【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物制剂领域，具体涉及一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂、试剂盒和检测方法。
技术介绍
1、新型冠状病毒疫苗(简称新冠疫苗)对由新型冠状病毒(sars-cov-2，简称新冠病毒)感染引起的严重呼吸系统疾病具有预防作用，特别是减少重症、死亡病例方面效果显著。新冠病毒外壳表面的s蛋白可作为新冠病毒的保护性抗原，可诱发机体产生中和抗体，同时还与病毒侵染相关，因此成为目前研发疫苗治疗的靶点。
2、然而，其s蛋白受体结合域(rbd)可发生非同义突变，使得新冠病毒具有较高的变异能力，引起病毒传播能力和致病能力的改变，目前发现新冠病毒奥密克戎变异株在s蛋白上存在三个区域的突变，可导致新冠病毒疫苗所诱导的抗体中和作用降低，从而导致现有技术的新冠疫苗中针对新冠病毒变异株抗原检测的有效性大大降低。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂、试剂盒和检测方法。所述检测试剂盒可以显著提高新冠疫苗奥密克戎变异株抗原的检测有效性。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂，所述检测试剂包括：针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体和/或针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体；
4、所述针对新型冠状病毒
5、所述针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体为采用商品化哺乳动物细胞重组表达的sars-cov-2b.1.1.529(omicron)s1+s2三聚体蛋白免疫家兔制备得到。
6、第二方面，本专利技术提供一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂盒，所述检测试剂盒包括：针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体、针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔igg抗体、包被液、封闭液、显色液和终止液。
7、第三方面，本专利技术提供一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，使用第二方面所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂盒对待测疫苗抗原样品进行检测，所述方法包括如下步骤：
8、(1)采用针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体包被酶标板，在酶标板中加入封闭液，封板孵育；
9、(2)分别加入待测疫苗抗原样品和抗原标准品，于板内按不同梯度稀释后，将含有所述待测疫苗抗原样品和抗原标准品的酶标板，封板孵育；
10、(3)加入针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体作为一抗，将含有所述一抗的酶标板，封板孵育；
11、(4)加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔igg抗体作为二抗，得到含有二抗的酶标板，封板孵育；
12、(5)加入显色液进行显示反应后，加入终止液终止反应，测定待测疫苗抗原样品的抗原含量。
13、优选地，所述封板孵育后，还包括洗板、拍干的步骤。
14、优选地，所述封板孵育的温度为35-37℃，例如可以是35℃、36℃或37℃等，所述封板孵育的时间为1-2小时，例如可以是1、1.5或2等。
15、优选地，步骤(1)中，所述酶标板的包被步骤包括：
16、取所述山羊多克隆抗体用包被液稀释后，加入酶标板中，2-8℃(例如可以是2℃、4℃、6℃或8℃等)孵育10-12(例如可以是10、11或12等)小时；将酶标板洗板拍干，加入封闭液封闭所述酶标板，封闭后置于35-37℃(例如可以是35℃、36℃或37℃)孵育1-2(例如可以是1、1.5或2等)小时；将酶标板洗板拍干，得到包被完成的酶标板。
17、优选地，所述山羊多克隆抗体稀释后的浓度为0.5-10μg/ml，例如可以是0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、6μg/ml、8μg/ml或10μg/ml等。
18、优选地，所述包被液中含有碳酸氢钠，所述包被液的ph为9.0-9.6，例如可以是9.0、9.2、9.4或9.6等。
19、优选地，所述封闭液为牛血清白蛋白溶液，所述封闭液中牛血清白蛋白的添加含量为2-5％，例如可以是2％、3％、4％或5％等。
20、优选地，步骤(5)中，所述测定待测疫苗抗原样品的抗原含量的步骤包括：
21、将所述终止反应的酶标板放入酶标仪中，获取所述抗原标准品和所述待测疫苗抗原样品不同稀释倍数下在酶标仪中波长450±2nm处的od值；依据所述抗原标准品不同稀释倍数下波长450±2nm处的od值与其相应浓度建立四参数模型曲线，得出计算方程，根据所述待测疫苗抗原样品不同稀释倍数下波长450±2nm处的od值代入上述计算方程，计算所述待测疫苗抗原样品的抗原含量。
22、优选地，所述酶标仪中还设置波长630±2nm。
23、本专利技术所述的数值范围不仅包括上述列举的点值，还包括没有列举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本专利技术不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
24、相对于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：
25、本专利技术通过设置针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域(rbd)表位的山羊多克隆抗体包被酶标板、针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域(rbd)表位的兔多克隆抗体作为一抗检测新型冠状病毒(奥密克戎变异株)疫苗的抗原含量，检测周期短，能快速获知检测结果，所用检测原料可长期保存，疫苗抗原含量的检测结果简单易得且准确。
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1.一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括：针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的S蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体和/或针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的S蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体；
2.一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括：针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的S蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体、针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的S蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG抗体、包被液、封闭液、显色液和终止液。
3.一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，使用权利要求2所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂盒对待测疫苗抗原样品进行检测，所述方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，所述封板孵育后，还包括洗板、拍干的步骤；
5.根据权利要求3或4所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特
6.根据权利要求5所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，所述山羊多克隆抗体稀释后的浓度为0.5-10μg/mL。
7.根据权利要求5或6所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，所述包被液中含有碳酸氢钠，所述包被液的pH为9.0-9.6。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，所述封闭液为牛血清白蛋白溶液，所述封闭液中牛血清白蛋白的质量浓度为2-5％。
9.根据权利要求3-8中任一项所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，步骤(5)中，所述测定待测疫苗抗原样品的抗原含量的步骤包括：
10.根据权利要求9所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，所述酶标仪中还设置波长630±2nm。
...【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括：针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体和/或针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体；
2.一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括：针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体、针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的s蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔igg抗体、包被液、封闭液、显色液和终止液。
3.一种新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，使用权利要求2所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测试剂盒对待测疫苗抗原样品进行检测，所述方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的新型冠状病毒疫苗中奥密克戎变异株抗原含量检测方法，其特征在于，所述封板孵育后，还包括洗板、拍干的步骤；
5.根据权利要求3或...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘萌萌，雷国民，钟子辉，李东，刘建凯，甘建辉，
申请(专利权)人：深圳康泰生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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