本发明专利技术公开了一种大肠癌预后诊断生物标记物OCT1蛋白，还公开了该标记物在制造用于大肠癌受试者预后诊断的试剂盒中的应用以及相应的试剂盒。与目前已应用于临床或申请专利的生物标记物相比，本发明专利技术中的OCT1蛋白的表达与大肠癌的预后更为相关，其在大肠癌组织中的表达明显高于正常组织p<0.0001，并与肿瘤的体积呈正相关；与AJCC分期系统相比较，OCT1表达水平可更好地评估大肠癌患者的预后，对大肠癌也有更好的诊断效能。经COX多因素回归分析，OCT1的过表达具有独立的预后价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及癌症预后领域，具体涉及一种与大肠癌预后相关的生物标记物。
技术介绍
目前大肠癌的预后和治疗依赖于诊断时肿瘤的临床分期，然而单纯临床分期并不能准确预测患者的预后。大肠癌的发生、发展中伴随着一系列分子生物学的改变，理想的肿瘤标记物应具有较高的敏感性和特异性，并能反映肿瘤的进展及治疗效果。如果患者的预后能准确地被预测，就能制定很好的治疗方案，避免治疗不足而导致的疾病再发，或仅需手术治疗而不必要的额外过度治疗。因此，筛选大肠癌预后诊断相关的生物标记物，是能提高肿瘤临床治疗的针对性，降低患者的治疗费用，节省宝贵的治疗时间的前提条件。目前，已有一部分肿瘤预后相关的生物标记物在临床上得到应用:①血清癌胚抗原CEA测定:1965年发现血清中检测CEA筛查大肠癌的方法。在大肠癌患者血清中，可以检测到癌胚抗原CEA，这是一种糖蛋白，常出现与恶性肿瘤患者血清中，并非大肠癌的特异性相关抗原，故血清CEA测定对本病的诊断不具有特异性。但用放射免疫法测定CEA，做定量动态观察，对判定大肠癌的手术效果与检测术后复发有一定意义。如大肠癌经手术将肿瘤完全切除后，血清CEA则逐渐下降；若复发，又可再度升高。然而在浸润性肿瘤中CEA的敏感性低于35%，它也不能用于检测早期大肠癌，特异性不够，在许多病理中都有CEA水平的升高。②最近还发现CA19-9抗原(Ritts 1984)，CA19-9是一种糖蛋白类的肿瘤标记物，在消化道肿瘤患者的血清中含量明显升高。血清CA-19-9浓度与Duke分期呈正相关，随着分期的升级浓度升高，因此浓度的大小对于判断大肠癌的预后有临床应用价值。但血清检测CA19-9的阳性率较低，仅有22.39%，在各Duke分期中，血清与组织中CA19-9的阳性率差异情况与CEA相同。Duke A?Duke C期中，通过血清检测CA19-9的阳性率均明显低于术后组织，尤其是在Duke A期患者，检测血清CA19-9的结果为阴性。CA19-9对大肠癌的早期诊断价值不高，但对结直肠的疗效观察和复发监测具有重要临床意义。③CA50以脂或脂蛋白结合的形式存在于细胞膜，属于鞘糖脂类标记物，是胰腺和大肠癌的标记物，特异性不够。目前，申请专利的“大肠癌预后相关的分子标记物”有如下几种:①Vitronectin (专利号:US 20130071864 Al) ROC 曲线下面积 AUC = 0.673;②SATB2(专利号:US8465934 B2)，SATB2表达水平与患者生存期呈正相关P = 0.14 ;③基因signature(专利号:WO 2013052480 Al)经多因素COX回归生存分析表明HR=3.08 (1.33-7.14)，P = 0.008④染色体I8Q缺失:模型I染色体I8Q缺失HR =2.46 (1.06-5.71),P = 0.036，模型 2 染色体 I8Q 缺失 HR = 2.48 (1.05-5.84)，P = 0.038，模型3染色体I8Q缺失HR = 3.32 (1.43-7.73)，P = 0.005。这些分子标记物与大肠癌的预后相关性有限，在大肠癌的预后评估中仍存在不准确的缺陷。
技术实现思路
有鉴于现有技术的上述缺陷，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种与大肠癌的预后更为相关并且具有独立预后意义的生物标记物，并将其应用于制造大肠癌预后诊断试剂盒。所采用的技术方案如下:一种大肠癌预后诊断生物标记物，所述大肠癌预后诊断生物标记物为OCTl蛋白。进一步地，所述OCTl蛋白在大肠癌组织中的表达水平显著高于所述OCTl蛋白在正常肠上皮组织中的表达水平，P〈0.0001。进一步地，所述OCTl蛋白的表达水平与肿瘤体积呈正相关，所述OCTl蛋白的表达水平与AJCC分期相关，所述OCTl蛋白的表达水平与年龄性别无关。进一步地，所述OCTl蛋白的表达水平与大肠癌患者的生存期呈显著负相关，P〈0.0OOlo一种大肠癌预后诊断生物标记物在制造用于大肠癌受试者预后诊断的试剂盒中的应用，包括以下步骤:a)提供取自大肠癌受试者的样品和对照品；b)对步骤a)的所述样品和所述对照品中的所述OCTl蛋白进行定量测定，得到样品值和对照值；c)将步骤b)中得到的所述样品值与所述对照值进行比较；d)如果所述样品值高于所述对照值，则判断所述大肠癌受试者的预后不良。进一步地，所述步骤a)中的所述样品取自受试者的大肠癌组织，所述对照品取自受试者对应的癌旁组织。进一步地，所述步骤b)中使用免疫组化检测法对所述OCTl蛋白进行定量测定。进一步地，所述免疫组化检测法的结果根据阳性细胞染色强度和所述阳性细胞占所有同类细胞的百分比综合判断。进一步地，染色系数用于判断所述免疫组化检测法的结果，所述染色系数定义为(I)= 0Xf0+lXfl+2Xf2+3Xf3，其中f0_f3是指所述染色强度为O分?3分的细胞所占百分比。—种用于大肠癌受试者预后诊断的试剂盒，所述试剂盒包括所述OCTl蛋白的抗体。本专利技术的第一方面是基于以往未认识到的事实，即取自患有大肠癌的受试者的样品中OCTl蛋白的表达可作为受试者疾病状态的指示物。更具体地，本专利技术第一次指出一方面的OCTl的高表达值与另一方面的更具攻击性或高风险的形式的大肠癌之间的关联性。基于以OCTl表达作为大肠癌预后指示物的本专利技术有若干优点。与目前“已应用于临床的生物标记物”及“已申请专利的分子标记物”相比，OCTl的表达与大肠癌的预后更为相关。OCTl蛋白作为预后标记物，其表达水平与大肠癌的疾病进程相关，0CT-1在正常肠上皮中表达中等强度，但是在大肠癌组织中0CT-1的表达明显升高，P〈0.0001。0CT-1表达强阳性的部位是在大肠癌组织的细胞核，说明作为转录因子的0CT-1在大肠癌中是活化的。0CT-1表达与大肠癌临床病理特点的相关性。0CT-1高表达与肿瘤体积呈正相关，此外，0CT-1的表达水平与AJCC分期相关P = 0.029，与年龄性别无关。Kaplan-Meier生存曲线分析，0CT-1的表达水平与大肠癌患者的生存期呈显著负相关P〈0.0001，与AJCC分期系统相比较，0CT-1表达水平可更好地评估大肠癌患者的预后p = 0.0Olvs.p〈0.0001。我们利用ROC曲线评估AJCC分期和OCT-1表达对大肠癌预后的价值，发现与AJCC分期系统相比较，0CT-1表达水平对大肠癌也有更好的诊断效能。将0CT-1、AJCC分期、肿瘤体积、性别、年龄均被纳入Cox回归模型，可见OCT-1过表达与生存呈明显的负相关P〈0.000, HR = 5.243,95% Cl =2.235?12.302，0CT-1的过表达具有独立的预后意义。OCTl与肿瘤的发展、转移与侵袭相关联，使用OCTl作为诊断的指标，可以提高原先诊断的敏感性、减少漏诊率，作为预后指标及判断结肠癌病情发展的参考。以下将结合附图对本专利技术作进一步说明，以充分说明本专利技术的目的、技术特征和技术效果。【附图说明】图1a是90对正常和大肠癌组织芯片中，用免疫组化检测0CT-1的表达，0CT-1表达于细胞核，A 100X，B 200X，C 400 X，为正常结肠组织；D 100X，E 200X,F400X为大肠癌组织。图1b是本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种大肠癌预后诊断生物标记物，其特征在于，所述大肠癌预后诊断生物标记物为OCT1蛋白。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：房静远，王颖超，许杰，钱缙，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属仁济医院，
类型：发明
国别省市：上海;31
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