生物样品中肽的稳定方法技术

本发明专利技术提供生物样品中肽的简便稳定方法及稳定试剂、含肽生物样品的简便保存方法及保存用试剂、以及生物样品中肽的正确测定方法及测定用试剂。通过向生物样品中添加糖类，可以稳定生物样品中的肽、在稳定肽的状态下保存含肽生物样品、正确地测定生物样品中的肽。根据本发明专利技术，可以稳定在临床检查中采集的生物样品中的肽，因此在临床检查中可以正确地测定作为生物样品中标记物的肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及生物样品中肽的简便稳定方法及稳定试剂、含肽生物 样品的简便保存方法及保存用试剂、以及生物样品中肽的正确测定方 法及测定用试剂。
技术介绍
作为溶液中肽的稳定方法，已知将肽在含有乙二胺四乙酸的溶液 中静置，得到难溶性组合物的方法(参照专利文献l)，使血浆、Y-球 蛋白或明胶等蛋白质共存于肽中的方法(参照非专利文献l)。作为肽的冷冻干燥物的稳定方法，已知使葡萄糖酸盐共存的方法(参照专利文献2)。另外，已知蔗糖、麦芽糖、乳糖等糖类作为肽的 冷冻干燥物的稳定剂(参照专利文献3和4)。另外，在免疫测定法中，作为固定在固相中的抗原或抗体的稳定 方法，已知使海藻糖或蔗糖等糖类共存的方法(参照专利文献5和6)。一般而言，生物样品中的肽由于各种因素，例如生物样品中蛋白 质分解酶导致的分解等，因此不稳定。作为使生物样品中的肽稳定的 方法，已知添加蛋白质分解酶的抑制剂、表面活性剂或者防腐剂的方 法。例如，作为生物样品中物质P的稳定方法，已知使作为蛋白质分 解酶抑制剂的氟磷酸二异丙酯、磷酸阿米酮(phosphoramidon)以及杆 菌肽共存的方法(参照非专利文献2)。作为生物样品中物质P的测定，已知对血清进行酸处理后，用丙 酮和乙醚萃取，并且通过酶免疫测定法测定利用反相色谱柱的HPLC纯化后的物质P的方法(参照非专利文献3)，但是该方法操作非常复 杂，并且化学处理条件过于苛刻，因此不能提供正确的测定值。生物体内的肽作为各种标记非常重要，因此需要正确地测定生物 样品中的浓度，但是大多在测定所收集的生物样品的阶段己经减少， 存在不能正确地测定的问题。专利文献l:日本特开平9-208485号公报 专利文献2:日本特开平6-321800号公报 专利文献3:日本特开平5-306235号公报 专利文献4:日本特开平5-170664号公报 专利文献5:日本特表2002-508843号公报 专利文献6:日本特开2003-215127号公报非专利文献1: Experientia，(瑞士) ， 1963年，第19巻，第2 号，p. 72-73非专禾U文献 2 : Biochemical and Biophysical Research Communications,(美国),1984年，第125巻，第2期，p. 728-733非专禾U文献3: Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, (美国)，1998年，第5巻，第3期，p. 303-307
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供生物样品中肽的简便稳定方法及稳定试剂、含 肽生物样品的简便保存方法及保存用试剂、以及生物样品中肽的正确 测定方法及测定用试剂。本专利技术人对生物样品中肽的简便稳定方法进行了潜心研究，结果发现 通过在生物样品中添加糖类，可以使肽稳定，由此完成了本专利技术。艮P， 本专利技术涉及以下 。一种，其中，向含肽生物样品中添加糖类。 —种生物样品的保存方法，其中，向含肽生物样品中添加糖类。—种生物样品中肽的测定方法，其中，使用向含肽生物样品中 添加糖类而得到的样品作为测定用样品。 中任一项所述的方法，其中，生物样品为选自由全血、 血清、血浆、泪液、鼻涕、唾液、尿、大便、脊髓液、细胞、细胞组 织液和细胞膜组成的组中的生物样品。 中任一项所述的方法，其中，糖类为单糖类、二糖类或多糖类。所述的方法，其中，单糖类为六碳糖。所述的方法，其中，六碳糖为甘露糖或半乳糖。所述的方法，其中，二糖类为还原性的二糖类。所述的方法，其中，还原性的二糖类为麦芽糖或乳糖。所述的方法，其中，多糖类为直链淀粉、纤维素、葡聚糖 或淀粉。 中任一项所述的方法，其中，肽为物质P。 —种含肽生物样品中肽的稳定试剂，其中，含有糖类。 —种含肽生物样品的保存用试剂，其中，含有糖类。一种含肽生物样品中肽的测定用试剂，其中，含有糖类。 中任一项所述的试剂，其中，生物样品为选自由全血、 血清、血桨、泪液、鼻涕、唾液、尿、大便、脊髓液、细胞、细胞组 织液和细胞膜组成的组中的生物样品。 中任一项所述的试剂，其中，糖类为单糖类、二糖类 或多糖类。所述的试剂，其中，单糖类为六碳糖。所述的试剂，其中，六碳糖为甘露糖或半乳糖。所述的试剂，其中，二糖类为还原性的二糖类。所述的试剂，其中，还原性的二糖类为麦芽糖或乳糖。所述的试剂，其中，多糖类为直链淀粉、纤维素、葡聚糖 或淀粉。 中任一项所述的试剂，其中，肽为物质P。根据本专利技术，提供生物样品中肽的简便稳定方法及稳定试剂、含肽生 物样品的简便保存方法及保存用试剂、以及生物样品中肽的正确测定 方法及测定用试剂。具体实施方式 (1)肽本专利技术中的肽，如果是存在于生物体内的肽，则可以是任何的肽，另外也包含C末端的羧基酰胺化的物质。作为氨基酸残基数，优选5~100个，更优选5 50个，特别优选10 30个。肽优选按照临床检查 目的而测定的肽，例如，可以列举物质P、降钙素、生长抑素、降钙素 基因相关肽、生长激素释放因子、内皮素、内啡肽、胰高血糖素、胰 高血糖素样肽、促肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素释放因子、加 压素、黄体生成素释放激素、胃泌素、甲状旁腺激素、利钠肽、胰泌 素、胰岛素、骨钙素等，优选物质P。(2) 生物样品作为本专利技术中的生物样品，可以列举例如全血、血清、血浆、泪液、鼻涕、唾液、尿、大便、脊髓液、细胞、细胞组织液和细胞膜 等，优选全血、血清、血浆、泪液、鼻涕。(3) 糖类作为本专利技术中的糖类，如果是可以实现本专利技术的肽稳定方法的糖 类则没有特别限制，可以列举单糖类、二糖类、多糖类等。作为单糖类，可以列举例如五碳糖、六碳糖等，优选六碳糖。 作为五碳糖，可以列举例如阿拉伯糖、木糖、核糖、来苏糖、核酮 糖、木酮糖等。作为六碳糖，可以列举例如半乳糖、葡萄糖、塔罗 糖、甘露糖、山梨糖、塔格糖、果糖、阿洛酮糖等，优选甘露糖和半 乳糖。作为二糖类，可以列举例如还原性的二糖类及非还原性的二糖 类，优选还原性的二糖类。作为还原性的二糖类，可以列举例如麦 芽糖、乳糖等，作为非还原性的二糖类，可以列举例如蔗糖、海藻 糖等。作为多糖类，可以列举例如直链淀粉、纤维素、葡聚糖、淀粉 等，优选纤维素。(4) 、含肽生物样品的保存方法、以及 生物样品中肽的测定方法通过将上述糖类添加到生物样品中，可以稳定该生物样品中的肽。 另外，在通过向生物样品中添加上述糖类而使该生物样品中的肽稳定 的状态下，可以保护该生物样品。另外，通过使用添加有上述糖类的 生物样品作为测定样品，该测定样品中的肽被稳定地保存，因此可以 正确地测定生物样品中的肽。添加的糖类可以是一种也可以是两种以 上。生物样品优选新鲜的生物样品，优选在生物样品采集后立即或者 尽早添加糖类。进一步优选将要放入所采集的生物样品的容器预先放 入糖类。糖类可以以固体的状态直接添加并使其溶解于生物样品中， 但是优选添加糖类溶液的方法。本专利技术的、含肽生物样品的保存方法以 及生物样品中肽的测定方法中，向生物样品中添加的糖类，以在糖类 添加后的生物样品中糖类的浓度使肽能够稳定保存的量添加。使用单 糖类作为糖类时，单糖类添加后的该生物样品中的单糖类的浓度为例如5至600mg/mL，优选10至500mg/mL。使用二糖类作为糖类时，二 糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物样品中肽的稳定方法，其中，向含肽生物样品中添加糖类。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：青山典仁，佐佐木一彦，草田修，
申请(专利权)人：协和梅迪克斯株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]