一种复合益菌肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种复合益菌肽及其制备方法和应用，它由菌酶复配发酵剂添加到豆粕中发酵而成，所述菌酶复配发酵剂由四种益生菌、四种蛋白酶和碳源复合而成，四种益生菌分别为丁酸梭菌、短小芽孢杆菌S3、植物乳杆菌和布拉酵母菌；四种蛋白酶分别为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和多肽蛋白酶。并提供了复合益菌肽的具体制备方法和在用于制备乳仔猪饲料添加剂中的应用。所述复合益菌肽产品，富含多种益生菌，可有效降解抗原蛋白产生多肽、氨基酸等小分子物质，并在发酵过程中产生了多种益生性有机酸、生物素等风味性、拮抗性物质，不仅增加了适口性、安全性，且显著提高了豆粕利用率和饲料营养价值，还可显著降低乳仔猪腹泻率。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种复合益菌肽及其制备方法和应用，它由菌酶复配发酵剂添加到豆粕中发酵而成，所述菌酶复配发酵剂由四种益生菌、四种蛋白酶和碳源复合而成，四种益生菌分别为丁酸梭菌、短小芽孢杆菌S3、植物乳杆菌和布拉酵母菌；四种蛋白酶分别为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和多肽蛋白酶。并提供了复合益菌肽的具体制备方法和在用于制备乳仔猪饲料添加剂中的应用。所述复合益菌肽产品，富含多种益生菌，可有效降解抗原蛋白产生多肽、氨基酸等小分子物质，并在发酵过程中产生了多种益生性有机酸、生物素等风味性、拮抗性物质，不仅增加了适口性、安全性，且显著提高了豆粕利用率和饲料营养价值，还可显著降低乳仔猪腹泻率。 CGMCC No. 9161 2014.05.13【专利说明】一种复合益菌肽及其制备方法和应用
本专利技术属于生物酶解与发酵领域，涉及肽的制备方法，具体涉及一种复合益菌肽 及其制备方法和应用。
技术介绍
豆柏作为一种重要的植物蛋白源，有着重要的应用和研究价值。但大豆中的蛋白 酶抑制剂、植物凝集素、大豆抗原蛋白、脲酶、植酸、大豆低聚糖等抗营养物质的存在，不但 极大地阻碍动物对营养成分的消化、吸收和利用，而且严重地危害动物的健康和生长发育。 大豆抗原蛋白是大豆加工制品中残留量最高，抗营养作用最强的一种大豆抗营养因子，可 引起婴幼儿以及小鼠、仔猪、犊牛等动物发生肠道及其它器官的过敏反应，并导致肠黏膜损 伤，小肠形态结构发生损伤性变化，进而引起腹泻、生产性能下降甚至死亡，是世界公认的 八大食物过敏原之一。大豆抗原蛋白主要包括Iis大豆球蛋白和7S0-大豆伴球蛋白，两 者占大?蛋白含量的70 %左右。 目前的豆柏的生物处理方法中，微生物发酵法与酶处理法已经较为普遍，本专利技术 将四种菌、四种酶与碳源结合起来，将豆柏作为一种培养微生物的基质，促进四种益生菌大 量繁殖，并在生物处理过程中，有效降解并利用豆柏大分子抗原蛋白，几乎将其完全降解为 多肽、氨基酸等小分子物质，易于动物吸收，并产生了多种益生性有机酸等风味性物质，生 物素、酪酸梭菌素等拮抗性物质，在增加了适口性、安全性的同时，还显著提高了豆柏的蛋 白利用率和营养价值，并可降低乳仔猪腹泻率，具备了一定的功能性。
技术实现思路
本专利技术提供了一种复合益菌肽及其制备方法和应用，所述复合益菌肽可以满足乳 仔猪对豆柏原料的特殊营养需求。 为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现： -种复合益菌肽，它由菌酶复配发酵剂添加到豆柏中发酵而成，所述菌酶复配发 酵剂由四种益生菌、四种蛋白酶和碳源复合而成，所述四种益生菌分别为丁酸梭菌、短小 芽孢杆菌S3、植物乳杆菌和布拉酵母菌；所述四种蛋白酶分别为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、 碱性蛋白酶和多肽蛋白酶；所述短小芽孢杆菌S3的分类命名为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus)，其保藏编号为：CGMCC No. 9161。 对上述技术方案的进一步改进：所述四种益生菌在菌酶复配发酵剂中的含菌量分 别是：丁酸梭菌：不低于IX l〇6CFU/g ;短小芽孢杆菌S3 :不低于IX 106CFU/g ;植物乳杆菌： 不低于IX l〇6CFU/g ;布拉酵母菌：不低于IX 105CFU/g。 对上述技术方案的进一步改进：所述四种蛋白酶在菌酶复配发酵剂中的含量分别 是：酸性蛋白酶：不低于500U/g ;中性蛋白酶：不低于1000U/g ;碱性蛋白酶：不低于4000U/ g ;多肽蛋白酶：不低于4500U/g。 对上述技术方案的进一步改进：所述碳源为占菌酶复配发酵剂质量9% -10%的 葡萄糖。 本专利技术还提供了所述的复合益菌肽的制备方法，它包括如下步骤： (1)在豆柏中添加占豆柏质量50-60%的水形成发酵底料，接种占豆柏质量10% 的所述菌酶复配发酵剂，混合均匀形成发酵物料； (2)将所述发酵物料储存于锡箔密封袋内，于200°C封口，置于37°C恒温培养箱 内，发酵72h ; (3)发酵完成后，低温烘干，粉碎过筛，形成所述复合益菌肽。 对上述技术方案的进一步改进：所述步骤（3)中发酵物料于40°C低温烘干，粉碎 过60目筛。 本专利技术进一步提供了所述的复合益菌肽在制备用于饲喂乳仔猪的饲料添加剂中 的应用。 所述复合益菌肽以占饲料质量比为5-15%的比例添加到饲料中，所述复合益菌肽 拮抗猪粪大肠菌群。 与现有技术相比，本专利技术方法的优点和技术效果是： 1、本专利技术所用的菌酶复配发酵剂，是在生物酶解发酵理论基础上，结合多年实践 经验，针对生产常用豆柏原料特点，自行配制的专一性发酵剂；采用所述的专一性菌酶复配 发酵剂，生物处理豆柏来制备复合益菌肽产品。 2、本专利技术所制备的复合益菌肽产品，富含多种益生菌，包括丁酸梭菌，短小芽孢杆 菌S3,植物乳杆菌，布拉酵母菌。在其酶解发酵过程中，可有效降解豆柏中抗原蛋白产生多 肽、氨基酸等小分子物质，并产生多种益生性有机酸、生物素等风味性、拮抗性物质，不仅增 加了适口性、安全性，且芽孢类益生菌具有很好的保存稳定性。 3、本专利技术所制备的复合益菌肽产品，可显著提高豆柏利用率和饲料营养价值，具 有猪粪大肠菌群抗性，还可显著降低仔猪腹泻率。 4、本专利技术所涉及菌、酶等，都属于饲料添加剂范畴，来源广泛，安全易得，成本低 廉。 5、本专利技术所述方法步骤简单合理，操作快捷，具有良好的工业化实施前景。 结合附图阅读本专利技术的【具体实施方式】后，本专利技术的其他优点将变得更加清楚。 【专利附图】【附图说明】 图1表明1号豆柏经生物处理后制备的复合益菌肽-益生菌菌量组成与半年稳定 性。 图2表明2号豆柏经生物处理后制备的复合益菌肽-益生菌菌量组成与半年稳定 性。 图3表明豆柏原料经生物处理后制备为复合益菌肽的抗原蛋白SDS-PAGE电泳图。 图4表明豆柏原料经生物处理后制备为复合益菌肽富含益生性有机酸。 图5表明豆柏原料经生物处理后制备为复合益菌肽可拮抗猪粪大肠菌群。 图6表明豆柏原料经生物处理后制备为复合益菌肽可显著降低乳仔猪腹泻率。 图7为短小芽孢杆菌S3的生产工艺流程图。 【具体实施方式】 为更好地了解该复合益菌肽产品的功能，下面结合附图和具体实施例对本专利技术的 产品引用特点做进一步详细的说明。 实施例1 一、短小芽孢杆菌S3的分离筛选 2013年5月至2013年9月，从胶州沿海多处采集虾养殖区域的水样、底泥、对虾肠 道粪便。底泥、对虾肠道粪便样品分别于无菌生理盐水中10倍稀释，充分研磨，取上清为样 品液；水样直接作为样品液；样品液分别接种于2216E液体培养基中30°C富集培养48h后 稀释，涂布于2216E平板中进行菌株的分离、纯化，共筛选出26株纯菌。 已纯化单菌株采用平板点种法筛选颉颃菌。以副溶血弧菌为指示菌，将副溶血弧 菌接种于2216E液体培养基中培养18h，稀释制备成105-106CFU/mL的菌悬液，取0. ImL涂布 2216E平板，备用。用无菌牙签挑取待筛选的菌株，点接于含菌平板中，25°C恒温培养24h， 观察点接菌落周围是否出现明显的抑菌圈或覆盖区。 对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合益菌肽，其特征在于它由菌酶复配发酵剂添加到豆粕中发酵而成，所述菌酶复配发酵剂由四种益生菌、四种蛋白酶和碳源复合而成，所述四种益生菌分别为丁酸梭菌、短小芽孢杆菌S3、植物乳杆菌和布拉酵母菌；所述四种蛋白酶分别为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和多肽蛋白酶；所述短小芽孢杆菌S3的分类命名为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus），其保藏编号为:CGMCC No. 9161。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李慧芬，张大伟，马成，
申请(专利权)人：青岛尚德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37