一种应用悬浮芯片技术检测志贺氏菌方法技术

本发明专利技术涉及一种用于志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从志贺氏菌筛选的特异性的基因侵袭性质粒抗原Ｈ中的一段ＤＮＡ序列。利用设计的引物将待检样品基因组ＤＮＡ扩增并标记后，利用上述悬浮芯片进行杂交，根据杂交荧光强度，可判断待检样品中是否含有志贺氏菌。悬浮芯片检测灵敏度高，可达到１．１８ｆｇ基因组ＤＮＡ（１ｆｇ相当于２个细菌数）水平，完全可满足临床样本和环境样本检测需要，并具特异性高、操作简单、成本低等特点，易于推广。并采用ＵＮＧ－Ｔａｑ酶ＰＣＲ反应体系，大大降低了ＰＣＲ假阳性结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属分子生物学检测领域，具体的是一种应用悬浮芯片技术对志贺氏 菌进行检测。
技术介绍
人类对志贺氏菌高度敏感，只需少于十个菌即可引起人的感染，因此其传 染性强，危害性大。志贺氏菌可通过水、食物传播，引起人类腹泻及痢疾等。据国内相关资料显示，志贺氏菌在我国感染性腹泻病原菌中居首位；美国国家 申报疾病监控系统及公共卫生试验信息系统数据显示，每年因志贺氏菌引起的 病例高达448,240例，死亡70例；WHO年度报告指出，在亚非拉各国细菌性腹 泻病例多达1.5-2.5亿人，死亡65万。国家质量监督检验检疫总局2002年第25 号、26号令中明确规定志贺氏菌为食品中必检项目。对志贺氏菌的检测主要包括传统的平板培养、免疫方法及分子生物学技术。国标及行标多采用传统的平板培养或酶联反应(ELISA)的方法。平板培养 方法步骤繁琐，费时费力，且对志贺氏菌缺乏合适的选择性培养基，其它微生 物(如沙门氏菌)竞争性生长，抑制了志贺氏菌，对此菌的检测准确性大大 降低；免疫方法已进行多年的研究，但此方法也面临纯化、富集培养等问题， 还有严重的交叉反应。同时这两种方法每次只能确定或排除一种病原体，不适 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于志贺氏菌检测的悬浮芯片，包括诊断微球和固定在该诊断微球上的寡聚核苷酸探针，其特征是该寡聚核苷酸探针是志贺氏菌侵袭性质粒抗原Ｈ基因上的一段ＤＮＡ序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王景林，赵金银，高姗，刘艳华，康琳，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]