The present application relates to novel variants of PQQ- dependent glucose dehydrogenase with improved substrate specificity. The present invention relates to novel PQQ dependent soluble glucose dehydrogenase (sPQQGDH), which has increased substrate specificity in comparison with wild-type, and also to methods for its production and identification.
【技术实现步骤摘要】
具有改善的底物特异性的PQQ-依赖性葡萄糖脱氢酶的新变体本申请是申请号为200980124063.5、申请日为2009年6月17日的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术的主题是PQQ-依赖性葡萄糖脱氢酶(sPQQGDH)，它们的生产和鉴别方法，编码根据本专利技术的sPQQGDH的基因，生产该基因的载体，以及包含根据本专利技术的葡萄糖脱氢酶的葡萄糖传感器。
技术介绍
葡萄糖的酶测定在医学诊断中是非常重要的。这里，检测尿或血液中的葡萄糖以诊断或监测代谢性疾病的进展是必需的。在糖尿病(也称为糖尿病)的情况中，每天可能需要多次测定血糖浓度。这可以通过市场上绝大多数的计量器通过酶方法实现，在酶方法中葡萄糖被氧化，由此得到的氢(2H和2e_)进行电流分析定量(P.Vadgama, J.Med.EngTechnol.5 [6]，293-298 (1981)，K.S.Chua 和 1.K.Tan, Clin.Chem.24 [I] ,150-152(1978))。存在许多适合这种目的的各种酶，但是这些酶与各种辅助因子共同作用进行电子的主要接收，并且还具有不同的生化性质...
【技术保护点】
可溶性吡咯并喹啉醌依赖性葡萄糖脱氢酶(sPQQGDH)，其特征在于，与不动杆菌属(Acinetobacter?sp.)?的一种野生型菌株的sPQQGDH相比，其在底物结合区域的范围内具有4?5个氨基酸的插入，其中基于野生型醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter?calcoaceticus)?LMD?79.41的序列，所述插入位点位于位置Q168与L169之间，并且其中所述插入选自由下列组成的组：－具有4个氨基酸的插入，其中插入的氨基酸在位置1具有A或G，在位置2具有G、D或L，在位置3具有R或A，和在位置4具有M或V，－具有5个氨基酸的插入，其中插入的氨基酸在位置1具有...
【技术特征摘要】
2008.06.26 DE 102008030435.21.可溶性吡咯并喹啉醌依赖性葡萄糖脱氢酶(SPQQGDH)，其特征在于，与不动杆菌属(Acinetobacter sp.)的一种野生型菌株的sPQQGDH相比,其在底物结合区域的范围内具有4-5个氨基酸的插入,其中基于野生型醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)LMD 79.41的序列，所述插入位点位于位置Q168与L169之间，并且其中所述插入选自由下列组成的组: 一具有4个氨基酸的插入，其中插入的氨基酸在位置I具有A或G，在位置2具有G、D或L，在位置3具有R或A，和在位置4具有M或V， 一具有5个氨基酸的插入,其中插入的氨基酸在位置I具有A、M、S或V,在位置2具有E、G或S，在位置3具有H、K、R、S或T，在位置4具有F、H、1、L、N、V或Y，和在位置5具有F、H、L、N、Q、T或 Y。2.如权利要求1所述的sPQQGDH，其特征在于，插入位点距离底物结合区域不超过5埃。3.如权利要求1-2中任一项所述的sPQQGDH，其特征在于，其通过诱变由PT16、K0Z62、...
【专利技术属性】
技术研发人员：W韦歇尔，V莫尔勒，M欣德勒，R科克，R梅斯基斯，
申请(专利权)人：拜耳知识产权有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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