NONRATT021972小干扰RNA在制备糖尿病并发心脏自主神经疾病药物的应用制造技术

长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备糖尿病并发心脏自主神经疾病药物中的应用。实验观察到长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA可改善糖尿病模型大鼠的心脏功能异常变化，降低升高的血糖、血清炎性因子水平、氧化应激水平、升高抗氧化物质的活性。长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA处理后，可显著地抑制糖尿病模型大鼠颈上交感神经节缝隙连接半通道蛋白1(Pannexin-1)的上调表达，抑制胰岛素受体底物-1(IRS-1)异常丝氨酸302磷酸化，提高下调的IRS1表达。还可在Pannexin-1和IRS1功能异常介导疾病药物中的应用。长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA以口服、注射、含片或其它局部或全身用药剂型药物进行上述疾病防治。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及糖尿病并发心脏自主神经病变药物用途专利

技术介绍
糖尿病(DiabetesMellitus，DM)是一组代谢性临床综合征，随着社会的发展和人们生活水平的提高糖尿病的患病率逐年升高，在发达国家糖尿病患病率已达3％-7％，成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第4位需要优先考虑的疾病，已成为世界第5位死亡主因。糖尿病分为1型(胰岛素依赖性)和2型(非胰岛素依赖性)糖尿病。据估计，全球六个人里面就有一个人处于患糖尿病并发症的危险中。我国糖尿病人群的构成以2型糖尿病为主，占糖尿病人群的90％以上，严重影响着人民健康和社会发展。糖尿病自主神经病变(Diabeticautonomicneuropathy,DAN)是一组由自主神经功能和(或)结构受损引发的征候群，主要累及心血管、胃肠道和泌尿生殖系统，具有起病隐匿、逐渐进展、可于症状出现前发生、甚少自行缓解的临床特征。其中，糖尿病心脏自主神经病变(Diabeticcardiacautonomicneuropathy,DCAN)危害尤为严重，可以引起无痛性心肌缺血、心肌梗死及恶性心律失常甚至心源性猝死。自主神经包括交感和副交感神经，从中枢下行的交感或副交感神经通过外周自主神经节换神经元后支配心脏等内脏器官等。心率和血压的变化直接受到自主神经系统(交感神经和副交感神经)活动的影响。Pannexin-1基因是2000年发现的缝隙连接蛋白家族新成员，研究表明Pannexin-1蛋白可以在细胞膜上组成半通道或在细胞间形成缝隙连接通道，参与多种重要的生理病理过程。缝隙连接半通道(hemichannels)是缝隙连接通道的亚单位，在脊椎动物体内每一个半通道都是由Connexin或Pannexin蛋白组成的跨膜六聚体所构成，相邻细胞的两个半通道两两对接形成中空管道，介导小分子物质的流动，实现了细胞间信息和物质的快速交流与沟通。病理情况下Pannexin-1半通道的异常激活，细胞外ATP显著增加，并作用于嘌呤受体，从而激活Pannexin-1半通道介导的ATP诱导的ATP释放，并形成恶性循环，导致细胞外大量ATP的聚集，引起各种离子的异常流动，从而导致细胞内离子的紊乱及能量的缺失，出现细胞的肿胀及细胞膜的崩溃，从而涉及炎症、免疫系统以及神经系统的多种功能紊乱与疾病。IRS1是胰岛素信号通路中的关键蛋白，参与细胞的生长和代谢。IRS的磷酸化对于胰岛素信号途径的转导很重要，其酪氨酸位点磷酸化可使信号正常传导，但是IRS异常丝氨酸的磷酸化，常导致IRS的降解从而干扰了胰岛素信号的传导，可能是引起胰岛素抵抗的重要的分子机制。敲除IRS1的小鼠出现2型糖尿病的一系列表现：周围组织的胰岛素抵抗，高血糖以及β细胞分泌功能障碍，β细胞数目减少。有报道文献IRS异常丝氨酸磷酸化可介导的背根神经节神经元胰岛素抵抗，并涉及糖尿病周围神经病变的发病机理。大量研究证实，糖尿病高糖高脂毒性时，体内产生过多的自由基不能被清除，即可产生氧化应激增强。本研究实验结果表明糖尿病大鼠空腹血糖和餐后血糖明显升高，血清氧化应激指标丙二醛(MDA)增多，谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)和总一氧化氮合酶(T-NOS)的活性下降，提示糖尿病大鼠颈上交感神经节存在明显的氧化应激。氧化应激可诱导大量促炎因子合成释放，引发炎症反应，从而影响神经细胞的功能，改变神经细胞的微环境，参与或加速糖尿病及其心脏自主神经病变的发生、发展。炎症细胞因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)通路的激活，与包括神经病变在内的糖尿病慢性并发症的发生有关。人类和其他高等真核生物的遗传物质只有极小一部分编码蛋白质，而超过97％的转录产物是功能多样的核糖核酸(RNA)分子，它们无编码蛋白质的功能，统称为非编码核糖核酸(noncodingRNA,ncRNA)。非编码RNA以RNA形式调节基因表达。非编码RNA大致分为2类：“看家RNA”与“调控RNA”。“看家RNA”一般都属于组成型表达，是细胞生存以及基本功能的必需成份。“调控RNA”可分为转录调控子、转录后调控因子、RNA分布调控因子、蛋白功能调节因子等。“调控RNA”包括微小核糖核酸(miRNA)、小干扰核糖核酸(siRNA)、可转录的假基因、反义RNA、核调节子等。调节ncRNA又可以分为小非编码核糖核酸(如miRNA、siRNA)、长于200nt到超过100kb的长非编码核糖核酸(LongnoncodingRNA，LncRNA)。随着越来越多非编码基因及其功能被识别和揭示，人们逐渐认识到lncRNA虽无编码蛋白质的功能，但和蛋白质分子一样重要，甚至是主要的功能性分子，在细胞正常生命活动中发挥重要而广泛的调节作用。研究提示lncRNA表达的变化和影响lncRNA的因素改变均与疾病有关。我们实验室前期SOLiD高通量大鼠转录组数据库筛选和分子生物学验证确定颈部交感神经节存在长非编码核糖核酸NONRATT021972[http://www.noncode.org]，在糖尿病模型大鼠颈上交感神经节长非编码核糖核酸NONRATT021972表达明显增加。本研究通过糖尿病模型大鼠长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰核糖核酸(RNA)抑制其表达，观察长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在糖尿病并发心脏自主神经病变中的作用及其调控机制，这对探寻糖尿病神经病变的发病机理及防治的新靶点具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA的第一个新用途，即长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备治疗糖尿病并发心脏自主神经疾病药物中的应用。本专利技术的第二个目的在于提供长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA的第二个新用途，即长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备治疗交感神经相关疾病药物中的应用。本专利技术的第三个目的在于提供长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA的第三个新用途，即长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备泛连接蛋白-1(Pannexin-1)半通道介导的相关疾病的药物中的应用。本专利技术的第四个目的在于提供长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA的第三个新用途，即长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备胰岛素受体底物-1(IRS1)功能异常介导的相关疾病的药物中的应用。本专利技术通过2型糖尿病大鼠模型，观察长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA处理后2型糖尿病并发心脏自主神经病变中的作用及其调控机制，为长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA用于糖尿病并发并发心脏自主神经病变的预防和治疗提供帮助。本专利技术通过建立2型糖尿病大鼠模型，并对前期筛选出的颈上交感神经节高表达长非编码核糖核酸NONRATT021972进行小干扰RNA，采用基因芯片技术分析长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA处理后引起颈上交感神经节细胞功能相关基因的改变，进一步通过本文档来自技高网...

【技术保护点】
长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备治疗糖尿病并发心脏自主神经疾病的防治药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备治疗糖尿病并发心脏
自主神经疾病的防治药物中的应用。
2.长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备治疗交感神经相关疾
病药物中的应用。
3.长非编码核糖核酸NONRATT021972小干扰RNA在制备泛连接蛋白-1半通道...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁尚栋，徐宏，李桂林，刘双梅，涂桂花，彭海英，高云，虞诗诚，樊波，张春平，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西;36