一种双特异性抗体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种双特异性抗体的制备方法。本发明专利技术使用化学偶联的方法将两种不同的单克隆抗体CD3单抗、CLL1单抗通过化学偶联剂连接，最终合成双特异性抗体。该方法能有效地将CD3单抗与CLL1单抗制成CD3‑CLL1双抗，且合成率在95％以上。

A preparation method of bispecific antibody

【技术实现步骤摘要】
一种双特异性抗体的制备方法
本专利技术涉及生物制药领域，特别涉及CD3和CLL1单克隆抗体制备双特异性抗体的方法。
技术介绍
双特异性抗体(bispecificantibody，BsAb)是新型的第二代抗体，拥有两种特异性抗原结合位点，可以同时与靶细胞和功能细胞(一般为T细胞)相互作用，进而增强对靶细胞的杀伤作用，是一种疗效远超普通抗体的新型靶向药物。BsAb以三功能抗体(Triomab)和双特异性T细胞衔接器(BispeificTcellEngager，BiTE)为代表，与普通抗体相比具备更强特异性、引导T细胞杀伤肿瘤和降低脱靶毒性等显著优势，目前已经在肿瘤和炎症等相关疾病中应用。数据显示，BsAb杀伤肿瘤效果是普通抗体的100-1,000倍；用量最低可降为普通抗体的1/2,000，在药效和价格上比一般抗体更具竞争优势。CD3分子表达在人全部T细胞上，是鉴定T细胞的重要标记。CD3分了是由γ、δ、ε和η等几种多肽链组成，并与T细胞识别抗原受体形成TCR/CD3复合物。其中TCR特异性识别抗原，而TCR与抗原结合后所产生的活化信号是由C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双特异性抗体的制备方法，使用化学偶联的方法将两种单克隆抗体通过化学偶联剂连接，合成双特异性抗体，其特征在于，所述两种单克隆抗体分别为CD3和CLL1。/n

【技术特征摘要】
1.一种双特异性抗体的制备方法，使用化学偶联的方法将两种单克隆抗体通过化学偶联剂连接，合成双特异性抗体，其特征在于，所述两种单克隆抗体分别为CD3和CLL1。


2.如权利要求1所述的双特异性抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方式包括如下步骤：
(a)用1×PBS分别置换两种单抗3-4次至终浓度为10g/L；
(b)取等体积的两种单抗，分别加入还原剂置于37℃孵育3-5h；
(c)将还原后的两种抗体混合；
(d)加入偶联剂放置室温过夜后收集；
(e)再次置换后保存于-20℃冰箱。


3.如权利要求2所述的双特异性抗体的制备方法，其特征在于，所述还原剂为三(2-羧乙基)膦。


4.如权利要求2...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦金燕，郑琛，王言超，武翔，庞春滔，
申请(专利权)人：上海泰因生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31