【技术实现步骤摘要】
利用氧化葡萄糖杆菌生产吡咯喹啉醌的方法及应用
本专利技术涉及一种微生物菌株的应用,具体的说是利用氧化葡萄糖菌DSM2003生产制备吡咯喹啉醌的工艺。
技术介绍
吡咯喹啉醌(Pyrroloquinolinequinine,PQQ)是一种水溶性醌类化合物,是葡萄糖脱氢酶和乙醇脱氢酶的辅酶,被认为是新的B族维生素(Nature2003;422:832)。PQQ分子量为330,最早是在微生物中发现,随后研究表明其也存在于动植物体内。PQQ作为多种重要酶类的辅基,参与呼吸链中的电子传递,并能调节体内自由基水平。具有重要的生理功能,已知PQQ与神经系统相关的功能有如下四种:(1)抗氧化,清除自由基;(2)影响呼吸链功能,维护线粒体能量代谢;(3)刺激神经生长因子的分泌,修复和促进神经生长;(4)延缓α-synuclein蛋白的沉积,防止神经细胞纤维化。因此,有关研究人员认为PQQ对帕金森病和老年性痴呆等多种神经变性性疾病具有潜在的治疗价值。所以,寻找简单易行的获得PQQ的方法,进行产业化生产,对促进人类的身体健康具有重大的意义。化学合成PQQ步骤多,产率低,异构体和副产品的去除需要多步纯化,并需用多种有毒试剂而污染环境(JACS,1981;103:5599-2600)。因此,一般认为生物学合成方法更具产业化意义。PQQ广泛存在于革兰阴性菌中,但合成量却有所不同,有些菌只产生痕量PQQ,供正常的生理代谢需求,如恶臭假单胞菌;还有些菌却能产生过量的PQQ,并分泌到胞外。迄今发现的能产生过量PQQ的野生菌包括无色杆菌属(Achromobacter)、交替单胞菌属(Alter ...
【技术保护点】
利用氧化葡萄糖杆菌生产吡咯喹啉醌的方法,其特征在于,它的步骤如下:(1)将氧化葡萄糖杆菌DSM 2003发酵,得到发酵液;(2)发酵液经高速离心,取上清液,经HP‑20型大孔树脂色谱柱进行富集,得到富含吡咯喹啉醌的洗脱流份;(3)将富含吡咯喹啉醌的洗脱流份减压浓缩,经聚酰胺柱色谱纯化,得到吡咯喹啉醌纯品。
【技术特征摘要】
1.利用氧化葡萄糖杆菌生产吡咯喹啉醌的方法,其特征在于,它的步骤如下:(1)将氧化葡萄糖杆菌DSM2003发酵,得到发酵液;(2)发酵液经高速离心,取上清液,经HP-20型大孔树脂色谱柱进行富集,得到富含吡咯喹啉醌的洗脱流份;(3)将富含吡咯喹啉醌的洗脱流份减压浓缩,经聚酰胺柱色谱纯化,得到吡咯喹啉醌纯品,所述步骤(1)中将氧化葡萄糖杆菌发酵的操作如下:将氧化葡萄糖杆菌菌种按照5%的比例接入发酵培养基中,所述培养基每升含有45-55g山梨醇、15-25g酵母提取物、3-6g(NH4)2SO4、3-5gKH2PO4、4-6gMgSO4·H2O,在28摄氏度下震荡培养3d,所述步骤(2)中HP-20型大孔树脂色谱柱的条件是甲醇-水梯度洗脱,甲醇与水的体积比为0:1、1:9、7:34,所述步骤(3)中聚酰胺柱色谱的条件是甲醇-水梯度洗脱,每100ml甲醇中含1ml氨水,甲醇与水的体积比为0:1、1:9,上述步骤具体操作如下:(1)氧化葡萄糖菌发酵培养将菌种按照5%的比例接入发酵培养基中,每升发酵培养基含有40g山梨醇、20g酵母提取物、5g(NH...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨雪鹏,马科,胡仙妹,钟桂芳,叶建斌,刘寅,马歌丽,
申请(专利权)人:郑州轻工业学院,
类型:发明
国别省市:河南;41
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