双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途技术方案

本发明专利技术公开了双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途，包括以下步骤：替米沙坦溶于二甲基亚砜得到替米沙坦溶液并加热备用；制备第一多肽；所述第一多肽中加入磷酸盐缓冲液，用碳酸盐溶液调节其酸碱值，并超声溶解，得到第一多肽溶液；将所述第一多肽溶液加热至沸腾后冷却，加入所述替米沙坦溶液，混匀后置于水中反应，得到共组装水凝胶；最后通过高速离心去除未反应的替米沙坦，冻干后以制得共组装纳米药物，从而解决针对肾素血管紧张素系统的协同调控，实现在心梗治疗中纳米药物的协同作用，另外心梗过程中的心梗区域中AT1R表达上调，使得共组装纳米药物能富集心梗部位，从而赋予新的纳米药物的靶向性能。物的靶向性能。物的靶向性能。

【技术实现步骤摘要】
双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途


[0001]本专利技术属于纳米医药
，尤其涉及一种双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途，本专利技术还涉及该药物的制备方法以及在制备治疗心梗药物中的用途。

技术介绍

[0002]人体内的肾素-血管紧张素系统(RAS)在心肌梗塞的发生发展中起到了重要作用，该系统的失衡会加速疾病的发展。该系统中存在两个作用轴，分别是以血管紧张素Ⅱ受体1为靶点的负性作用轴，以及以Mas受体为靶点的正性作用轴。既往已有针对两轴的研究，如使用替米沙坦和血管紧张素1-7治疗心血管疾病，但在心梗治疗上，目前还没有针对RAS双受体的协同调控的应用，另外由于ARB药物与血管紧张素1-7的理化性质差异，使得两者难以单纯结合应用。
[0003]本专利技术提出一种了双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途，目前未见对此类化合物的任何报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术提出了双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途，以解决在心梗治疗上，缺乏针对RAS双受体协同调控药物的问题，本专利技术的另一个目的是研究该新型纳米药物改善心梗的用途。
[0005]本专利技术提出双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途，包括以下步骤：
[0006]替米沙坦溶于二甲基亚砜得到替米沙坦溶液并加热备用；
[0007]制备第一多肽；
[0008]所述第一多肽加入磷酸盐缓冲液，用碳酸盐溶液调节其酸碱值，并超声溶解，得到第一多肽溶液；
[0009]将所述第一多肽溶液加热至沸腾后冷却，加入所述替米沙坦溶液，混匀后置于水中反应，得到共组装纳米水凝胶；
[0010]最后通过高速离心去除所述共组装纳米水凝胶中未反应的替米沙坦，冻干后以制得双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物。
[0011]其中，所述制备第一多肽包括以下步骤：
[0012]制备NBD封端基团；
[0013]用二氯甲烷将二氯树脂溶胀；
[0014]以所述二氯树脂作为固相载体，并按照预设顺序依次加Fmoc系列保护氨基酸和所述NBD封端基团，并经N，N-二甲基甲酰胺处理后得到含肽链的树脂；
[0015]用二氯甲烷洗净树脂中的N，N-二甲基甲酰胺，加入三氟乙酸将肽链从树脂上切下
来；
[0016]真空旋转蒸发除去三氟乙酸，得到粘稠的液体后加入无水乙醚析出的沉淀即为产物；
[0017]产物经高效液相色谱提纯后即可得到第一多肽。
[0018]其中，所述制备NBD封端基团包括如下步骤：
[0019]将β-丙氨酸和碳酸钾按第一质量比溶入甲醇和水的混合液中，并在氮气保护下进行搅拌，得到第一混合溶液；
[0020]将NBD-Cl溶入甲醇中，得到第二混合溶液；
[0021]将所述第二混合液缓慢注入到所述第一混合溶液中，在室温下进行反应，直到反应完成，得到第一反应液；
[0022]除去所述第一反应液中的甲醇，并用盐酸将剩余水溶液的酸碱值调节至预设范围得到第三混合溶液；
[0023]过滤所述第三混合溶液，得到滤液和棕黄色固体沉淀，收集棕黄色固体沉淀，得到第一产物；
[0024]将所述滤液用无水乙醚或二氯甲烷萃取，收集有机相层，所述有机相层用无水硫酸镁干燥后除去有机溶剂，得到第二产物；
[0025]所述第一产物和所述第二产物均为NBD封端基团。
[0026]其中，所述第一多肽的序列为NBD-F
D
F
D
Y
D-E
D
E
D-G-DRVYIHP。
[0027]其中，所述预设顺序为Fmoc脯氨酸、Fmoc组氨酸、Fmoc异亮氨酸、Fmoc酪氨酸、Fmoc缬氨酸、Fmoc精氨酸、Fmoc天冬氨酸、Fmoc甘氨酸、D构型的Fmoc谷氨酸、D构型的Fmoc谷氨酸、D构型的Fmoc酪氨酸、D构型的Fmoc苯丙氨酸、D构型的Fmoc苯丙氨酸、NBD封端基团。
[0028]其中，所述以所述二氯树脂作为固相载体，并按照预设顺序依次加Fmoc系列保护氨基酸和所述NBD封端基团，并经N，N-二甲基甲酰胺处理后得到含有肽链的树脂是指：
[0029]称取Fmoc脯氨酸与N，N-二异丙基乙胺，溶解在二氯甲烷中；
[0030]用甲醇和N，N-二异丙基乙胺封闭二氯树脂；
[0031]用二氯甲烷清洗后，再换用N，N-二甲基甲酰胺清洗，加入哌啶反应脱除Fmoc脯氨酸上的氨基保护基；
[0032]用N，N-二甲基甲酰胺清洗残余的哌啶，再加入下一个Fmoc氨基酸，同时加入偶联剂和N，N-二异丙基乙胺，直到反应完成；
[0033]用二氯甲烷清洗，再换用N，N-二甲基甲酰胺清洗，加入哌啶反应脱除Fmoc氨基酸上的氨基保护基；
[0034]按照预设顺序重复操作，直到所有Fmoc氨基酸和NBD封端基团都被加入后，加入哌啶反应脱除NBD封端基团上的氨基保护基，用N，N-二甲基甲酰胺清洗，即得到含肽链的树脂。
[0035]其中，所述酸碱值的预设范围为1-2。
[0036]其中，所述第一质量比为0.489质量份的β-丙氨酸和2.07质量份的碳酸钾，所述第一混合溶液包括β-丙氨酸、碳酸钾、甲醇和水，所述第二混合溶液包括NBD-Cl和甲醇。
[0037]本专利技术还提出基于双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法制备的共组装纳米药物，包括1体积份的替米沙坦和4体积份的第一多肽。
[0038]本专利技术还提出基于双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法制备的共组装纳米药物的用途在于调控治疗心梗疾病。
[0039]本专利技术的有益效果为：通过制得第一多肽，使其通过加热—冷却自组装，并在该过程中加入替米沙坦，可以形成新的纳米粒子，从而实现针对RAS的双受体协同调控，另外心梗过程中的生物分子学变化，使得含有替米沙坦的共组装纳米药物能富集心梗部位，从而赋予新的纳米粒子一定的靶向性能。
附图说明
[0040]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0041]图1是本专利技术双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法与用途的流程结构示意图。
[0042]图2是第一多肽合成的流程结构示意图。
[0043]图3是NBD封端基团的制备流程示意图。
[0044]图4是第一多肽中添加氨基酸的流程示意图。
[0045]图5A左侧为修饰后的血管紧张素1-7多肽分子结构，右侧为替米沙坦分子结构；图5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：替米沙坦溶于二甲基亚砜得到替米沙坦溶液并加热备用；制备第一多肽；所述第一多肽加入磷酸盐缓冲液，用碳酸盐溶液调节其酸碱值，并超声溶解，得到第一多肽溶液；将所述第一多肽溶液加热至沸腾后冷却，加入所述替米沙坦溶液，混匀后置于水中反应，得到共组装纳米水凝胶；最后通过高速离心去除所述共组装纳米水凝胶中未反应的替米沙坦，冻干后以制得双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物。2.如权利要求1所述的双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述制备第一多肽包括以下步骤：制备NBD封端基团；用二氯甲烷将二氯树脂溶胀；以所述二氯树脂作为固相载体，并按照预设顺序依次加Fmoc系列保护氨基酸和所述NBD封端基团，并经N，N-二甲基甲酰胺处理后得到含肽链的树脂；用二氯甲烷洗净树脂中的N，N-二甲基甲酰胺，加入三氟乙酸将肽链从树脂上切下来；真空旋转蒸发除去三氟乙酸，得到粘稠的液体后加入无水乙醚析出的沉淀即为产物；产物经液相色谱提纯后即可得到第一多肽。3.如权利要求2所述的双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述制备NBD封端基团包括如下步骤：将β-丙氨酸和碳酸钾按第一质量比溶入甲醇和水的混合液中，并在氮气保护下进行搅拌，得到第一混合溶液；将NBD-Cl溶入甲醇中，得到第二混合溶液；将所述第二混合液注入到所述第一混合溶液中，在室温下进行反应，直到反应完成，得到第一反应液；除去所述第一反应液中的甲醇，并用盐酸将剩余水溶液的酸碱值调节至预设范围得到第三混合溶液；过滤所述第三混合溶液，得到滤液和棕黄色固体沉淀，收集棕黄色固体沉淀，得到第一产物；将所述滤液用无水乙醚或二氯甲烷萃取，收集有机相层，所述有机相层用无水硫酸镁干燥后除去有机溶剂，得到第二产物；所述第一产物和所述第二产物均为NBD封端基团。4.如权利要求1所述的双配体靶向协同调控肾素血管紧张素系统的共组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述第一多肽的序列为NBD-F
D
F
D
Y
D-E
D
E
D-G-DR...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈敏生，蔡延滨，温展鹏，区彩文，
申请(专利权)人：南方医科大学珠江医院，
类型：发明
国别省市：