制备葡糖苷酸药物-接头及其中间体的方法技术

本发明专利技术提供了用于制备具有β‑葡糖苷酸可裂解单元的药物‑接头及其中间体的改进方法。

Preparation of glucosidic acid drug connector and its intermediates

The invention provides an improved method for preparing a drug \u2011 connector with a \u03b2 - glucosidic acid cleavable unit and an intermediate thereof.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制备葡糖苷酸药物-接头及其中间体的方法相关申请的交叉引用不适用关于在联邦政府资助的研究与开发下完成的专利技术权利的声明不适用参考为表格或在光盘上提交的计算机程序列表附件形式的“序列表”不适用
技术介绍
人们对于使用抗体药物偶联物(ADC)形式的单克隆抗体(mAb)用于将细胞毒性药物靶向递送至癌细胞有着极大的兴趣。通过细胞毒性药物与抗体偶联(通常通过接头)设计ADC涉及考虑多种因素。这些因素包括：用于结合细胞毒性药物的化学基团的特性和位置，药物释放的机制，提供细胞毒性药物释放的结构要素(如果有的话)，以及释放的游离药物的结构修饰(如果有的话)。此外，如果在ADC化合物内化后释放细胞毒性药物，则结构要素和药物释放的机制必须与偶联物化合物的细胞内运输一致。包括ADC的配体-药物偶联物(LDC)包含基于β-葡糖苷酸的接头，其含有如本文所定义的葡糖苷酸单元，已成功用于实现靶向递送治疗剂，例如抗癌药物(参见例如，国际公开号WO2007/011968)。基于葡糖苷酸的接头将药物单元连接到配体单元，其中葡糖苷酸单元包含糖苷酶识别位点，其在某些方面可被具有β-葡糖醛酸糖苷酶活性的酶切割，从而释放游离药物。基于葡糖苷酸的接头改善LDC的溶解度并显示出足够的血清稳定性，以提供偶联药物靶向递送至靶细胞。文献报道的基于β-葡糖苷酸的接头的合成(Jeffrey,S,C,等人,“单克隆抗体药物偶联物β-葡糖苷酸接头的开发和性质(Developmentandpropertiesofβ-glucuronidelinkersformonoclonalantibodydrugconjugates)”Bioconj.Chem.17(3):831-840)涉及产生一系列含有受保护的β-葡糖苷酸碳水化合物部分的中间体。通过常规碱水解方法对该碳水化合物部分进行全面去保护可产生高达20-25％的杂质，该杂质已被鉴定为葡糖苷酸单元的碳水化合物部分内的β-消除的产物。这反过来导致材料损失，并且由此损失产生的杂质可能难以在不进一步降低产量的情况下去除。因此，需要改进的制备基于β-葡糖苷酸的药物接头化合物的方法，其具有更高的收率和减少量的污染杂质。
技术实现思路
本专利技术尤其提供了制备含有葡糖苷酸单元的药物接头化合物及其中间体的改进方法。专利技术详述概述本专利技术部分基于以下令人惊讶的发现：在合成某些药物接头化合物中葡糖苷酸单元的去保护方法可对所需产物的纯度和收率产生深远影响。具体地，本专利技术人已经发现，在包含醇的溶剂中使用烷氧基卤化镁以除去葡糖苷酸单元的碳水化合物部分中的酰基保护基团，而不是常规使用的试剂如LiOH，能够显著减少不希望的β-消除的杂质(从约20％降低至低于约5％)。在某些方面，烷氧基镁卤化物试剂通过使Gringard试剂与含醇溶剂接触而原位制备。因此，本专利技术提供了用于制备包含葡糖苷酸单元的某些药物接头的改进方法。定义如本文所述，并且除非另外说明或上下文暗示，本文所用的术语具有以下定义的含义。除非另有禁忌或暗示，例如，通过在这些定义和整个说明书中包括相互排斥的要素或选项，术语“一”和“一个”表示一个或多个，术语“或”表示和/或，如果上下文允许的话。因此，在本说明书和所附权利要求书中所用的单数形式“一个”，“一种”和“该”、“所述”包含复数指示物，除非上下文中有明确的另外说明。在本公开的多个位置，例如，在任意公开的实施方案或在权利要求中，参考“包括”一个或多个具体组分、元素或步骤的方法、组合物或化合物。本专利技术实施方案还具体包括那些化合物、组合物或方法，它们是那些特定的组分、元素或步骤或由那些特定的组分、元素或步骤组成，或者基本上由那些特定的组分、元素或步骤组成。术语“包括”与术语“包含”可互换使用，并且被陈述为等同术语。“包含”组分或步骤的所公开的组合物，装置，制造制品或方法是开放式的，并且它们包括或读取那些组合物或方法以及另外的组分或步骤。然而，这些术语不包括会破坏所公开的组合物，装置，制品或其预期目的的方法的功能的未列举元素。类似地，所公开的“由(组分或步骤)组成”的组合物，装置，制造制品或方法是封闭式的，并且它们不包括或读取具有可观量的另外组分或附加步骤的那些组合物或方法。此外，术语“基本上由......组成”允许包含对所公开的组合物，装置，制造制品或方法用于其指定目的而言的功能性没有实质性影响或仅有无关紧要的影响的未列举的元素，如本文进一步定义。本文所用章节标题仅用于组织目的，而不应理解为限制所述主题。除非另有说明，否则采用质谱，NMR，HPLC，蛋白质化学，生物化学，重组DNA技术和药理学的常规方法。当与提供用于描述化合物或组合物的具体性质的数值或数值范围联用时，本文所用的“约”表示该数值或数值范围可偏差到本领域普通技术人员认为合理的程度同时仍然描述特定性质。合理的偏差包括在测量，确定或推导出特定属性时使用的仪器的准确度或精度范围内的偏差。具体地，在本文中使用时，术语“约”表示数值或数值范围可相对列出的数值或数值范围变化10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％或0.01％，一般是10％至0.5％，更一般是5％至1％，同时仍然描述具体性质。本文所用的术语“基本上保留”和类似术语是指化合物或组合物或其部分的性质、特征、功能或活性没有可检测地改变或在确定相关结构的化合物或组合物或部分的相同活性、特征或性质的实验误差内。本文所用的“基本上保留”和类似术语是指一种化合物或组合物或其部分的物理性质或特征的测量值，其在统计学上不同于相关结构的另一种化合物或组合物或部分的相同物理性质的确定，但是这种差异并不在用于评价活性或特性的合适生物测试系统中代表生物活性或药理学特性的统计学意显著或统计学意义的差异。因此，短语“基本上保留”是指化合物或组合物的物理性质或特性对与该物理性质或特征明确相关的生理化学或药理学性质或生物学活性的影响。本文所用的“可忽略”或“可忽略的”是低于标准HPLC分析的定量水平的杂质的量，并且如果存在，表示其污染的组合物的约0.5％至约0.1w/w％或者低于定量限。根据上下文，这些术语可替代地意味着在测量值或结果之间没有观察到统计学上显著的差异，或者在用于获得那些值的仪器的实验误差内。通过实验确定的参数值的可忽略的差异并不意味着以该参数为特征的杂质以可忽略的量存在。如本文所用的“主要含有”、“主要具有”和类似术语是指混合物的主要组分。当混合物是两种组分时，则主要组分占混合物重量的50％以上。对于三种或更多种组分的混合物，主要组分是在混合物中以最大量存在的组分，并且可以或可以不代表混合物质量的大部分。本文使用的术语“吸电子基团”是指通过感应和/或通过共振(无论哪个更主要)从与其键连的原子吸去电子密度的官能团或电负性原子(即，官能团或原子可通过共振供电子，但可以总体上通过感应吸电子)，并且往往使阴离子或富电子部分稳定化。吸电子作用一般通过感应传递(虽然是衰减形式)至与键连原子连接的其他原子，该键连原子已经通过吸电子基团(EWG)变得缺电子，由此影响更远反应中心的反应性。吸电子基团(EWG)通常选自：-C(＝O),-CN,-NO2,-CX3,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于制备式VID的药物接头化合物中间体或其盐的方法：

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.03.24 US 62/476,6051.一种用于制备式VID的药物接头化合物中间体或其盐的方法：其中：Q是任选保护的官能团，优选羟基、巯基或胺官能团；A是任选的连接物单元；B是任选的支化单元，当下标t大于1时存在，当下标t为1时不存在；S*是自分解型单元，具体具有式XV或式XVI的结构：其中波浪线表示与A的连接点，#表示与葡糖醛酸部分的糖苷氧原子的连接点；D是含有DNA小沟结合剂、DNA损伤剂或DNA复制抑制剂的药物单元，其具有包括杂原子T*的官能团，其中T*是氧、硫或任选取代的氮，具体地D具有能够在式XV中形成氨基甲酸酯官能团或在式XVI中形成亚甲基氨基甲酸酯官能团的胺官能团；R、R1和R2独立地是氢、任选取代的C1-C6烷基，任选取代的C6-14芳基、或任选取代的C-连接的C3-C8杂芳基，或R和R1以及它们所连接的氮和碳原子一起形成氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基或高哌啶基部分，特别是吡咯烷基或哌啶基部分，且R2是氢；R7是C1-C8烷基或任选取代的苯基，因此–OR7提供了作为合适的羧酸保护基的酯官能团；和下标t为0、1、2、3或4，所述方法包括以下步骤：(c)使式VIC化合物或其盐与格氏试剂或烷氧基卤化镁在合适的含醇溶剂中接触，其中式VIC化合物具有以下结构：其中：R6中的每一个独立地为C1-C8烷基或任选取代的苯基，因此R6C(＝O)-提供作为合适的羟基保护基的酯官能团；并且其余可变基团如先前所定义，其中接触的所述格氏试剂或烷氧基卤化镁选择性地去除羟基保护基，由此获得式VID的化合物或其盐。2.一种用于制备式VIIE的药物接头中间体化合物或其盐的方法：其中：A是任选的连接物单元；B是任选的支化单元，当下标t大于1时存在，当下标t为1时不存在；S*是自分解型单元，具体具有式XIII或式XIV的结构：其中波浪线表示与A的连接点，#表示与葡糖醛酸部分的糖苷氧原子的连接点；和D是含有DNA小沟结合剂、DNA损伤剂或DNA复制抑制剂的药物单元，其具有包括杂原子T*的官能团，其中T*是氧、硫或任选取代的氮，具体地D具有能够在式XIII中形成氨基甲酸酯官能团或在式XIV中形成亚甲基氨基甲酸酯官能团的胺官能团；所述方法包括以下步骤：(c)使式VIIC化合物或其盐与格氏试剂或烷氧基卤化镁在合适的含醇溶剂中接触，其中式VIIC化合物具有以下结构：其中：S*,D,A,B和下标t如先前针对权利要求2的式VIIE所定义的那样；Q’是适当保护的氨基；R6和R7各自独立地是C1-C8烷基或任选取代的苯基，因此R6C(＝O)-提供作为合适的羟基保护基的酯官能团，–OR7提供作为合适的羧酸保护基的酯官能团；并且其余可变基团如先前所定义，其中接触的所述格氏试剂或烷氧基卤化镁选择性地除去羟基保护基，得到式VIID化合物：或其盐，其中可变基团如先前式VIIIC所定义；以及(d)使式VIID化合物与第一脱保护剂接触，其中接触的所述第一脱保护剂除去胺和羧酸保护基，由此得到式VIIE化合物或其盐。3.一种用于制备式IE的药物接头中间体化合物或其盐的方法：其中：A是任选的连接物单元；S’不存在或是–NRN-C(R1)(R2)-，其中RN、R1和R2独立地是氢、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C6-C14芳基、或任选取代的C-连接的C3-C8杂芳基，或者RN和R1与它们连接的氮和碳原子一起形成氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基或高哌啶基部分，且R2是氢；D是包含DNA小沟结合剂、DNA损伤剂或DNA复制抑制剂的药物单元，其具有官能团，具体是羟基、巯基或胺官能团，所述官能团与S'形成共价键；T*是来自所述官能团的杂原子，具体是氧、硫或任选取代的氮；Z1是第一合适的胺保护基；和R7是C1-C8烷基或任选取代的苯基，因此–OR7提供了作为合适的羧酸保护基的酯官能团；和所述方法包括以下步骤：(c)使式IC化合物或其盐与格氏试剂或烷氧基卤化镁在合适的含醇溶剂中接触，其中式IC化合物具有以下结构：其中：Z1是第一合适的胺保护基；和R6和R7各自独立地是C1-C8烷基或任选取代的苯基，因此R6C(＝O)-提供作为合适的羟基保护基的酯官能团，–OR7提供作为合适的羧酸保护基的酯官能团；并且其余可变基团如先前式IE所定义，其中接触的所述格氏试剂或烷氧基卤化镁选择性地除去羟基保护基，得到式ID化合物：或其盐，其中可变基团如先前式IC所定义；以及(d)使式ID化合物与第一脱保护剂接触，其中接触的所述第一脱保护剂除去胺和羧酸保护基，由此得到式IE化合物或其盐。4.如权利要求1、2或3所述的方法，其中，格氏试剂具有式RgMgX，烷氧基卤化镁具有式RgOMgX，其中Rg是C1-C5烷基，X是I、Br或Cl。5.如权利要求4所述的方法，其中，格氏试剂是MeMgI或MeMgCl。6.如权利要求5所述的方法，其中，烷氧基镁卤化物是MeOMgI或MeOMgCl。7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述含醇溶剂包括C1-C4醇。8.如权利要求7所述的方法，其中，所述含醇溶剂还包含THF。9.如权利要求8所述的方法，其中，所述溶剂是甲醇和THF的1:1(v/v)混合物。10.如权利要求2所述的方法，其中，所述用于除去Z1的第一脱保护剂是LiOH的含水溶液。11.如实施方案2-10中任一项所述的方法，其中Z1具有下式：12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中，所述格氏试剂或烷氧基镁卤化物接触和所述脱保护剂接触以除去Z1在一个釜中顺序进行。13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中，D是PBD药物单元。14.如权利要求13所述的方法，其中，所述PBD药物单元具有式X的结构：或其盐，其中：虚线表示互变异构双键；R2”是式XI：其中波浪线表示与式X结构共价连接的位点；Ar是任选取代的C5-7亚芳基；Xa是来自用于与接头单元或其前体共价连接的反应性或可活化基团，其中Xa选自：-O-，-S-，-C(O)O-，-C(O)-，-NHC(O)-，–N(RN)-，其中RN是H或C1-C4烷基，和(C2H4O)mCH3，其中下标m是1、2或3；以及：(i)Q1是单键；且Q2是单键或-Z-(CH2)n-，其中Z选自单键、O、S和NH；下标n为1、2或3，或者(ii)Q1是-CH＝CH-，且Q2是单键；和R2’是任选取代的C1-C4烷基或C5-10芳基，任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：卤素、硝基、氰基、C1-C6醚、C1-C7烷基、C3-C7杂环基和双-氧基-C1-C3亚烷基，具体地被一个这样的取代基取代，其中虚线表示结合到R2’的单键，或R2’是任选取代的C1-C4亚烯基，其中虚线表示与R2’的双键；R6”和R9”独立地选自：H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR’、硝基、Me3Sn和卤素；R7”选自：H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR’、硝基、Me3Sn和卤素；以及R和R’独立地选自：任选取代的的C1-C12烷基，任选取代的C3-C20杂环基和任选取代的C5-C20芳基；以及：(a)R10”是H，R11”是OH或ORA，其中RA是C1-C4烷基，或(b)R10”和R11”在它们所键合的氮和碳原子之间形成氮-碳双键，或(c)R10”是H，R11”是SOzM，其中下标z为2或3，M...

【专利技术属性】
技术研发人员：茅云宇，P·莫奎斯特，A·乔德里，W·道布尔迪，
申请(专利权)人：西雅图基因公司，
类型：发明
国别省市：美国,US