；　　（５）阴性质控品：为生理盐水或纯水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：田桢干，方筠，韩晓辉，陆晔，张继伦，张宏，钱宇，何宇平，何琼，董瑞华，高秀洁，陈华云，
申请(专利权)人：中山大学达安基因股份有限公司，中华人民共和国上海出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]