一种红法夫酵母液体复合制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种红法夫酵母液体复合制剂及其制备方法和应用。所述红法夫酵母液体复合制剂由97.97%红法夫酵母发酵液、1%杜仲提取物、1%葡萄糖氧化酶、0.3

【技术实现步骤摘要】
一种红法夫酵母液体复合制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物及其应用领域，具体涉及一种红法夫酵母液体复合制剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]红法夫酵母（Phaffia rhodozyma）属于半知菌亚门、隐球酵母科、红法夫酵母属，其不仅富含蛋白质、氨基酸、维生素等多种营养物质，还富含胡萝卜素和虾青素等天然色素，能显著提高动物免疫力、净化环境和减少抗生素用量，是生态养殖的优良添加剂，具有很高的应用价值。
[0003]在海参、中华绒螯蟹等幼体育苗中可直接投喂红法夫酵母作为开口或幼体培育的饵料，主流产品分为发酵后的液体剂型和将发酵液喷雾干燥后的粉剂，虽然已在水产养殖中使用多年，但一直面临一些产品问题：粉剂产品遇水成团、融水慢、现场使用时操作效率低的问题。虽然液体产品更受养殖者的青睐，但遇到易变质的问题，一般需要低温储藏，需要在养殖区域配备冰箱或者恒温储藏，给养殖者带来很多不便。
[0004]因此，在常温下能稳定储存的液体酵母产品成为一种迫切需求。

技术实现思路

[0005]为了解决和克服现有技术中的问题和不足，本专利技术提供了一种红法夫酵母液体复合制剂及其制备方法和应用，该复合制剂具有稳定性好、常温货架期长，能提高养水产殖动物幼体的活力和抗应激能力。
[0006]为实现上述专利技术目的，本专利技术通过下述技术方案予以实现：本专利技术提供一种红法夫酵母液体复合制剂，所述红法夫酵母液体复合制剂包括红法夫酵母发酵液、杜仲提取物、葡萄糖氧化酶、海藻酸钠。
>[0007]进一步的，所述红法夫酵母液体复合制剂中红法夫酵母发酵液的质量占比为95%~98%，杜仲提取物的质量占比为1%~2%，葡萄糖氧化酶的质量占比为1%~2%，海藻酸钠的质量占比为0.1
‰
~0.3
‰
。
[0008]优选的，所述红法夫酵母液体复合制剂由97.97%红法夫酵母发酵液、1%杜仲提取物、1%葡萄糖氧化酶、0.3
‰
海藻酸钠组成。
[0009]进一步的，所述红法夫酵母发酵液由保藏编号为CGMCC NO.22504的红法夫酵母GOY1经培养发酵获得，其活菌含量≥8
×
10
10 CFU/mL。
[0010]进一步的，所述葡萄糖氧化酶的酶活含量为≥10000U/g。
[0011]本专利技术还提供了所述的红法夫酵母液体复合制剂的制备方法，步骤具体为：将红法夫酵母接种到液体培养基中，培养至对数生长期，按8%~10%的接种量转接到二级生产罐中，29℃~31℃，通气量1.9 vvm ~2.1 vvm，转速220 rpm/min ~260 rpm/min继续培养40h~48h，获得红法夫酵母发酵液后，停止发酵后加热至45℃，保温20min后停止加热，冷却至≤30℃，依次加入杜仲提取物、葡萄糖氧化酶、海藻酸钠，混合均匀，得到红法夫酵母液体复合
制剂。
[0012]本专利技术还提供了所述的红法夫酵母液体复合制剂在用于制备促进水产动物生长及提高抗应激能力的饲料添加剂中的应用。
[0013]进一步的，所述红法夫酵母液体复合制剂的用量为投喂饵料重量的10%~15%。
[0014]进一步的，将所述红法夫酵母液体复合制剂与水产动物的投喂饵料混合后，按照水产动物的正常投喂规律投喂5天~30天，从而到达明显促进水产动物生长，提高水产动物的抗应激能力，减少动物体内弧菌数量的作用。
[0015]进一步的，所述水产动物包括对虾、海参或河蟹的幼体。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的优点和技术效果是：由于常规的液体酵母产品常温下保存易变质、分层、产气，本专利技术通过优化生产工艺和添加葡萄糖氧化酶，克服了以上技术难题，获得了常温存放高稳定的红法夫酵母液体复合制剂，该产品长时间放置不分层、不变质。其中，还通过添加杜仲提取物，在不影响产品稳定性前提下，提升了复合制剂在调理消化道和保护肝胰腺方面的作用。所以，本专利技术制备的红法夫酵母液体复合制剂不仅存放稳定，且能够明显促进水产动物生长，提高水产动物的抗应激能力，减少动物体内弧菌数量，且成本低，制备方法简单，具有广阔的使用前景。
附图说明
[0017]图1为红法夫酵母在培养基上的菌落、菌体镜检图。
[0018]图2为添加不同比例黄原胶对红法夫酵母发酵液分层的影响。
[0019]图3为添加不同比例瓜尔豆胶对红法夫酵母发酵液分层的影响。
[0020]图4为添加不同比例羧甲基纤维素钠对红法夫酵母发酵液分层的影响。
[0021]图5为添加不同比例海藻酸钠对红法夫酵母发酵液分层的影响。
[0022]图6为添加1%杜仲提取物对红法夫酵母发酵液颜色外观影响。
[0023]图7为添加2%杜仲提取物对红法夫酵母发酵液颜色外观影响。
[0024]图8为添加不同比例葡萄糖氧化酶对红法夫酵母发酵液颜色外观影响。
[0025]图9为添加所有成分后试验前后外观对比。
[0026]图10添加红法夫酵母复合制剂对对虾幼苗体长的影响。
[0027]图11为添加红法夫酵母复合制剂对对虾幼苗离水死亡率的影响。
[0028]图12为添加红法夫酵母复合制剂对对虾幼苗淡水应激死亡率的影响。
[0029]图13为添加红法夫酵母复合制剂对对虾幼苗肝胰腺和肠道弧菌数量的影响。
具体实施方式
[0030]结合以下具体实例对本专利技术的技术方案作进一步详细的说明。
[0031]实施例1：红法夫酵母GOY1的获取及发酵液的制备1、红法夫酵母GOY1的筛选、分离和鉴定取青岛胶州海参养殖水，梯度稀释后涂布于YPD培养基上，多次分离纯化后得到单菌落，命名为GOY1，保存。
[0032]菌株GOY1的菌落形态如图1a所示，菌落大而湿润，隆起，橙色至红色，表面光滑无褶皱；其菌体如图1b均为不规则椭圆形，互相独立分散。
[0033]以红法夫酵母GOY1的DNA为模板，使用18S rRNA通用引物进行扩增，扩增片段进行序列测定，将得到的菌株GOY1的18S rDNA测序结果与GenBank中的序列进行比对分析，结果显示菌株GOY1与Phaffia rhodozyma同源性最高，因此确定该菌株GOY1为红法夫酵母。
[0034]将筛选到的菌株GOY1进行菌种保藏，所述红法夫酵母GOY1的保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2021年05月11日；红法夫酵母Phaffia rhodozyma的保藏编号为CGMCC No.22504。
[0035]2、红法夫酵母GOY1发酵液的制备将红法夫酵母GOY1活菌斜面接种到种子培养基（蔗糖36g/L、硫酸铵3.2g/L、酵母提取物1.7g/L、CaCl
2 0.1g/L、KH2PO
4 2g/L、MgSO
4 0.5g/L、Na2Cl 0.1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种红法夫酵母液体复合制剂，其特征在于，所述红法夫酵母液体复合制剂包括红法夫酵母发酵液、杜仲提取物、葡萄糖氧化酶、海藻酸钠。2.根据权利要求1所述的红法夫酵母液体复合制剂，其特征在于，所述红法夫酵母液体复合制剂中红法夫酵母发酵液的质量占比为95%~98%，杜仲提取物的质量占比为1%~2%，葡萄糖氧化酶的质量占比为1%~2%，海藻酸钠的质量占比为0.1
‰
~0.3
‰
。3.根据权利要求1所述的红法夫酵母液体复合制剂，其特征在于，所述红法夫酵母发酵液由保藏编号为CGMCC NO.22504的红法夫酵母GOY1经培养发酵获得，其活菌含量≥8
×
10
10 CFU/mL。4.根据权利要求1所述的红法夫酵母液体复合制剂，其特征在于，所述葡萄糖氧化酶的酶活含量为≥10000U/g。5.权利要求1
‑
4任一项所述的红法夫酵母液体复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤具体为：将红法夫酵母接种到液体培养基中，培...

【专利技术属性】
技术研发人员：张婷婷，梁晶晶，张洪玲，孟凡奎，张磊，房志远，王金龙，张宗国，
申请(专利权)人：青岛尚德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：