一种应用悬浮芯片技术检测致病性志贺氏菌方法技术

本发明专利技术涉及一种用于致病性志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从致病性志贺氏菌筛选的特异性基因侵袭相关位点（ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｌｏｃｕｓ，Ｉａｌ）基因中的一段ＤＮＡ序列。利用设计的引物将待检样品基因组ＤＮＡ扩增并标记后，利用上述悬浮芯片进行杂交，根据杂交荧光强度，可判断待检样品中是否含有致病性志贺氏菌。悬浮芯片检测灵敏度高，可达到ｆｇ级基因组ＤＮＡ水平，可满足临床样本和环境样本检测需要，并具特异性高、操作简单、成本低等特点，易于推广。并采用ＵＮＧ－Ｔａｑ酶ＰＣＲ反应体系，大大降低了ＰＣＲ假阳性结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属分子生物学检测领域，具体的是一种应用悬浮芯片技术对致病性 志贺氏菌进行检测。技术背景悬浮芯片技术是将基因芯片技术与流式细胞仪技术结合产生的一种新技 术，是一种多重数据获取和分析平台，全名为"多功能多指标同步分析体系"(Flexible Multiple Analyte Profiling, xMap)， 也称为Multi-Analyte Suspension Array,有机整合了荧光编码微球、激光技术、微流体技术、快速信号处理和 数据分析系统,即保证了信号质量,又提供高通量的新一代分子检测技术平台。 悬浮芯片与传统的基因芯片最大不同之处在于，传统的基因芯片点样在玻片或 尼龙膜上，依靠坐标定位进行寻址，而悬浮芯片将检测探针共价交联到不同的 色标微球上，根据色标微球上所带的荧光素进行区分。悬浮芯片系统主要由三部分组成1、微球直径5.6iim左右，由聚苯乙 烯构成的，表面带有约108个羧基位点，可与寡核苷酸探针和蛋白以肽键耦联； 2、荧光素微球中标记了红色和橙色荧光素，每种分成10个浓度梯度，将微 球分成可被识别的100种微球，当微球被635nm激光激发后，能发射658本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于致病性志贺氏菌检测的悬浮芯片，包括诊断微球和固定在该诊断微球上的寡聚核苷酸探针，其特征是该寡聚核苷酸探针是致病性志贺氏菌侵袭相关位点基因（ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｌｏｃｕｓ，Ｉａｌ）上的一段序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王景林，赵金银，高姗，刘艳华，康琳，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]