用促滤泡素抑制素多肽治疗病症的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及在给药的组织(例如注射的组织)中具有作用而非全身作用的促滤泡素抑制素‑Fc融合蛋白。Fc结构域导致促滤泡素抑制素‑Fc融合蛋白二聚化，并提供延长的组织滞留。本说明书包括包含由FST288、FST291 (一种非天然的截短促滤泡素抑制素)或FST315组成的人促滤泡素抑制素多肽和人IgGl或IgG2 Fc结构域的融合蛋白。

Methods and compositions for treatment of pathologies using a polypeptide of a follicle stimulating hormone

The present invention relates to the administration of the organization (e.g. injection organization) has the effect rather than the systemic effects of follistatin fusion protein Fc. The Fc domain leads to a follistatin Fc fusion protein dimerization, and provide extended tissue retention. This manual includes FST288, FST291 (a non natural truncated follistatin) or FST315 composed of human follistatin polypeptide and IgGl or IgG2 Fc domain fusion protein.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用促滤泡素抑制素多肽治疗病症的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请要求2014年6月4日提交的美国临时申请顺序号62/007,908的优先权的权益。前述申请的说明书以其整体结合到本文中。专利技术背景转化生长因子-β(TGF-β)超家族含有多种具有共同的序列元件和结构基序的生长因子。已知这些蛋白质对脊椎动物和无脊椎动物两者中的多种细胞类型发挥生物作用。超家族的成员在胚胎发育期间在图式形成和组织特化中执行重要功能，并可影响多种分化过程，包括脂肪形成、肌生成、软骨发生、心脏发生、血细胞生成、神经发生和上皮细胞分化。该家族被分成2个总分支：BMP/GDF和TGF-β/激活素/BMP10分支，其成员具有不同的、通常互补的作用。通过操控TGF-β家族成员的活性，常常可在生物体中引起重要的生理变化。例如，皮埃蒙特牛和比利时蓝牛品种在GDF8(亦称肌生成抑制蛋白(myostatin))基因中携带功能失去突变，引起肌肉质量显著增加。Grobet等,Nat.Genet.1997,17(1):71-4。此外，在人类中，无活性的GDF8等位基因与肌肉质量增加有关，并且据报告与异常强度有关。Schuelke等,NEnglJMed2004,350:2682-8。肌肉、骨、软骨和其它组织的改变可通过激发(agonizing)或拮抗由适合的TGF-β家族成员介导的信号传导来实现。然而，由于该家族的成员可影响一种以上的组织，因此在一些患者护理情况下，需要以局部而非全身的方式实现该家族成员的治疗性抑制。因此，存在对起TGF-β信号传导的强效调节剂的作用并且适于局部给药的药剂的需要。专利技术概述某些方面，本公开内容提供促滤泡素抑制素多肽，其经设计在其中给予所述促滤泡素抑制素多肽的组织的附近抑制促滤泡素抑制素配体(例如激活素A、激活素B、GDF8和GDF11)，同时对患者几乎没有或没有全身作用。本文所述促滤泡素抑制素多肽包括包含是SEQIDNO:1-4、7-16和26-43任一个的至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列的多肽。任选促滤泡素抑制素多肽经设计以二聚化或形成更高级次的多聚体。这可通过使促滤泡素抑制素多肽的促滤泡素抑制素序列与赋予二聚化或多聚化的结构域融合来实现。这类结构域的实例是免疫球蛋白的恒定结构域，包括例如免疫球蛋白的Fc部分。任选促滤泡素抑制素部分与异源部分直接连接，或可使用间插序列，例如接头。接头的实例是序列TGGG。任选促滤泡素抑制素多肽可按人促滤泡素抑制素-288具有肝素结合活性的方式，显示肝素结合活性。或者，促滤泡素抑制素可按人促滤泡素抑制素-315的方式，具有被掩蔽的肝素结合结构域。某些方面，本公开内容提供治疗上优化的促滤泡素抑制素多肽，其包含来自与天然人IgG1相比ADCC或CDC活性降低的人IgG的免疫球蛋白恒定结构域的一部分。实例包括IgG2、IgG3、IgG4、杂合IgG2/4和IgG1、IgG2、IgG3和IgG4的变体。某些方面，本公开内容提供促滤泡素抑制素的最佳活性形式，其包含SEQIDNO:15或16的氨基酸序列或基本由其组成或由其组成，特别在二聚融合蛋白(例如促滤泡素抑制素-Fc蛋白)的情况下，提供比天然FST(288)和FST(315)形式优越的蛋白质品质和活性。在某些方面，本公开内容提供包含第一氨基酸序列和第二氨基酸序列的多肽，其中第一氨基酸序列由选自SEQIDNO：15和16的氨基酸序列组成，且其中第二氨基酸序列包含免疫球蛋白的恒定结构域。任选存在位于第一氨基酸序列和第二氨基酸序列之间的接头多肽。任选接头多肽包含序列TGGG或基本由其组成或由其组成。任选第二氨基酸序列包含IgG免疫球蛋白的恒定结构域、基本由其组成或由其组成。任选第二氨基酸序列包含与人IgG1相比ADCC活性降低的IgG免疫球蛋白的恒定结构域、基本由其组成或由其组成。任选第二氨基酸序列包含与人IgG1相比CDC活性降低的IgG免疫球蛋白的恒定结构域、基本由其组成或由其组成。任选第二氨基酸序列包含选自IgG1、IgG2和IgG4的IgG免疫球蛋白的恒定结构域、基本由其组成或由其组成。任选第二氨基酸序列包含免疫球蛋白(例如IgG免疫球蛋白)的Fc部分或由其组成，所述免疫球蛋白可为与人IgG1相比ADCC、CDC或两者降低的免疫球蛋白，其实例包括IgG2、IgG4和IgG2/4杂合体或IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的任一个的各种突变。在某些方面，本公开内容提供促滤泡素抑制素多肽，其包含与选自SEQIDNO:38-43的序列有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列、基本由其组成或由其组成。在某些方面，本公开内容提供促滤泡素抑制素多肽，其包含与选自SEQIDNO:26-28和32-34的序列有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列、基本由其组成或由其组成。在某些方面，本公开内容提供促滤泡素抑制素多肽，其包含与选自SEQIDNO:29-31和35-37的序列有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列、基本由其组成或由其组成。合乎需要的促滤泡素抑制素多肽可以小于1nM、100pM、50pM或10pM的KD与选自以下的一种或多种配体结合：肌生成抑制蛋白、GDF-11、激活素A和激活素B。在某些方面，上述多肽的任一个可以是二聚体，包括异二聚体或同二聚体，或更高级次多聚体。上述多肽的任一个可掺入药物制剂中。在某些方面，本公开内容提供编码本文所述任何促滤泡素抑制素多肽的核酸和包含所述核酸的细胞，所述细胞可用来产生促滤泡素抑制素多肽。在某些方面，本公开内容提供通过将促滤泡素抑制素多肽直接给予组织以治疗所述组织或器官的方法。例如，本公开内容提供增加患者的肌肉大小或强度的方法，所述方法包括通过肌内给药途径将有效量的促滤泡素抑制素多肽给予有需要的患者的目标肌肉，其中肌肉大小或强度的增加发生在目标肌肉中，且其中促滤泡素抑制素多肽对肌肉大小或强度不具有实质性的全身作用。目标肌肉可能受损、衰弱或有缺陷，正如在包括以下的多种肌肉病症中的情况：肌营养不良(例如杜兴肌营养不良(Duchennemusculardystrophy)、贝克尔肌营养不良(Becker’smusculardystrophy)和面肩肱型肌营养不良(fascioscapulohumeralmusculardystrophy))、炎症性肌肉病症(例如包涵体肌炎)、肌肉损伤或创伤、肌肉废用(如在长期卧床休息或肢体制动之后会发生的一样)和由于衰老、癌症或不同类型的慢性疾病的结果肌肉萎缩或弱化。所述方法还可适用于健康的但需要增加目标肌肉的肌肉大小或强度的肌肉。另外，将促滤泡素抑制素多肽给予肌肉可引起体脂肪的总体降低，因此可用于治疗肥胖症或其它与过量体脂肪有关的疾病，任选可将促滤泡素抑制素直接给予脂肪组织。可将促滤泡素抑制素多肽给予唯一一个目标肌肉或给予一个以上目标肌肉。所述方法和促滤泡素抑制素多肽可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其包含SEQ ID NO: 43的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.04 US 62/0079081.一种多肽，其包含SEQIDNO:43的氨基酸序列。2.权利要求1的多肽，其中所述多肽包含由SEQIDNO:43组成的氨基酸序列。3.权利要求1或2的多肽，其中SEQIDNO:43最后的(羧基端)赖氨酸(K)不存在。4.一种多肽，其包含SEQIDNO:42的氨基酸序列。5.权利要求4的多肽，其中所述多肽包含由SEQIDNO:42组成的氨基酸序列。6.权利要求4或5的多肽，其中SEQIDNO:42最后的(羧基端)赖氨酸(K)不存在。7.一种同二聚体，其包含权利要求1-6中任一项的两种多肽。8.一种药物制剂，其包含权利要求1-6中任一项的多肽。9.一种药物制剂，其包含权利要求7的同二聚体。10.一种核酸，其编码权利要求1-6中任一项的多肽。11.一种细胞，其包含权利要求10的核酸。12.一种治疗受累于肌肉病症的肌肉的方法，所述方法包括将权利要求1-6中任一项的多肽或权利要求7的同二聚体给予肌肉。13.权利要求12的方法，其中所述肌肉病症是肌营养不良。14.一种治疗受累于肌肉病症的肌肉的方法，所述方法包括将权利要求8或9的药物制剂给予肌肉。15.权利要求14的方法，其中所述肌肉病症是肌营养不良。16.一种包含第一氨基酸序列和第二氨基酸序列的多肽，其中第一氨基酸序列由选自SEQIDNO:15和16的氨基酸序列组成，且其中第二氨基酸序列包含免疫球蛋白的恒定结构域。17.权利要求16的多肽，其中接头多肽位于第一氨基酸序列和第二氨基酸序列之间。18.权利要求17的多肽，其中所述接头多肽包含序列TGGG。19.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含IgG免疫球蛋白的恒定结构域。20.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含与人IgG1相比ADCC活性降低的IgG免疫球蛋白的恒定结构域。21.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含与人IgG1相比CDC活性降低的IgG免疫球蛋白的恒定结构域。22.权利要求16-21中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含选自IgG1、IgG2和IgG4的IgG免疫球蛋白的恒定结构域。23.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含免疫球蛋白的Fc部分。24.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含IgG免疫球蛋白的Fc部分。25.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含与人IgG1相比ADCC活性降低的IgG免疫球蛋白的Fc部分。26.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含与人IgG1相比CDC活性降低的IgG免疫球蛋白的Fc部分。27.权利要求16-18中任一项的多肽，其中所述第二氨基酸序列包含选自IgG1、IgG2、IgG4和IgG2/4杂合体的IgG免疫球蛋白的Fc部分。28.一种多肽，其包含与选自SEQIDNO:38-43的序列有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。29.一种多肽，其包含与选自SEQIDNO:26-28和32-34的序列有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。30.一种多肽，其包含与选自SEQIDNO:29-31和35-37的序列有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。31.一种二聚体，其包含权利要求16-30中任一项的两种多肽。32.一种同二聚体，其包含权利要求16-30中任一项的两种多肽。33.一种药物制剂，其包含权利要求16-30中任一项的二聚体。34.一种核酸，其包含编码权利要求16-30中任一项的多肽的核酸序列。35.一种细胞，其包含权利要求34的核酸。36.一种增加患者的肌肉大小或强度的方法，所述方法包括通过肌内给药途径将有效量的促滤泡素抑制素多肽给予有需要的患者的目标肌肉，其中肌肉大小或强度的增加发生在目标肌肉中，且其中促滤泡素抑制素多肽对肌肉大小或强度不具有实质性的全身作用。37.权利要求36的方法，其中所述目标肌肉受损、衰弱或有缺陷。38.权利要求36的方法，其中所述目标肌肉是健康的，但需要增加目标肌肉的肌肉大小或强度。39.权利要求36-38中任一项的方法，其中将所述促滤泡素抑制素多肽给予仅一个目标肌肉。40.权利要求36-38中任一项的方法，其中将所述促滤泡素抑制素多肽给予一个以上目标肌肉。41.权利要求36-40中任一项的方法，其中目标肌肉对侧的肌肉不会实质地增加大小或强度。42.权利要求36-41中任一项的方法，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：R库马，A格林伯格，
申请(专利权)人：阿塞勒隆制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US