重组多肽及其组合物及方法技术

本发明专利技术提供一种重组多肽、包含该重组多肽的同型二聚体和异型二聚体蛋白、编码该重组多肽的核酸分子，以及包含该核酸分子的载体及宿主细胞。本发明专利技术也提供包含该重组多肽的组合物，以及制备、使用该重组多肽的方法。

Recombinant polypeptide and its composition and method

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】重组多肽及其组合物及方法
电子送件的序列表参照电子送件的序列表内容(Name:3902.001PC01_SeqListing_ST25.txt,Size:134,451bytes；andDateofCreation:December21,2017)已整合入本公开的内文中以供参照。现有技术骨是一种高度刚性的组织，构成脊椎骨骼的一部分并具有衍生自其广泛基质结构的独特机械性质。动物终其一生中，骨组织会不断地更新。骨生成及更新的过程由特定的细胞进行。成骨作用(osteogenesis，骨生成或骨成长)是由成骨细胞(osteoblasts，骨生成细胞)进行。骨再成型作用(Boneremodeling)是由称为破骨细胞(osteoclasts)的骨吸收细胞与骨生成的成骨细胞间相互作用所完成。由于这些过程是由特定的活细胞进行，所以化学(例如：药物和/或激素)、物理及物理化学的变化可影响骨组织的质量、数量及形状。各种生长因子(例如：PDGF)及细胞激素会参与骨生成的过程。因此，辨识出可在预定位点诱导骨生成的生理可接受的化学介质(例如：激素、药物、生长因子及细胞激素)是相当有价值的。然而，为了成功地将化学介质作为治疗工具，需克服几个障碍。障碍之一包括开发具有骨诱导(osteoinductive)活性的重组多肽。例如：重组人类血小板衍生的生长因子-BB中的骨诱导活性尚未得到证实。另一障碍是在化学介质中骨诱导的变异性。例如：去矿物质骨基质(demineralizedbonematrix，DBM)是一种化学介质，是一种衍生自加工骨的骨诱导同种异体移植物。市场上以DBM为基础的产品越来越多，但是在不同产品及同一产品不同批号之间已发现骨诱导的变异性。因此，需要一种化学介质展现一致的骨诱导活性，例如：重组多肽及相关组合物。
技术实现思路
本公开涉及一种重组多肽，其包含：第一域(domain)，其选自由SEQIDNO:35及SEQIDNO:39所组成的群组；第二域，其选自由SEQIDNO:47及SEQIDNO:49所组成的群组；及第三域，其选自由SEQIDNO:57及SEQIDNO:61所组成的群组；其中该第一域择一融合于该第二域的C端或N端，该第三域融合于该第二域或同时融合该第一域及该第二域，且其中该重组多肽具有诱导碱性磷酸酶活性的能力。在一个实施方案中，其中该第一域相较于该第二域位于接近该重组多肽的C端、该第三域相较于该第二域位于接近该重组多肽的N端、或该第一域相较于该第三域位于接近该重组多肽的N端。在一个实施方案中，该重组多肽的该第二域包含在该第二域的第23个氨基酸和该第二域的第27个氨基酸之间的一个分子内二硫键(intramoleculardisulfidebond)。在一个实施方案中，该重组多肽的该第三域包含：第氨基酸序列PKACCVPTE(SEQIDNO:356)及第二氨基酸序列GCGCR(SEQIDNO:357)，且其中该第三域包含在该第一和该第二氨基酸序列之间的二个分子内二硫键。在一个实施方案中，该重组多肽包含在该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子内二硫键，以及在该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子内二硫键。在一个实施方案中，该重组多肽包含在该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子内二硫键，以及在该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子内二硫键。在一个实施方案中，该重组多肽选自由SEQIDNO:260、SEQIDNO:268、SEQIDNO:276、SEQIDNO:284、SEQIDNO:292、SEQIDNO:300、SEQIDNO:308、SEQIDNO:316、SEQIDNO:324、SEQIDNO:332、SEQIDNO:340及SEQIDNO:348所组成的群组。本公开涉及一种同型二聚体蛋白，其包含任一如上所述的二个相同的重组多肽，其中该同型二聚体蛋白包含在该二个相同重组多肽的第一域之间的一个分子间二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白包含在该二个相同重组多肽的其一的该第一域中的第15个氨基酸和另一重组多肽的该第一域中的第15个氨基酸之间的一个分子间二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白的该二个相同重组多肽的其一或全部的该第二域包含一分子内二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白的每一该重组多肽的该第三域包含：第氨基酸序列PKACCVPTE(SEQIDNO:356)及第二氨基酸序列GCGCR(SEQIDNO:357)，且其中该同型二聚体蛋白包含在该二个相同重组多肽的其一的该第三域中的该第氨基酸序列和该另一重组多肽的该第三域中的该第二氨基酸序列之间的二个分子间二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白包含在该二个相同重组多肽的其一的该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该另一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子间二硫键，以及在该二个相同重组多肽的其一的该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该另一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子间二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白包含在该二个相同重组多肽的其一的该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该另一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子间二硫键，以及在该二个相同重组多肽的其一的该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该另一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子间二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白的每一该重组多肽的该第三域包含：第氨基酸序列PKACCVPTE(SEQIDNO：356)和第二氨基酸序列GCGCR(SEQIDNO：357)，且该同型二聚体蛋白包含：在该二个相同重组多肽的其一的该第三域中的该第氨基酸序列和该其一重组多肽的该第三域中的该第二氨基酸序列之间的二个分子内二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白包含：在该其一重组多肽的该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该其一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子内二硫键，以及在该其一重组多肽的该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该其一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子内二硫键。在一个实施方案中，该同型二聚体蛋白包含：在该其一重组多肽的该第氨基酸序列的第5个氨基酸和该其一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子内二硫键，以及在该其一重组多肽的该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该其一重组多肽的该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子内二硫键。本公开涉及一种异型二聚体蛋白，其包含任一如上所述的重组多肽的二个相异的重组多肽，其中该异型二聚体蛋白包含：在该二个相异重组多肽的第一域之间的一个分子间二硫键。在一个实施方案中，该异型二聚体蛋白包含在该二个相异重组多肽的其一的该第一域中的第15个氨基酸和另一重组多肽的该第一域中的第15个氨基酸之间的一个分子间二硫键。在一个实施方案中，该异型二聚体蛋白的该二个相异重组多肽的其一或全部的该第二域包含一分子内二硫键。本公开涉及一种重组多肽，其包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自由SEQIDNO:2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组多肽，其包含：第一域，其选自由SEQ ID NO:35及SEQ ID NO:39所组成的群组；第二域，其选自由SEQ ID NO:47及SEQ ID NO:49所组成的群组；及第三域，其选自由SEQ ID NO:57及SEQ ID NO:61所组成的群组；其中该第一域择一融合于该第二域的C端或N端，该第三域融合于该第二域或同时融合该第一域及该第二域，且其中该重组多肽具有诱导碱性磷酸酶活性的能力。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.12.30 US 62/440,663;2017.09.25 US 62/562,5151.一种重组多肽，其包含：第一域，其选自由SEQIDNO:35及SEQIDNO:39所组成的群组；第二域，其选自由SEQIDNO:47及SEQIDNO:49所组成的群组；及第三域，其选自由SEQIDNO:57及SEQIDNO:61所组成的群组；其中该第一域择一融合于该第二域的C端或N端，该第三域融合于该第二域或同时融合该第一域及该第二域，且其中该重组多肽具有诱导碱性磷酸酶活性的能力。2.如权利要求1的重组多肽，其中该第一域相较于该第二域位于接近该重组多肽的C端、该第三域相较于该第二域位于接近该重组多肽的N端、或该第一域相较于该第三域位于接近该重组多肽的N端。3.如权利要求1的重组多肽，其中该第二域包含一分子内二硫键。4.如权利要求1的重组多肽，其中该第二域包含在该第二域的第23个氨基酸和该第二域的第27个氨基酸之间的一个分子内二硫键。5.如权利要求1的重组多肽，其中该第三域包含：第氨基酸序列PKACCVPTE(SEQIDNO:356)及第二氨基酸序列GCGCR(SEQIDNO:357)，且其中该第三域包含在该第一和该第二氨基酸序列之间的二个分子内二硫键。6.如权利要求5的重组多肽，其中该重组多肽包含：(a)在该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子内二硫键，以及在该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子内二硫键；或(b)在该第氨基酸序列的该第5个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第2个氨基酸之间的第一分子内二硫键，以及在该第氨基酸序列的该第4个氨基酸和该第二氨基酸序列的该第4个氨基酸之间的第二分子内二硫键。7.一种重组多肽，其包含一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自由SEQIDNO:260、SEQIDNO:268、SEQIDNO:276、SEQIDNO:284、SEQIDNO:292、SEQIDNO:300、SEQIDNO:308、SEQIDNO:316、SEQIDNO:324、SEQIDNO:332、SEQIDNO:340及SEQIDNO:348所组成的群组，其中该重组多肽具有诱导碱性磷酸酶活性的能力。8.一种同型二聚体蛋白，其包含如权利要求1的二个相同的重组多肽，其中该同型二聚体蛋白包含在该二个重组多肽的第一域之间的分子间二硫键。9.如权利要求8的同型二聚体蛋白，其中该同型二聚体蛋白包含在该二个重组多肽其一的该第一域中的第...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙大伟，许佩雯，陈芊蓓，
申请(专利权)人：博晟生医股份有限公司，奥斯堤欧制药有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71