一种替诺福韦艾拉酚胺的非对映异构体、制备方法及其用途技术

本发明专利技术涉及一种如式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体。本发明专利技术还涉及所述的如式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体的制备方法，及其用于检测替诺福韦艾拉酚胺及其盐的纯度、检测替诺福韦艾拉酚胺及其盐中光学异构体的含量以及替诺福韦艾拉酚胺及其盐的生产或制备中质量控制的用途，本发明专利技术对替诺福韦艾拉酚胺工业化生产中的质量监控和标准研究具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种替诺福韦艾拉酚胺的非对映异构体、制备方法及其用途
本专利技术涉及一种非对映异构体，具体的，本专利技术涉及一种如式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体(后文简称式I非对映异构体)。本专利技术还涉及所述的式I非对映异构体的制备及其用途。
技术介绍
富马酸替诺福韦艾拉酚胺(TenofovirAlafenamideFumarate，TAF)，化学名为9-((R)-2-(((S)-(((S)-1-异丙氧羰基-1-氧丙基-2-yl)氨基)(苯氧基)膦酰基)甲氧基)丙基)-9H-嘌呤-6-胺富马酸盐，是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂。由Gilead公司开发并于2016年获得FDA批准(商品名：Vemlidy，规格为25mg，剂型为片剂)，用于治疗成人HIV感染和乙肝。富马酸替诺福韦艾拉酚胺(TAF)是替诺福韦的前药，在体内水解为替诺福韦，然后通过细胞酶的磷酸化形成二磷酸替诺福韦，也叫链末端终止剂。二磷酸替诺福韦通过与天然底物5-三磷酸脱氧腺苷竞争，并且在与DNA整合后终止DNA链，从而抑制HIV-1反转录酶和HBV反转录酶的活性。已有专利文献报道的富马酸替诺福韦艾拉酚胺的合成主要反应路线如下：以腺嘌呤(a)为原料，与(R)-碳酸丙烯酯缩合得到(R)-9-(2-羟基丙基)腺嘌呤(b)，经过脱氢、取代、水解制得R-替诺福韦(c)，经酯化制得9-((R)-2-((苯氧基氧膦基)甲氧基)丙基)腺嘌呤(d)，经过氯代、与L-丙氨酸异丙酯酰胺化反应、拆分制得替诺福韦艾拉酚胺(e)，最后与富马酸成盐得到富马酸替诺福韦艾拉酚胺。根据替诺福韦艾拉酚胺的分子结构可知，替诺福韦艾拉酚胺存在3个手性位点(C11、C15、P30)，故存在8个手性异构体(其中1个手性异构体即为替诺福韦艾拉酚胺)，其中2个手性位点(C11、C15)是由反应起始物料引入，另一个手性位点P30是在氯代、酰胺化反应过程中产生。替诺福韦艾拉酚胺商业化大生产中用到的市售工业起始原料(R)-碳酸丙烯酯、L-丙氨酸异丙酯可能无法完全避免其手性异构体的存在，而这些起始物料的手性异构体将随着反应的进行被引入原料中，从而产生与C11、C15相关的替诺福韦艾拉酚胺的手性异构体杂质。药物活性物质(API)的纯度是其能否实现商业化大生产的一个关键质量指标。在其生产过程中潜在的起始原料、由起始原料直接引入或衍生的杂质、反应中间体、副产物及降解均通称为活性物质的有关物质，为了患者的用药安全，这些有关物质的含量必须严格控制在一定限度范围内。替诺福韦艾拉酚胺分子结构中具有三个手性中心，理论上存在除替诺福韦艾拉酚胺这一活性结构以外的其他七个手性异构体，这些异构体的化学分子式与替诺福韦艾拉酚胺完全一致，化学性质完全相同，物理性质基本相似，但它们在人体中的药效可能会存在较大差异甚至具有较活性成分更大的毒性。人用药品技术要求国际协调理事会(ICH)要求对包括手性异构体杂质在内的有关物质进行充分的研究和控制，切实使药物活性物质(API)达到安全、有效和质量可控的要求。为了达到这一要求，应该在API的研发和生产过程中遵循QbD这一质量源于设计的研究思路，严格从源头控制产品质量，制定有效的生产过程中的中间控制措施。这就要求在API生产的某个特定阶段须对中间体或成品中的杂质进行检验，比如用高效液相色谱法进行有关物质的检查，无论是采用外标法还是加校正因子的自身对照法均需用到被检测杂质的对照品。到目前为止还未有式I非对映异构体的公开报道，因此有必要开发式I非对映异构体的制备方法，获得该杂质对照品以及该杂质对照品用于检测API中该杂质的检测方法，本专利技术的一个目的是提供式I非对映异构体杂质，本专利技术的另一个目的是提供式I非对映异构体的制备方法，本专利技术的还一个目的是提供式I非对映异构体用于替诺福韦艾拉酚胺生产过程中质控环节中有关物质检查中用作杂质对照品的应用，进而用于替诺福韦艾拉酚胺及其盐的质量控制。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供式I非对映异构体。本专利技术的第二个目的是提供式I非对映异构体的制备方法，包括如下步骤：a)将市售的式1化合物与苯酚缩合反应制得式2中间体；b)式2中间体经氯代、D--丙氨酸异丙酯酰胺化反应，再经柱层析分离得到式I的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体。根据本专利技术的第二个目的式I非对映异构体的制备方法，其特征在于步骤a)中化合物1与苯酚投料摩尔比为1：1.0～3.0，优选1：1.2～1.8，缩合剂为二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺其中的一种，优选二环己基碳二亚胺，投料摩尔比为1：1.0～4.0，优选1：1.5～2.5；反应温度为60～120℃，优选80～100℃；根据本专利技术的第二个目的式I非对映异构体的制备方法，其特征在于步骤b)中氯代试剂选自：氯化亚砜、三氯化磷、五氯化磷其中的一种，优选氯化亚砜，与氯代试剂的投料摩尔比为1：1.0～3.0，优选1：1.5～2.0，氯代反应温度为40～90℃，优选60～80℃；与D-丙氨酸异丙酯的投料摩尔比为1：1.0～5.0，优选1：3.0～4.0；反应温度为-20～10℃，优选-10～0℃。根据本专利技术的第二个目的式I非对映异构体的制备方法，其特征在于步骤b)中柱层析所用的吸附剂为层析用硅胶，其目数为60～100目、100～200目、160～200目和200～300目中的一种。洗脱剂为甲醇与三氯甲烷体系，体积比为1：1～40，优选1：10～30。本专利技术的第三个目的是提供一种替诺福韦艾拉酚胺或其盐中光学异构体含量的检测方法，该方法采用高效液相色谱法(HPLC)中的外标法，以式I非对映异构体为对照品，计算替诺福韦艾拉酚胺或其盐中式I非对映异构体杂质的含量。根据本专利技术的第三个目的，所述的高效液相色谱法的特征为以下(1)～(5)项中的一项或多项：(1)色谱柱为手性柱：Waters，ShieldRP18，4.6×150mm，3.5μm；(2)流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH6.0)-[四氢呋喃-乙腈(7:3)](99:1)，流动相B为0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH6.0)-[四氢呋喃-乙腈(7:3)](50:50)，按表1中的梯度洗脱程序进行洗脱。(3)检测波长为200～300nm，优选260nm；(4)流速为0.5～1.5ml/min，优选1.0ml/min；(5)柱温为25℃～35℃，优选25℃。表1梯度洗脱表时间(min)流动相A(％)流动相B(％)010001100059010878221275251573273071293271<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种如式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体或其盐的制备方法，包括以下步骤：/n

【技术特征摘要】
1.一种如式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体或其盐的制备方法，包括以下步骤：



a)将市售的式1化合物与苯酚缩合反应制得式2中间体；



b)式2中间体经氯代、D-丙氨酸异丙酯酰胺化反应，再经柱层析分离得到式I的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体。





2.如权利要求1中所述的式I的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体或其盐的制备方法，其特征在于步骤a)中化合物1与苯酚投料摩尔比为1：1.0～3.0，优选1：1.2～1.8，缩合剂为二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺其中的一种，优选二环己基碳二亚胺，投料摩尔比为1：1.0～4.0，优选1：1.5～2.5；反应温度为60～120℃，优选80～100℃。


3.如权利要求1中所述的式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体或其盐的制备方法，其特征在于步骤b)中氯代试剂选自：氯化亚砜、三氯化磷、五氯化磷其中的一种，优选氯化亚砜，与氯代试剂的投料摩尔比为1：1.0～3.0，优选1：1.5～2.0，氯代反应温度为40～90℃，优选60～80℃；与D-丙氨酸异丙酯的投料摩尔比为1：1.0～5.0，优选1：3.0～4.0；反应温度为-20～10℃，优选-10～0℃。


4.如权利要求1中所述的式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体或其盐的制备方法，其特征在于步骤b)中柱层析所用的吸附剂为层析用硅胶，其目数为60～100目、100～200目、160～200目和200～300目中的一种；洗脱剂为甲醇与三氯甲烷体系，体积比为1：1～40，优选1：10～30。


5.如权利要求1中所述的式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体或其盐的制备方法，其特征在于具体的反应条件为：
a)将6g式1化合物、苯酚3.9g、乙腈50g、三乙胺4.6g和10g二环己基碳二亚胺加入至250mL反应瓶中，70℃反应18h；加水淬灭后过滤，滤液用乙酸乙酯萃取2～3次；收集水相并用盐酸约调节水溶液至3.0左右，搅拌析晶约2h，过滤，干燥得到棕黄色式2化合物；
b)将3g式2化合物、25g乙腈、2.8g氯化亚砜加入至100mL反应瓶中，加热至85℃反应6h，减压蒸干，加入25g乙腈，保持温度0℃左右下滴加3.2gD-丙氨酸异丙酯溶于20g乙腈的溶液，再加1.8g三乙胺，搅拌反应1h；减压浓缩至干，得油状残余物，用100～200目硅胶层析柱分离，洗脱剂为甲醇/三氯甲烷(V/V)＝1：30，得式I所示的替诺福韦艾拉酚胺非对映异构体...

【专利技术属性】
技术研发人员：安明，常珍，魏俊明，祝江业，况斌，张婵娟，吕宁，郎昌野，蔡琳，刘爱民，
申请(专利权)人：北京华睿鼎信科技有限公司，湖南明瑞制药有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11