用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒及其测定方法技术

一种用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒及其测定方法，试剂盒装有下列各种试剂：抗鸟氨酸脱羧酶抗体包被的预包被板；生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体；辣根过氧化物酶标记的亲和素；鸟氨酸脱羧酶标准品；样品稀释液；洗涤液；显色剂Ａ、Ｂ；终止液。它利用标记免疫测定技术通过对鸟氨酸脱羧酶抗原含量的测定来间接反映鸟氨酸脱羧酶的活性，它解决了现有技术通过检测［１４］↑ＣＯ２或腐胺的量来反映鸟氨酸脱羧酶的活性而存在的操作复杂、费时费力、有放射性污染、灵敏度较低的缺点。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及测定鸟氨酸脱羧酶
本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的A.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)抗鸟氨酸脱羧酶抗体包被的预包被板；(2)生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(3)辣根过氧化物酶标记的亲和素；(4)鸟氨酸脱羧酶标准品；(5)样品稀释液；(6)洗涤液；(7)显色剂A、B；(8)终止液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，对于组织提取液、血浆、血清中鸟氨酸脱羧酶的测定，取抗鸟氨酸脱羧酶抗体，用PH9.6碳酸盐缓冲液配制10-100ug/ml于微孔板微孔内，每孔加100ul，37℃1-2小时或2-8℃过夜，洗板5次后，常规封闭，干燥；取组织提取液或血清或血浆50ul加入各孔中，每孔加生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体50ul，同时做5个浓度的标准孔和阴性对照孔；置37℃1小时，洗涤5次，每孔加辣根过氧化物酶标记的亲和素100ul，37℃1小时，洗涤5次，每孔加显色剂A、B各50ul，37℃避光10分钟，于酶标仪450nm处测各孔OD值；同时作标准品，以各标准孔浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，待测样品的鸟氨酸脱羧酶含量即可根据其OD值从标准曲线上查得。B.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(2)辣根过氧化物酶标记的亲和素；(3)鸟氨酸脱羧酶标准品；(4)洗涤液；(5)显色剂A、B；(6)终止液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，对于细胞中鸟氨酸脱羧酶的测定，先将细胞计数并调至一定数量后，分配于微孔培养板中，然后置5％CO2培养箱中培养18-24小时，待细胞贴壁(不贴壁生长的细胞需离心)后，洗涤3次，常规固定，封闭，然后每孔加生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体100ul，37℃1-3小时后，洗涤5次，每孔加辣根过氧化物酶标记的亲和素100ul，37℃1小时，洗涤5次，每孔加显色剂A、B各50ul，37℃避光10分钟，于酶标仪450nm处测各孔OD值；同时作标准品，以各标准孔浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，待测样品的鸟氨酸脱羧酶含量即可根据其OD值从标准曲线上查得。C.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(2)辣根过氧化物酶标记的亲和素；(3)鸟氨酸脱羧酶标准品；(4)洗涤液；(5)显色剂A、B；(6)终止液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，其特征在于对于细胞中鸟氨酸脱羧酶的测定，先将细胞计数并调至一定数量后，分配于微孔培养板中，加入不同浓度的药物，然后置5％CO2培养箱中培养18-24小时，待细胞贴壁(不贴壁生长的细胞需离心)后，洗涤3次，常规固定，封闭，然后每孔加生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体100ul，37℃1-3小时后，洗涤5次，每孔加辣根过氧化物酶标记的亲和素100ul，37℃1小时，洗涤5次，每孔加显色剂A、B各50ul，37℃避光10分钟，于酶标仪450nm处测各孔OD值；同时作标准品，以各标准孔浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，待测样品的鸟氨酸脱羧酶含量即可根据其OD值从标准曲线上查得；或根据各孔OD值，直接判定试验细胞的药敏结果。D.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(2)荧光标记的二抗； (3)洗涤液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，对于组织切片或细胞涂片中鸟氨酸脱羧酶的测定，将组织切片或细胞涂片常规固定后，用5％脱脂奶粉封闭，然后加抗鸟氨酸脱羧酶抗体，37℃1-2小时或2-8℃过夜，洗板后，加荧光标记的二抗，37℃1小时，洗板后，于荧光显微镜下检测结果。E.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)抗鸟氨酸脱羧酶抗体包被的预包被板；(2)抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(3)辣根过氧化物酶标记的二抗；(4)鸟氨酸脱羧酶标准品；(5)样品稀释液；(6)洗涤液；(7)显色剂A、B；(8)终止液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，对于组织提取液、血浆、血清中鸟氨酸脱羧酶的测定，取抗鸟氨酸脱羧酶抗体，用PH9.6碳酸盐缓冲液配制10-100ug/ml于微孔板微孔内，每孔加100ul，37℃1-2小时或2-8℃过夜，洗板5次后，常规封闭，干燥；取组织提取液或血清或血浆50ul加入各孔中，每孔加抗鸟氨酸脱羧酶抗体50ul，同时做5个浓度的标准孔和阴性对照孔；置37℃1小时，洗涤5次，每孔加辣根过氧化物酶标记的二抗100ul，37℃1小时，洗涤5次，每孔加显色剂A、B各50ul，37℃避光10分钟，于酶标仪450nm处测各孔OD值；同时作标准品，以各标准孔浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，待测样品的鸟氨酸脱羧酶含量即可根据其OD值从标准曲线上查得。F.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(2)辣根过氧化物酶标记的二抗；(3)鸟氨酸脱羧酶标准品；(4)洗涤液；(5)显色剂A、B；(6)终止液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，对于细胞中鸟氨酸脱羧酶的测定，先将细胞计数并调至一定数量后，分配于微孔培养板中，然后置5％CO2培养箱中培养18-24小时，待细胞贴壁(不贴壁生长的细胞需离心)后，洗涤3次，常规固定，封闭，然后每孔加抗鸟氨酸脱羧酶抗体100ul，37℃1-3小时后，洗涤5次，每孔加辣根过氧化物酶标记的二抗100ul，37℃1小时，洗涤5次，每孔加显色剂A、B各50ul，37℃避光10分钟，于酶标仪450nm处测各孔OD值；同时作标准品，以各标准孔浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，待测样品的鸟氨酸脱羧酶含量即可根据其OD值从标准曲线上查得。G.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(2)辣根过氧化物酶标记的二抗；(3)鸟氨酸脱羧酶标准品；(4)洗涤液；(5)显色剂A、B；(6)终止液。一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的方法，对于细胞中鸟氨酸脱羧酶的测定，先将细胞计数并调至一定数量后，分配于微孔培养板中，加入不同浓度的药物，然后置5％CO2培养箱中培养18-24小时，待细胞贴壁(不贴壁生长的细胞需离心)后，洗涤3次，常规固定，封闭，然后每孔加抗鸟氨酸脱羧酶抗体100ul，37℃1-3小时后，洗涤5次，每孔加辣根过氧化物酶标记的二抗100ul，37℃1小时，洗涤5次，每孔加显色剂A、B各50ul，37℃避光10分钟，于酶标仪450nm处测各孔OD值；同时作标准品，以各标准孔浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，待测样品的鸟氨酸脱羧酶含量即可根据其OD值从标准曲线上查得；或根据各孔OD值，直接判定试验细胞的药敏结果。H.一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，试剂盒装有下列各种试剂(1)抗鸟氨酸脱羧酶抗体；(2)辣根过氧化物酶标记的二抗；(3)洗涤液； (4)显色剂。一种运用标记免疫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种运用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒，它有试剂盒，其特征在于：试剂盒装有下列各种试剂：（１）抗鸟氨酸脱羧酶抗体包被的预包被板；（２）生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体；（３）辣根过氧化物酶标记的亲和素；（４）鸟氨酸脱羧酶 标准品；（５）样品稀释液；（６）洗涤液；（７）显色剂Ａ、Ｂ；（８）终止液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱有名，韩金祥，尤瑞巴克拉克，
申请(专利权)人：山东省医药生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]