蔗糖梯度离心溶液及其制备方法、流感裂解病毒疫苗制备工艺及病毒纯化工艺技术

本申请实施例公开一种蔗糖梯度离心溶液的制备方法，应用于流感裂解病毒梯度离心纯化工艺，包括：取200

【技术实现步骤摘要】
蔗糖梯度离心溶液及其制备方法、流感裂解病毒疫苗制备工艺及病毒纯化工艺


[0001]本申请实施例涉及流感裂解病毒疫苗领域，尤其涉及一种蔗糖梯度离心液的制备方法、蔗糖梯度离心溶液、流感裂解病毒疫苗制备工艺及流感裂解病毒纯化工艺。

技术介绍

[0002]流行性感冒(简称流感)是一种具有严重危害的病毒性急性呼吸道传染疾病，该病主要通过带有流感病毒的空气飞沫在人群中传播。在流感大流行期间，流感的发病率可达5％
‑
30％，严重的病例可引起病毒性肺炎和继发细菌性感染，患慢性呼吸道疾病的老人死亡率达1/1500。流感疫苗是预防流感爆发和流行的最有效措施。目前，流感疫苗有流感灭活疫苗、流感减毒活疫苗和重组疫苗。其中，流感灭活疫苗有全病毒疫苗、裂解病毒疫苗和亚单位疫苗三种。
[0003]现有技术中，流感病毒疫苗生产过程的纯化工艺一般采用多步纯化：流感病毒离心破碎、超滤浓缩、超速离心机梯度离心纯化、层析纯化。
[0004]超速离心机梯度离心纯化原理为：用超速离心机对小分子物质溶液，长时间加一个离心力场达到沉降平衡，在沉降池内从液面到底部会出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液，则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降，比溶剂密度小的部分就会上浮，最后在重力和浮力平衡的位置，集聚形成大分子带状物。
[0005]超速离心机梯度离心纯化普遍采用蔗糖溶液作为梯度离心溶液。现有技术的梯度离心溶液，普遍采用磷酸盐溶液加蔗糖溶解，除菌过滤后使用。
[0006]然而，专利技术人在长期研究流感裂解病毒疫苗制备工艺的过程中发现：现有技术的纯化工艺中，配制大批量高密度的蔗糖梯度离心溶液(或简称蔗糖溶液)时，制备好的磷酸盐溶液放置于库房，再配制高密度蔗糖溶液的过程中，磷酸盐溶液加蔗糖后，容易出现溶解不完全的问题，密度越高，这种情况越明显。由于溶解效果达不到质量要求，除菌过滤阶段，配制好的蔗糖溶液特别粘稠，极易堵塞过滤器，过滤效果特别不好，为满足工艺要求，只能增加除菌过滤器的使用量，因而需要消耗大量的除菌过滤器，导致除菌过滤器单次使用量大，成本极为高昂。

技术实现思路

[0007]本申请实施例提供一种蔗糖梯度离心溶液的制备方法、蔗糖梯度离心溶液、流感裂解病毒疫苗制备工艺及流感裂解病毒纯化工艺，以有效解决蔗糖溶液配制过程中溶解不完全、除菌过滤阶段堵塞过滤器的技术难题，大量减少除菌过滤器使用量，显著降低生产成本。
[0008]为达到上述专利技术目的，第一方面，本申请实施例提供了一种蔗糖梯度离心溶液的制备方法，应用于流感裂解病毒梯度离心纯化工艺，包括：
[0009]取200
‑
900.00g/L注射用水加热，得到40～80℃的高温注射用水；
[0010]取不少于所述高温注射用水总量85％的第一部分至配液搅拌罐，开启搅拌系统后，加入30
‑
100.00g/L磷酸盐混合物溶解；
[0011]至溶解后的溶液澄清后，分梯度加入蔗糖100
‑
800.00g/L；
[0012]加入不少于总量的5％的第二部分所述高温注射用水定容并搅拌至澄清后，除菌分装。
[0013]在一些可能的实施方式中，所述高温注射用水温度为60
‑
80℃。
[0014]在一些可能的实施方式中，所述高温注射用水温度为60
‑
70℃。
[0015]在一些可能的实施方式中，所述高温注射用水温度为70
‑
80℃。
[0016]在一些可能的实施方式中，所述30
‑
100.00g/L磷酸盐混合物包括10
‑
100.00g/L磷酸氢二钠、10
‑
100.00g/L磷酸二氢钾和10
‑
100.00g/L氯化钠的至少一种。
[0017]在一些可能的实施方式中，所述第一部分所述高温注射用水为所述高温注射用水总量的90％。
[0018]在一些可能的实施方式中，所述第二部分所述高温注射用水为所述高温注射用水总量的10％。
[0019]第二方面，本申请实施例提供了一种蔗糖梯度离心溶液，采用如上所述的蔗糖梯度离心溶液的制备方法制得。
[0020]第三方面，本申请实施例提供了一种流感裂解病毒疫苗病毒纯化工艺，采用如上所述的蔗糖离心液进行梯度离心。
[0021]第四方面，本申请实施例提供了一种流感裂解病毒疫苗制备工艺，采用如上所述的病毒纯化工艺对流感裂解病毒疫苗病毒进行纯化。
[0022]本申请的有益效果是：
[0023]本申请实施例通过将蔗糖溶液的水溶剂加热至40
‑
80℃后，再加入磷酸盐混合物和蔗糖溶解，最后再加入少量加热后的所述水溶剂补充，从而达到了确保高密度蔗糖溶液溶解完全的技术效果。且由于溶液是高温状态，除菌分装的时候，粘稠状态有很大的物理改善，除菌过滤速度加快，单根过滤器能够过滤的溶液体积量有多倍增加。
具体实施方式
[0024]为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚，以下将参通过实施方式详细地描述本申请实施例的技术方案。显然，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0025]本申请实施例提供了一种蔗糖梯度离心溶液的制备方法，应用于流感裂解病毒梯度离心纯化工艺，包括：
[0026]取200
‑
900.00g/L注射用水加热，得到40～80℃的高温注射用水；
[0027]取不少于总量85％的第一部分所述高温注射用水至配液搅拌罐，开启搅拌系统后，加入30
‑
100.00g/L磷酸盐混合物溶解；
[0028]至溶解后的溶液澄清后，分梯度加入蔗糖100
‑
800.00g/L；
[0029]加入不少于总量的5％的第二部分所述高温注射用水定容并搅拌至澄清后，除菌分装。
[0030]在一些可能的实施方式中，所述高温注射用水温度为60
‑
80℃。
[0031]在一些可能的实施方式中，所述高温注射用水温度为60
‑
70℃。
[0032]在一些可能的实施方式中，所述高温注射用水温度为70
‑
80℃。
[0033]在一些可能的实施方式中，所述30
‑
100.00g/L磷酸盐混合物包括10
‑
100.00g/L磷酸氢二钠、10
‑
100.00g/L磷酸二氢钾和10
‑
100.00g/L氯化钠的至少一种。
[0034]在一些可能的实施方式中，所述第一部分所述高温注射用水为所述高温注射用水总量的90％。
[0035]在一些可能的实施方式中，所述第二部分所述高温注射用水为所述高温注射用水总量的10％。
[0036]本申请实施例还提供了一种蔗糖梯度离心溶液，采用如上所述的蔗糖密度梯度离心本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蔗糖梯度离心溶液的制备方法，应用于流感裂解病毒梯度离心纯化工艺，其特征在于，包括：取200
‑
900.00g/L注射用水加热，得到40～80℃的高温注射用水；取不少于总量85％的第一部分所述高温注射用水至配液搅拌罐，开启搅拌系统后，加入30
‑
100.00g/L磷酸盐混合物溶解；至溶解后的溶液澄清后，分梯度加入蔗糖100
‑
800.00g/L；加入不少于总量的5％的第二部分所述高温注射用水定容并搅拌至澄清后，除菌分装。2.如权利要求1所述的蔗糖梯度离心溶液的制备方法，其特征在于：所述高温注射用水温度为60
‑
80℃。3.如权利要求2所述的蔗糖梯度离心溶液的制备方法，其特征在于：所述高温注射用水温度为60
‑
70℃。4.如权利要求2所述的蔗糖梯度离心溶液的制备方法，其特征在于：所述高温注射用水温度为70
‑
80℃。5.如权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：李勇刚，蒋正东，刘鹏，袁驰，
申请(专利权)人：深圳康泰生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：