一种魏氏梭菌抑制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种魏氏梭菌抑制剂及其制备方法和应用。所述魏氏梭菌抑制剂包括8％

【技术实现步骤摘要】
一种魏氏梭菌抑制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一种魏氏梭菌抑制剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]魏氏梭菌是产气荚膜梭菌的简称，是畜禽坏死性肠炎、红痢、胀气猝死等症状的主要致病菌。该菌广泛存在于动物肠道中，正常情况下数量较少，不会致病，但当某些诱发因素存在时，魏氏梭菌会快速增殖，并分泌毒素，导致肠道损伤、腹泻、死亡等问题。近年来，魏氏梭菌感染导致的疾病发生率增加较多，分析主要原因：一是饲料端禁抗，导致细菌性疾病的防控压力增加；二是由于原料价格高涨，饲料中非常规原料的广泛使用、霉菌毒素等给肠道健康带来威胁，增加了魏氏梭菌爆发的风险。因此，研究一种科学、成分天然、有效的魏氏梭菌抑制剂非常重要。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供了一种魏氏梭菌抑制剂及其制备方法和应用。所述魏氏梭菌抑制剂枯草芽孢杆菌S2及其代谢产物为主要成分，对魏氏梭菌具有显著的抑制效果，且在猪、蛋鸡和种鸭等不同养殖动物上均可预防与治疗魏氏梭菌的感染。
[0004]为实现上述专利技术目的，本专利技术通过下述技术方案予以实现：
[0005]本专利技术提供了一种魏氏梭菌抑制剂，其包括枯草芽孢杆菌活菌、枯草芽孢杆菌代谢产物和可溶性载体。
[0006]进一步的，所述魏氏梭菌抑制剂中，枯草芽孢杆菌活菌的质量比为8％
‑
10％，枯草芽孢杆菌代谢产物的质量比为80％
‑
90％，其余为可溶性载体。
[0007]进一步的，所述枯草芽孢杆菌活菌和枯草芽孢杆菌代谢产物均采用保藏编号为CGMCC NO.19824的枯草芽孢杆菌S2制备获得的。
[0008]本专利技术还提供了所述的魏氏梭菌抑制剂的制备方法，包括以下步骤为：
[0009](1)将活化的枯草芽孢杆菌接种到活菌发酵培养基中，于36℃～38℃发酵28h
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32h，得到枯草芽孢杆菌活菌；
[0010](2)将活化的枯草芽孢杆菌接种到装有代谢产物发酵培养基的种子罐中，于28℃～32℃，培养16h
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20h，再以4
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6％的接种量接种到装有代谢产物发酵培养基的发酵罐中，于28℃～32℃发酵20h
‑
24h，产物喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌代谢产物；
[0011](3)将枯草芽孢杆菌活菌、枯草芽孢杆菌代谢产物、可溶性载体混合均匀，得到魏氏梭菌抑制剂。
[0012]进一步的，所述活菌发酵培养基的配方为：豆饼粉30g/L
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35g/L，酵母粉20g/L
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25g/L，葡萄糖20g/L
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25g/L，氯化钠1.5g/L
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2g/L，消泡剂1g/L
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2g/L，中性蛋白酶8g/L
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10g/L，硫酸锰0.2g/L
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0.3g/L。
[0013]进一步的，所述代谢产物发酵培养基的配方为：豆饼粉10g/L
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15g/L，酵母粉20g/
L
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25g/L，鱼粉25g/L
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30g/L，葡萄糖15g/L
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20g/L，氯化钠8g/L
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12g/L，氯化钾1g/L
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2g/L，消泡剂1g/L
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2g/L，中性蛋白酶10g/L
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15g/L。
[0014]本专利技术还提供了所述的魏氏梭菌抑制剂在制备动物病原菌抑菌剂中的应用。
[0015]进一步的，所述动物病原菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和魏氏梭菌。
[0016]本专利技术还提供了所述的魏氏梭菌抑制剂在制备防治魏氏梭菌感染的禽畜动物饲料添加剂中的应用。
[0017]进一步的，所述魏氏梭菌抑制剂的添加量为250g/t～500g/t。
[0018]进一步的，所述禽畜动物为母猪、蛋鸡、种鸭。
[0019]进一步的，所述魏氏梭菌抑制剂用于养殖母猪时，添加量为500g/t饲料，饲喂时间为12d。
[0020]进一步的，所述魏氏梭菌抑制剂用于养殖蛋鸡时，添加量为500g/t饲料，饲喂时间为40d。
[0021]进一步的，所述魏氏梭菌抑制剂用于养殖种鸭时，添加量为250g/t水，饮用时间为12d。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的优点和有益效果是：
[0023]本专利技术利用枯草芽孢杆菌S2及其发酵产物制备了一种能够显著抑制魏氏梭菌的抑制剂，枯草芽孢杆菌S2具有很好的絮凝能力和很好的产吲哚乙酸的能力，因此，抑制剂抑制魏氏梭菌的效果优于亚甲基水杨酸杆菌肽和恩拉霉素，并且在养殖动物—猪、蛋鸡和种鸭上均表现出立竿见影的效果，不仅能够防治动物体内的魏氏梭菌，还能够提高动物的产量、改善粪便形态，降低日死淘数，有利于动物的生长，减轻魏氏梭菌对畜禽动物的危害，避免为养殖户造成较大的经济损失，具有较高的推广和应用价值。
[0024]除此之外，本专利技术还提供了一种畜禽粪便魏氏梭菌快速检测方法，其简化了魏氏梭菌检测步骤，仅通过粪便采集器畜禽养殖现场取样稀释，生化反应管显色反应，对比标准显色卡，就能够轻松的检测畜禽的魏氏梭菌感染情况。
附图说明
[0025]图1为魏氏梭菌抑制剂和抗生素类产品对大肠杆菌的MIC对比；
[0026]图2为魏氏梭菌抑制剂和抗生素类产品对金黄色葡萄球菌的MIC对比；
[0027]图3为魏氏梭菌抑制剂和抗生素类产品对沙门氏菌的MIC对比；
[0028]图4为魏氏梭菌抑制剂和抗生素类产品对魏氏梭菌的96孔板对比，其中AB列为亚甲基水杨酸杆菌肽，CD列为恩拉霉素，EF列为魏氏梭菌抑制剂，GH为对照组；
[0029]图5为魏氏梭菌抑制剂和抗生素类产品对魏氏梭菌的MIC对比；
[0030]图6为试验前(A)后(B)妊娠母猪的魏氏梭菌感染检测；
[0031]图7为不同阶段检测鸡舍中魏氏梭菌感染情况，其中A为第一次检测，B为第二次检测，C为第三次检测；
[0032]图8为在种鸭上使用魏氏梭菌抑制剂前后魏氏梭菌检测情况，其中前后检测为相同反应时间的对比结果；
[0033]图9为在种鸭上使用魏氏梭菌抑制剂前后产蛋率的变化(箭头处为抑制剂添加时间)；
[0034]图10为在种鸭上使用魏氏梭菌抑制剂前后日死淘数的变化(箭头处为抑制剂添加时间)；
[0035]图11为在种鸭上使用魏氏梭菌抑制剂前后粪便的变化。
具体实施方式
[0036]结合以下具体实例对本专利技术的技术方案作进一步详细的说明。
[0037]下述实施例中，如无特殊说明，所使用的试验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从生物或化学试剂公司购买。
[0038]下述实施例中所需培养基的配方如下：
[0039]1、LB液体培养基：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，蒸馏水1L。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种魏氏梭菌抑制剂，其特征在于，其包括枯草芽孢杆菌活菌、枯草芽孢杆菌代谢产物和可溶性载体。2.根据权利要求1所述的魏氏梭菌抑制剂，其特征在于，所述魏氏梭菌抑制剂中，枯草芽孢杆菌活菌的质量比为8％
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10％，枯草芽孢杆菌代谢产物的质量比为80％
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90％，其余为可溶性载体。3.根据权利要求1所述的魏氏梭菌抑制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌活菌和枯草芽孢杆菌代谢产物均采用保藏编号为CGMCC NO.19824的枯草芽孢杆菌S2制备获得的。4.权利要求1
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3任一项所述的魏氏梭菌抑制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤为：(1)将活化的枯草芽孢杆菌接种到活菌发酵培养基中，于36℃～38℃发酵28h
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32h，得到枯草芽孢杆菌活菌；(2)将活化的枯草芽孢杆菌接种到装有代谢产物发酵培养基的种子罐中，于28℃～32℃，培养16h
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20h，再以4
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6％的接种量接种到装有代谢产物发酵培养基的发酵罐中，于28℃～32℃发酵20h
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24h，产物喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌代谢产物；(3)将枯草芽孢杆菌活菌、枯草芽孢杆菌代谢产物、可溶性载体混合均匀，得到魏氏梭菌抑制剂。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述活菌发酵培养基的配方为：豆饼粉30g/L
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35g/L，酵母粉20g/L

【专利技术属性】
技术研发人员：袁江，吕伟，冯海霞，张建，刘宝同，马艳艳，张大伟，张宗国，
申请(专利权)人：青岛尚德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：