一种检测异基因造血干细胞移植后供受嵌合率的方法技术

本发明专利技术采用了实时定量ＰＣＲ技术（ＲＱ－ＰＣＲ）联合单核苷酸多态性（ＳＮＰ）检测异基因造血干细胞移植后供受者嵌合率，建立了含有目的基因和内参的质粒标准品倍比稀释的标准曲线，标准品构建模板为此ＳＮＰ位点阳性的患者的定性ＰＣＲ产物，将其克隆入Ｔ载体、构建质粒，倍比稀释后建立标准曲线。本发明专利技术提供的新方法利于及早发现排斥、预防复发，提高移植的成功率，具有较高的灵敏度和稳定性，不需要大量消耗移植前的宝贵标本，且可以作为个体识别的用途。本发明专利技术可替代目前通行的ＳＴＰ－ＰＣＲ半定量检测方法，利用大多医院已购置的实时定量ＰＣＲ仪进行嵌合率定量检测，准确、简便、快速、成本较低。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测异基因造血干细胞移植后供受者嵌合率的方法，该方法包括以下步骤：　（１）基因组ＤＮＡ制备；　（２）ＳＮＰ位点选择及引物和探针设计；　（３）筛选供受者差异ＳＮＰ位点；　（４）质粒标准品及标准曲线的建立；　（ ５）实时定量ＰＣＲ检测；　（６）供者嵌合率的计算。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王健民，邵宇，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]