重组乙型肝炎抗原冻干保护剂、重组乙型肝炎抗原冻干疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术实施例公开了一种重组乙型肝炎抗原冻干保护剂，包括以下原料组分：甘氨酸0.1

【技术实现步骤摘要】
重组乙型肝炎抗原冻干保护剂、重组乙型肝炎抗原冻干疫苗及其制备方法


[0001]本专利技术涉及乙肝疫苗领域，尤其涉及一种重组乙型肝炎抗原冻干保护剂、重组乙型肝炎抗原冻干疫苗及其制备方法。

技术介绍

[0002]乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染性疾病，约三分之二的慢性感染者会发展成为肝硬化、肝癌等恶性肝疾患者，全球每年约有55万人死于肝癌。通过对HBV结构的研究发现，外膜蛋白是引起宿主保护性应答的主要免疫原表位。
[0003]目前，我国生产的预防性乙肝疫苗有两种，一种是酵母表达的基因工程乙肝疫苗，另一种是哺乳动物(CHO)细胞表达的基因工程乙肝疫苗，两种疫苗的活性成分均为乙肝表面S抗原，统称为第二代预防性乙肝疫苗。
[0004]目前已上市的基因工程表达的乙肝疫苗均为水针剂，为重组乙肝抗原、佐剂和生理盐水。
[0005]专利技术人在实施本专利技术的过程中发现，上述技术方案存在以下缺陷：
[0006]水针剂保存时需要在低温保存，室温或高温长时间疫苗会失效，且水针剂一旦受到微生物污染会大量繁殖，存在安全风险。

技术实现思路

[0007]本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种重组乙型肝炎抗原冻干保护剂、重组乙型冻干疫苗及其制备方法，以大大提升乙肝疫苗的耐热性和安全性。
[0008]为解决上述技术问题，本专利技术公开了以下技术方案：
[0009]一种重组乙型肝炎抗原冻干保护剂，其特征在于，包括以下原料组分：
[0010]甘氨酸
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0.1
‑
0.5mg/ml；
[0011]蔗糖
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10
‑
100mg/ml；
[0012]吐温80
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0.1
‑
0.3mg/ml；以及
[0013]渗透压调节剂。
[0014]作为一些可能的实施方式，各原料组分按照以下含量配置：
[0015]甘氨酸
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0.3
‑
0.5mg/ml；
[0016]蔗糖
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10
‑
100mg/ml；
[0017]吐温80
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0.1
‑
0.2mg/ml。
[0018]作为一个可能的实施方式，各原料组分，各原料组分按照以下含量配置：
[0019]甘氨酸
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0.3mg/ml
[0020]蔗糖
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50mg/ml
[0021]吐温80
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0.2mg/ml。
[0022]作为一些可能的实施方式，所述渗透压调节剂为氯化钠。
[0023]作为一个可能的实施方式，所述氯化钠含量为4.5mg/ml。
[0024]作为一些可能的实施方式，还包括有以下组分：
[0025]D
‑
甘露醇
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0.5
‑
3mg/ml。
[0026]相应地，本专利技术还公开了一种重组乙型肝炎抗原冻干疫苗，包括以下组分：
[0027]重组乙型肝炎抗原
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10
‑
30μg/ml；
[0028]以及如上任一项所述的冻干保护剂。
[0029]作为一些可能的实施方式，所述重组乙型肝炎抗原含量为20
‑
22μg/ml。
[0030]相应地，本专利技术还公开了一种重组乙型肝炎抗原冻干保护剂的制备方法，包括以下步骤：
[0031]用注射用水分别配制如上项所述的冻干保护剂中各原料组分的高浓度母液；
[0032]用除菌滤器对所述个原料组分的高浓度母液进行过滤除菌后，2
‑
8℃保存备用。
[0033]相应地，本专利技术还公开了一种重组乙型肝炎抗原冻干疫苗的制备方法，包括以下步骤：
[0034]将重组乙型肝炎抗原的酿酒酵母进行发酵培养表达重组乙型肝炎抗原，收集发酵产物经细胞破碎、离心、超滤和层析等工艺对重组乙型肝炎抗原进行纯化，然后根据需求用PBS(pH7.2)溶液稀释到指定抗原含量2
‑
8℃保存备用；
[0035]将采用如上所述的制备方法制备得到的母液依次按处方量加入到重组乙型肝炎抗原中，边加边搅拌直至各原料组分混合均匀；
[0036]重组乙型肝炎抗原疫苗的规格确定装量，将上述混合液分装到冻干容器中，然后将分装好的样品进行降温速率为1
‑
3℃/min预冻至
‑
40℃保温2小时以上；
[0037]将预冻好的混合液放入冻干机内，设定冻干温度为
‑
30℃，真空度为0.01
‑
0.1mbar进行冷冻干燥24
‑
48小时，提升温度至25℃进行解析干燥12
‑
24小时结束冻干；
[0038]将冻干好的样品进行密封保存，冻干样品水分含量控制不高于3％。
[0039]本专利技术的有益效果是：
[0040]本专利技术实施例通过采用甘氨酸0.1
‑
0.5mg/ml；蔗糖10
‑
100mg/ml；吐温80(0.1
‑
0.3mg/ml)；以及若干用于调节渗透压的渗透压调节剂作为重组乙型肝炎冻干保护剂的原料组分，经过除菌过滤后应用于重组乙型肝炎抗原冻干。从而大大提高了重组乙型肝炎抗原的耐热性和安全性，采用了本专利技术实施例的冻干重组乙型肝炎抗原，冻干损失低于5％，37℃放置1个月抗原含量降低小于20％，能在2～8℃保存24个月；且不会被微生物繁殖污染，大大降低了安全风险。
具体实施方式
[0041]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合具体的实施例对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的示意性实施方式及其说明仅用于解释本专利技术，并不作为对本专利技术的限定。
[0042]下面详细描述本专利技术提供的重组乙型肝炎抗原冻干保护剂的一个实施例，本实施例主要包括以下原料组分：
[0043]甘氨酸
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0.1
‑
0.5mg/ml；
[0044]蔗糖
ꢀ本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组乙型肝炎抗原冻干保护剂，其特征在于，包括以下原料组分：甘氨酸
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0.1
‑
0.5mg/ml；蔗糖
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10
‑
100mg/ml；吐温80
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0.1
‑
0.3mg/ml；以及渗透压调节剂。2.如权利要求1所述的重组乙型肝炎抗原冻干保护剂，其特征在于，各原料组分按照以下含量配置：甘氨酸
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0.3
‑
0.5mg/ml；蔗糖
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10
‑
100mg/ml；吐温80
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0.1
‑
0.2mg/ml。3.如权利要求2所述的重组乙型肝炎抗原冻干保护剂，其特征在于，各原料组分按照以下含量配置：甘氨酸
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0.3mg/ml；蔗糖
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50mg/ml；吐温80
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0.2mg/ml。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的重组乙型肝炎冻干保护剂，其特征在于，所述渗透压调节剂为氯化钠。5.如权利要求4所述的重组乙型肝炎冻干保护剂，其特征在于，所述氯化钠原料含量为4.5mg/ml。6.如权利要求4所述的重组乙型肝炎冻干保护剂，其特征在于，还包括有以下原料组分：D
‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：祝孟杰，曾银怀，钟晓勇，刘洁，
申请(专利权)人：深圳康泰生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：