一种葵花籽粕复合多肽的制备方法技术

本发明专利技术提供一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，包括如下步骤：原料处理：将原料葵花籽粕粉碎后，按质量比为1:9～11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为3.5～4.5，在沸水中加热搅拌3～8min，离心分离，收集沉淀物；一次酶解：按质量比为1:9～11的料液比加入湿热处理物和蒸馏水，调pH值，添加2～4wt％外切蛋白酶，55～65℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，冷却；二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5～3.5wt％内切蛋白酶，50～60℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；浓缩：将酶解液浓缩至原体积的1/3；喷雾干燥。本发明专利技术通过控制酶解过程中的加碱量，利用双酶组合分步水解，工艺简单，易于操作，生产成本低，可大大减少多肽产物灰分含量，无需脱盐处理即可制得符合国标的多肽。

【技术实现步骤摘要】
一种葵花籽粕复合多肽的制备方法
本专利技术涉及油料饼粕深加工
，具体涉及一种葵花籽粕复合多肽的制备方法。
技术介绍
向日葵是世界四大油料作物(大豆、向日葵、油菜和花生)之一，也是我国的主要油料作物之一。葵花籽榨取油脂后的籽粕中蛋白含量为30％～50％，脂肪含量为1％～8％，灰分为5％～10％。其中葵花籽粕(饼粕)蛋白因其氨基酸含量丰富且平衡良好、生物利用率高和无抗营养因子而被作为植物蛋白的重要来源。饼粕蛋白经酸碱或酶水解后可得到活性多肽，现代营养学研究发现，蛋白质水解后以短肽(2～7个氨基酸)形式被机体直接消化吸收的比例远大于以游离氨基酸形式，而且吸收更快。肽的吸收主要是由依赖H+浓度或Ca2+浓度的主动转运过程、具有pH依赖性的非耗能性Na+/H+交换系统以及谷胱甘肽转运系统完成的，且短肽的直接吸收可避免氨基酸之间的竞争吸收，效率更高，利于机体中不同组织和器官的利用。即短肽的生物效价和营养价值比氨基酸更高。研究发现饼粕多肽在抗氧化、降血压、抗肿瘤、增强免疫及降血脂等方面有较高的生物活性。在制备复合多肽工艺过程中，因肽键的断裂，氨基和羧基发生质子交换，产生了大量的H+，为了维护水解体系pH稳定，确保酶的较高工作效率，现有技术通过外加碱液(常用NaOH、KOH)或缓冲液(如磷酸缓冲液等)进行调节，大大增加了酶解产物的灰分含量。这些物质的存在不仅降低了产物纯度，还可能危害人体健康。科学研究发现高钠盐的摄入会使钠泵抑制因子释放增加，被大量吸收进入血液，使肾脏对钠和水的重吸收减少，造成钠和水滞留，从而使血容量增加及刺激血管壁收缩，严重时可引发高血压。高钾盐的摄入可引起血钾过高，主要表现极度倦怠、肌肉无力、嗜睡、心率减慢或心脏停搏等。故在制备复合多肽时须进行脱盐精制处理。目前常用的脱盐手段包括离子交换树脂、大孔树脂脱盐法，葡聚糖凝胶柱脱盐法，超滤、纳滤膜分离法等。这些方法操作比较繁琐而且肽的回收率较低，应用不够方便。因此，有必要研发一种新型高效、环保的多肽制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，通过控制酶解过程中的加碱量，利用双酶组合分步水解，工艺简单，易于操作，生产成本低，可大大减少多肽产物灰分含量，无需脱盐处理即可制得符合国标的多肽。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，包括如下步骤：1)原料处理：将原料葵花籽粕粉碎后，按质量比为1:9～11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为3.5～4.5，在沸水中加热搅拌3～8min，离心分离，收集沉淀物，得到湿热处理物；2)一次酶解：按质量比为1:9～11的料液比加入湿热处理物和蒸馏水，调pH值，添加2～4wt％外切蛋白酶，55～65℃下酶解2h，灭酶，冷却；3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5～3.5wt％内切蛋白酶，50～60℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；4)浓缩：采用减压真空浓缩方式将酶解液浓缩至原体积的1/3；5)喷雾干燥：在进样速率为16～20mL/min、进风口温度为100～130℃、风速频率为26～28的条件下干燥，即得成品。根据以上方案，所述原料处理时的离心分离采用布袋式离心机、干燥采用冷风干燥机。根据以上方案，所述一次酶解时采用NaOH溶液调节pH值为6.0～8.0，所述NaOH溶液的浓度为1.0～1.5mol/L。根据以上方案，所述外切蛋白酶为碱性蛋白酶。根据以上方案，所述内切蛋白酶包括复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或风味蛋白酶中的任意一种或一种以上的混合物。根据以上方案，所述减压真空浓缩采用旋转蒸发器。本专利技术的有益效果是：1)本专利技术以葵花籽榨油后的副产物即葵花籽粕为原料制备复合多肽，充分发挥其功能性和经济价值，对促进油料加工副产物的增值利用具有重要意义；2)本专利技术采用低pH值与双酶分步酶解，一方面避免了常用高pH值单酶酶解造成的产物高盐问题，后期不需分离盐；另一方面，酶解过程中采用外切酶和内切酶相结合，分别作用于蛋白外部和内部的肽键，有利于多肽的产生，确保了产物中多肽的含量和提取率，既缩短了生产周期，又降低了生产成本；3)本专利技术的工艺简单，易于操作，“三废”排放量少，适合工业化生产。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术的技术方案进行说明。实施例1：本专利技术提供一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，包括如下步骤：1)原料处理：取葵花籽粕，粉碎过60目筛，按质量比为1:10的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为4.0，在沸水中加热搅拌5min，混合液用布袋式离心机过滤分离，收集布袋中固体(沉淀物)，得到湿热处理物；2)一次酶解：称取湿热处理物，按1:10的料液比加入蒸馏水，用1.25mol/L的NaOH溶液调pH值为7.0，添加3wt％碱性蛋白酶，60℃下酶解2h，灭酶，冷却；3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加3wt％复合蛋白酶，55℃下酶解2h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；4)浓缩：在旋转蒸发器中进行减压真空浓缩，将酶解液浓缩至原体积的1/3；5)喷雾干燥：在进样速率为17.5mL/min、进风口温度为125℃、风速频率为27的条件下干燥，即得成品。对成品进行测试，测试结果为：水分含量为2.81wt％，灰分含量为7.37wt％(GB/T22492-2008中肽粉理化指标要求灰分含量不超过8.0wt％)，总氮含量为14.49wt％，氮得率为66.42wt％。实施例2：本专利技术提供一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，包括如下步骤：1)原料处理：取葵花籽粕，粉碎过60目筛，按质量比为1:9的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为3.5，在沸水中加热搅拌3min，混合液用布袋式离心机过滤分离，收集布袋中固体(沉淀物)，得到湿热处理物；2)一次酶解：称取湿热处理物，按1:9的料液比加入蒸馏水，用1.25mol/L的NaOH溶液调pH值为7.0，添加2wt％碱性蛋白酶，55℃下酶解1.5h，灭酶，冷却；3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5wt％复合蛋白酶，50℃下酶解1.5h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；4)浓缩：在旋转蒸发器中进行减压真空浓缩，将酶解液浓缩至原体积的1/3；5)喷雾干燥：在进样速率为16mL/min、进风口温度为100℃、风速频率为26的条件下干燥，即得成品。对成品进行测试，测试结果为：水分含量为3.81wt％，灰分含量为7.6wt％(GB/T22492-2008中肽粉理化指标要求灰分含量不超过8.0wt％)，总氮含量为13.6wt％，氮得率为62.85wt％。实施例3：本专利技术提供一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，包括如下步骤：1)原料处理：取葵花籽粕，粉碎过60目筛，按质量比为1:11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为4.5，在沸水中加热搅拌8min，混合液用布袋式离心机过滤分离，收集布袋中固体(沉淀物)，得到湿热处理物；2)一次酶解：称取湿热处理物，按1:11的料液比加入蒸馏水，用1.25mol/L的NaOH溶液调pH值为7.0，添加4wt％碱性蛋白酶，65℃下酶解2.5h，灭酶，冷却；3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加3.5wt％复合蛋白酶，60℃下酶解2.5h，灭酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)原料处理：将原料葵花籽粕粉碎后，按质量比为1:9～11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为3.5～4.5，在沸水中加热搅拌3～8min，离心分离，收集沉淀物，得到湿热处理物；2)一次酶解：按质量比为1:9～11的料液比加入湿热处理物和蒸馏水，调pH值，添加2～4wt％外切蛋白酶，55～65℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，冷却；3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5～3.5wt％内切蛋白酶，50～60℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；4)浓缩：采用减压真空浓缩方式将酶解液浓缩至原体积的1/3；5)喷雾干燥：在进样速率为16～20mL/min、进风口温度为100～130℃、风速频率为26～28的条件下干燥，即得成品。

【技术特征摘要】
1.一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)原料处理：将原料葵花籽粕粉碎后，按质量比为1:9～11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为3.5～4.5，在沸水中加热搅拌3～8min，离心分离，收集沉淀物，得到湿热处理物；2)一次酶解：按质量比为1:9～11的料液比加入湿热处理物和蒸馏水，调pH值，添加2～4wt％外切蛋白酶，55～65℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，冷却；3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5～3.5wt％内切蛋白酶，50～60℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；4)浓缩：采用减压真空浓缩方式将酶解液浓缩至原体积的1/3；5)喷雾干燥：在进样速率为16～20mL/min、进风口温度为100～130℃、风速频率为26～28的条件下干燥，即得成品。2.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄凤洪，万楚筠，郭婷婷，曾涛，李文林，邓乾春，郑明明，汤虎，周琦，刘昌盛，时杰，郑畅，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：湖北,42