改善了底物特异性的依赖吡咯并喹啉苯醌(PQQ)的葡萄糖脱氢酶变体制造技术

本发明专利技术提供一种改善了底物特异性和比活性的依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶（ＰＱＱＧＤＨ），该酶的检测采用以铁氰化物离子为介体的检测系统。通过在依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶分子中特定区域引入氨基酸突变而改善了它的底物特异性，以及在野生型依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶分子的氨基酸序列中，通过缺失，置换或添加１个或多个氨基酸，使该酶在采用以铁氰化物离子为介体的检测系统中比野生型酶更高的比活性。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及改善了底物特异性的葡萄糖脱氢酶(本专利中葡萄糖脱氢酶写作GDH)的变体，具体涉及以吡咯并喹啉苯醌(本专利中吡咯并喹啉苯醌写作PQQ)为辅酶的修饰的依赖PQQ的葡萄糖脱氢酶(本专利中依赖PQQ的葡萄糖脱氢酶写作PQQGDH)，它地制造方法和葡萄糖传感器。本专利技术也涉及以铁氰化物离子为介体的检测系统中提高野生型依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶比活性的方法。本专利技术还涉及以铁氰化物离子为介体的检测系统中提高了比活性的依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶，它的制造方法，以及使用它的葡萄糖检测试剂盒和葡萄糖传感器。本专利技术之修饰的PQQGDH可以在临床实验室检验或食品分析中用于葡萄糖定量。
技术介绍
PQQGDH是以吡咯并喹啉苯醌为辅酶的葡萄糖脱氢酶。由于它催化葡萄糖氧化生成葡糖酸内酯，可以用于测定血糖。血中葡萄糖浓度是糖尿病的重要标志，因而在临床诊断上是极为重要的指标。目前血中葡萄糖浓度的测定，主流方法是利用葡萄糖氧化酶的生物传感器法，但该反应受到溶解氧浓度的干扰，测定值有可能产生误差。因而代替葡萄糖氧化酶的的依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶受到重视。本小组发现鲍氏不动杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
对双糖的活性比野生型依赖吡咯并喹啉苯醌的葡萄糖脱氢酶（ＰＱＱＧＤＨ）更低的修饰ＰＱＱＧＤＨ。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：竹岛诚嗣，松村肇庸，岸本高英，冈正则，平山令明，
申请(专利权)人：东洋纺织株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]