本发明专利技术涉及一种可结合PD‑L1的多肽，包括3个互补决定区CDR1‑3，CDR1序列为或包括SEQ ID NO:1‑34所示序列之一，CDR2序列为或包括SEQ ID NO:35‑63所示序列之一，CDR3序列为或包括SEQ ID NO:64‑100所示序列之一。本发明专利技术针对高表达PD‑L1的肿瘤或传染病患者进行纳米抗体药物开发，通过制备PD‑L1蛋白、免疫骆驼、利用噬菌体库展示纳米单抗的平台技术等，筛选到特异性结合PD‑L1的纳米抗体VHH，鉴定了其CDR序列。本发明专利技术为高表达PDL1的肿瘤患者或传染病患者提供潜在的纳米抗体新药。
【技术实现步骤摘要】
可结合PD-L1的多肽及其应用
本专利技术涉及生物医药领域。更特别地，涉及一种可结合PD-L1的多肽，所述的多肽在检测PDL1或治疗肿瘤或传染病中的应用。
技术介绍
肿瘤是指机体局部组织的细胞异常增生而形成的一种新生物，常常表现为局部的肿块。根据肿瘤的性质，一般将其分为良性肿瘤和恶性肿瘤。恶性肿瘤生长较快，易向周围组织扩散，容易发生转移，危及生命。PD-1(Programmeddeath-1)蛋白是T细胞表面的一种重要的免疫抑制跨膜蛋白，为CD28超家族成员。一些肿瘤细胞能够表达PD-L1或者PD-L2与T细胞表面的PD-1结合，使PD-1的胞内结构域的酪氨酸磷酸化，抑制TCR信号通路，从而逃避T细胞的杀伤。因此，理论上可通过使用PDL1抑制剂例如抗PDL1抗体来对抗该免疫逃避机制，从而达到治疗这类肿瘤的目的。1993年，一种来源于骆驼科的新型天然抗体被发现。该抗体天然缺失轻链而只由重链组成，其重链包含两个恒定区(CH2和CH3)、一个铰链区和一个重链可变区(Variableheavychaindomain，VHH，即抗原结合位点)，该重链可变区的相对分子质量约为13KDa，仅为常规抗体的1/10，且分子高度和直径均在纳米级别，是目前可获得的最小的功能性抗体片段，因此又被称为纳米单抗(Nanobody，Nb)。因纳米单抗稳定性高(90℃条件下仍不会降解)、亲和力高、与人源抗体同源性超过80％、毒性和免疫原性均较低等特点，最近纳米单抗被广泛用于免疫诊断试剂盒研发、影像学研发以及针对肿瘤、炎症、传染病和神经系统疾病等领域的抗体药物研发。目前已有一些抗PDL1抗体作为二线药物用于治疗某些肿瘤或者用于检测是否表达PDL1以作为用药参考或预后指标。鉴于目前抗体在患者中应答率较低等原因，因此我们期望通过新的技术手段，获得更为高效稳定的抗PDL1抗体。
技术实现思路
本专利技术通过用抗原免疫骆驼，获取骆驼源纳米单抗及其VHH，用于诊断和治疗PD-L1适应症病人。基于这些研究，本专利技术提供了一种可结合PD-L1的多肽，包括3个互补决定区CDR1-3，CDR1序列为或包括SEQIDNO:1-34所示序列之一，CDR2序列为或包括SEQIDNO:35-63所示序列之一，CDR3序列为或包括SEQIDNO:64-100所示序列之一。在一个具体实施方案中，所述多肽还包括4个框架区FR1-4，所述FR1-4与所述CDR1-3交错排列。例如，可将FR1-4序列设计为如SEQIDNO:101-104所示，但本专利技术的范围不限于此，也可将框架区FR1-4序列人源化为如SEQIDNO:105-108所示。抗体的特异性识别和结合能力主要由CDR区序列决定，FR可根据物种来设计，这是本领域公知的。例如，可设计人源、鼠源或骆驼源的FR区序列来连接上述CDR，从而得到一个可结合人PD1的多肽或结构域。在一个优选实施方案中，所述多肽为单克隆抗体。在一个优选实施方案中，所述多肽为VHH。在一个优选实施方案中，所述多肽为骆驼源的VHH或人源化的VHH。在一个具体实施方案中，所述多肽的CDR序列如下：CDR1的序列为SEQIDNO:1，CDR2的序列为SEQIDNO:35，并且CDR3的序列为SEQIDNO:64。在一个具体实施方案中，所述多肽的CDR序列如下：I)CDR1的序列选自SEQIDNO:9-11；并且II)CDR2的序列为39或43；并且III)CDR3的序列选自SEQIDNO:72-74。优选地，CDR1的序列为SEQIDNO:9，CDR2的序列为SEQIDNO:39，并且CDR3的序列为SEQIDNO:72；或CDR1的序列为SEQIDNO:10，CDR2的序列为SEQIDNO:39，并且CDR3的序列为SEQIDNO:73；或CDR1的序列为SEQIDNO:11，CDR2的序列为SEQIDNO:43，并且CDR3的序列为SEQIDNO:74。在一个具体实施方案中，所述多肽的CDR序列如下：I)CDR1的序列为SEQIDNO:13、14或33；并且II)CDR2的序列为45；并且III)CDR3的序列为SEQIDNO:76或77。优选地，CDR1的序列为SEQIDNO:13，CDR2的序列为SEQIDNO:45，并且CDR3的序列为SEQIDNO:76；或CDR1的序列为SEQIDNO:14，CDR2的序列为SEQIDNO:45，并且CDR3的序列为SEQIDNO:77；或CDR1的序列为SEQIDNO:33，CDR2的序列为SEQIDNO:45，并且CDR3的序列为SEQIDNO:77。在一个具体实施方案中，所述多肽的CDR序列如下：I)CDR1的序列为SEQIDNO:17；并且II)CDR2的序列为48或49；并且III)CDR3的序列选自SEQIDNO:80-82。优选地，CDR1的序列为SEQIDNO:17，CDR2的序列为SEQIDNO:48，并且CDR3的序列为SEQIDNO:80；或CDR1的序列为SEQIDNO:17，CDR2的序列为SEQIDNO:48，并且CDR3的序列为SEQIDNO:82；或CDR1的序列为SEQIDNO:17，CDR2的序列为SEQIDNO:49，并且CDR3的序列为SEQIDNO:81。在一个具体实施方案中，所述多肽的CDR序列如下：I)CDR1的序列选自SEQIDNO:19-26；并且II)CDR2的序列选自51-56；并且III)CDR3的序列选自SEQIDNO:84-93。优选地，CDR1的序列为SEQIDNO:19，CDR2的序列为SEQIDNO:51，并且CDR3的序列为SEQIDNO:84；或CDR1的序列为SEQIDNO:20，CDR2的序列为SEQIDNO:52，并且CDR3的序列为SEQIDNO:85；或CDR1的序列为SEQIDNO:21，CDR2的序列为SEQIDNO:53，并且CDR3的序列为SEQIDNO:86；或CDR1的序列为SEQIDNO:22，CDR2的序列为SEQIDNO:54，并且CDR3的序列为SEQIDNO:87；或CDR1的序列为SEQIDNO:23，CDR2的序列为SEQIDNO:55，并且CDR3的序列为SEQIDNO:88；或CDR1的序列为SEQIDNO:26，CDR2的序列为SEQIDNO:56，并且CDR3的序列为SEQIDNO:93；或CDR1的序列为SEQIDNO:25，CDR2的序列为SEQIDNO:56，并且CDR3的序列为SEQIDNO:91；或CDR1的序列为SEQIDNO:24，CDR2的序列为SEQIDNO:56，并且CDR3的序列为SEQIDNO:89；或CDR1的序列为SEQIDNO:24，CDR2的序列为SEQIDNO:56，并且C本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种可结合PD-L1的多肽，其特征在于，包括3个互补决定区CDR1-3，CDR1序列为或包括SEQ ID NO:1-34所示序列之一，CDR2序列为或包括SEQ ID NO:35-63所示序列之一，CDR3序列为或包括SEQ ID NO:64-100所示序列之一。/n
【技术特征摘要】
1.一种可结合PD-L1的多肽，其特征在于，包括3个互补决定区CDR1-3，CDR1序列为或包括SEQIDNO:1-34所示序列之一，CDR2序列为或包括SEQIDNO:35-63所示序列之一，CDR3序列为或包括SEQIDNO:64-100所示序列之一。
2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽还包括4个框架区FR1-4，所述FR1-4与所述CDR1-3按顺序交错排列。
3.根据权利要求2所述的多肽，其特征在于，所述多肽为单克隆抗体。
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【专利技术属性】
技术研发人员：吴稚伟，吴喜林，李彦磊，
申请(专利权)人：源道隆苏州医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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