鱼鳞胶原活性肽的制备方法技术

本发明专利技术提供一种鱼鳞胶原活性肽的制备方法，包括如下步骤：将鱼鳞清洗脱灰后，冲洗至中性，获得脱灰鱼鳞；在1-2重量份脱灰鱼鳞中，加入6-8重量份去离子水，加热到90-100℃保温1-2h；继续加入1-2重量份脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-4h；分离获得胶原蛋白溶液和固体残渣；向胶原蛋白溶液中加入复合蛋白酶水解2-4h，获得鱼鳞胶原活性肽粗品；鱼鳞胶原活性肽粗品纯化后喷雾干燥获得鱼鳞胶原活性肽。本发明专利技术在加热溶解胶原蛋白过程中分多次加入脱灰鱼鳞，胶原蛋白的纯度和得率高，抑制了美拉德反应，副产物的生成少，分子量小于1000Da的鱼鳞胶原活性肽得率大于85％，鱼鳞胶原活性肽纯度达99％以上。

【技术实现步骤摘要】
鱼鳞胶原活性肽的制备方法
本专利技术属于胶原活性肽的制备方法领域，尤其是涉及一种通过多级逆流萃取低温美拉德反应、合酶酶解与离子交换纯化工艺相结合的方式制备鱼鳞胶原活性肽的方法。
技术介绍
鱼制品在加工过程中会产生鱼鳞、内脏等下脚料，这部分下脚料占鱼体总重量的10％-15％，其中鱼鳞大约占3％-5％。我国对这部分资源缺少有效的利用手段，鱼鳞中的营养功能性物质未能被充分利用，附加值相对来说比较低。鱼鳞中含有丰富的蛋白质和多种矿物质，其中有机物占41％-55％，以胶原蛋白含量最高。胶原蛋白是当今经常出现在人们嘴中的一个美容热点话题，从外用化妆品，到口服液、胶囊，到处都能见到它的影子。胶原蛋白也称骨胶原，是一种丝状的胶原蛋白纤维，其主要生理机能是做结缔组织的粘合物质，能使皮肤结实富有弹性。鱼鳞胶原活性肽是采用先进的定向酶切、变性、干燥、萃取等技术，从胶原中提取得到的产物。胶原肽是胶原的最小单元，平均分子量在1Da左右，与普通胶原2Da-3Da的分子量相比，胶原肽无需分解即可被人体吸收和利用。近年来，国内外对胶原蛋白的提取工艺、理化性质及改性等方面进行了大量深入的研究，在大量的理论研究之外，胶原蛋白产品的工业化生产技术也相对成熟，大量的胶原蛋白产品纷纷上市。国内外对于鱼类胶原多肽也进行了大量研究，主要有ACEI抑制肽、抗氧化活性肽、抗肿瘤活性肽等，胶原多肽因含有多种氨基酸，易消化，一直受到食品领域的关注。因此，研究鱼鳞胶原活性肽果饮关键制备技术是鱼鳞高值化发展的新出路。专利申请号：201310464853.6公开了一种鱼鳞胶原活性肽的制备方法。以鱼鳞明胶和糖类为原料，利用亚临界水设备处理鱼鳞明胶和糖的混合溶液，制备鱼鳞胶原活性肽溶液，再经过滤、浓缩、喷雾干燥得到鱼鳞胶原活性肽粉末。亚临界水技术有助于鱼鳞明胶的快速断裂降解，缩短了鱼鳞胶原活性肽的制备周期；在亚临界水环境中，鱼鳞明胶断裂形成的多肽与糖发生美拉德反应，生成鱼鳞胶原活性肽，不仅活性大大提升，而且没有苦味，口感得到了有效提升，迎合了消费者对“色、香、味”的追求；该方法的制备和美拉德反应的发生都在亚临界水设备中进行，降低了生产成本，缩短了鱼鳞胶原活性肽的制备周期。专利申请号：201510603688.7公开了一种鱼皮鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法，经过鱼皮的处理、鱼鳞的处理、胶原蛋白肽的制备等步骤制成。其中鱼鳞的处理包括预处理、脱钙、中和去杂质、水洗、溶胶、固液分离过滤制得去除鱼鳞后的水溶性胶原蛋白溶液。胶原蛋白肽的制备包括水解、酶解、胶原蛋白过滤分离、灭酶、脱色、脱腥、干燥等步骤。该方法所得胶原蛋白肽中灰分含量明显低于其他酶解方法，且无腥味。其利用复合蛋白酶与菠萝蛋白酶对胶原蛋白进行水解，小分子胶原蛋白肽得率高、酶制剂成本低、无苦味。该方法可显著降低了胶原蛋白肽的生产成本，所得胶原蛋白肽为白色无味粉末，灰分含量小于0.5％，分子量小于3000Da的肽段占总氮的96％以上。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种鱼鳞胶原活性肽的制备方法，采用控制热致溶解技术，加热溶解过程中分多次加入脱灰鱼鳞，提高了胶原蛋白的纯度和得率，极大地减少了副产物的生成，分子量小于1000Da的胶原肽得率大于85％。本专利技术的技术方案是：鱼鳞胶原活性肽的制备方法，包括如下步骤：1)将鱼鳞清洗后加盐酸溶液脱灰处理后，去离子水冲洗至中性，获得脱灰鱼鳞；2)在1-2重量份的脱灰鱼鳞中，加入6-8重量份的去离子水，加热到90-100℃后保温1-2h；3)继续加入1-2重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-4h；4)分离获得胶原蛋白溶液和固体残渣；5)向胶原蛋白溶液中加入复合蛋白酶，在50-55℃条件下水解2-4h，获得鱼鳞胶原活性肽粗品；6)鱼鳞胶原活性肽粗品经提纯后，喷雾干燥获得鱼鳞胶原活性肽。美拉德反应又称为“非酶棕色化反应”，是法国化学家L.C.Maillard在1912年提出的。所谓美拉德反应是广泛存在于食品工业的一种非酶褐变，是羰基化合物(还原糖类)和氨基化合物(氨基酸和蛋白质)间的反应，经过复杂的历程最终生成棕色甚至是黑色的大分子物质类黑精或称拟黑素，所以又称羰氨反应。美拉德反应是一个十分复杂的反应过程，中间产物众多，终产物结构十分复杂，完全抑制美拉德反应相当困难，又由于美拉德反应影响因素众多，有效抑制美拉德反应必须是多种因素协同作用的结果。现有技术鱼鳞胶原蛋白提取的过程中，在加热水解的过程中通常容易出现美拉德反应，导致胶原蛋白产率降低，造成胶原蛋白的损失。本专利技术研究人员在实验过程中发现胶原蛋白的提取过程中，将温度控制在90-100℃，分多次将脱灰鱼鳞加入到胶原蛋白溶液中继续循环提取，可以有效的抑制美拉德反应，提高胶原蛋白溶液中胶原蛋白的纯度和含量，减少副产物的生产，提高整个鱼鳞中胶原蛋白的得率。所述步骤3)分两步进行：加入0.5-1.5重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h后，继续加入0.5-1重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h。分两次将脱灰鱼鳞加入到胶原蛋白溶液中，循环提取不但提高了胶原蛋白的得率，还减少了水用量，节约用水，降低了生产成本。所述步骤3)分两步进行：加入1重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h后，继续加入1重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h。本专利技术研究人员经过长期大量实验发现，在步骤3)中分两次加入1重量份的脱灰鱼鳞，所得到的胶原蛋白水溶液中胶原蛋白含量最高，副产物最少。所述步骤2)中在1重量份的脱灰鱼鳞中，加入6-8重量份的去离子水，加热到90-100℃后保温1-2h。所述步骤2)中在1重量份的脱灰鱼鳞中，加入6-8重量份的去离子水，加热到90-95℃后保温1-2h。提取胶原蛋白的温度过高，会发生美拉德反应，导致副产物含量增加，影响胶原蛋白的得率和纯度；提取胶原蛋白的温度过低，胶原蛋白就不能从鱼鳞中充分提出，也影响胶原蛋白的得率。本专利技术研究人员经过长期大量实验发现，在90-95℃的温度条件下提取胶原蛋白，不但能有效的抑制美拉德反应，还能够尽可能的提高胶原蛋白的得率，将鱼鳞中的胶原蛋白完全提出。所述步骤3)分两步进行：加入1重量份的脱灰鱼鳞，90-95℃继续保温1-2h后，继续加入1重量份的脱灰鱼鳞，90-95℃继续保温1-2h。所述步骤5)中，复合蛋白酶的加酶量为胶原蛋白溶液总质量的1.5‰-3‰。所述步骤1)中将清洗后的鱼鳞加入到质量浓度为3-5％的盐酸溶液中脱灰处理。采用3-5％盐酸溶液脱灰处理后的脱灰鱼鳞，能够将鱼鳞中的钙完全析出，得到得脱灰鱼鳞灰分含量小于0.5％。采用3-5％盐酸溶液脱灰处理后的脱灰鱼鳞，灰分含量小，且在提取胶原蛋白的过程中提取温度较低，能够避免美拉德反应，副产物少，胶原蛋白产率高。所述脱灰处理为将1重量份的鱼鳞加入到8-10重量份的盐酸溶液中，室温条件下250-300r/min搅拌1-2h。所述步骤1)中将清洗后的鱼鳞加入到质量浓度为4％的盐酸溶液中脱灰处理。所述步骤(2)和步骤(3)中，在加热的过程中需要搅拌，搅拌速率为2000-4000r/min。所述步骤6)中的提纯包括：活性炭吸附和离子交换树脂吸附。所述活性炭吸附为向鱼鳞胶原活性肽粗品中加入鱼鳞胶原活性肽粗品质量0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
鱼鳞胶原活性肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1)将鱼鳞清洗后加盐酸溶液脱灰处理后，去离子水冲洗至中性，获得脱灰鱼鳞；2)在1‑2重量份的脱灰鱼鳞中，加入6‑8重量份的去离子水，加热到90‑100℃后保温1‑2h；3)继续加入1‑2重量份的脱灰鱼鳞，90‑100℃继续保温1‑4h；4)分离获得胶原蛋白溶液和固体残渣；5)向胶原蛋白溶液中加入复合蛋白酶，在50‑55℃条件下水解2‑4h，获得鱼鳞胶原活性肽粗品；6)鱼鳞胶原活性肽粗品经活性炭脱色脱腥，离子交换树脂脱盐、除重金属离子后，喷雾干燥获得鱼鳞胶原活性肽。

【技术特征摘要】
1.鱼鳞胶原活性肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1)将鱼鳞清洗后加盐酸溶液脱灰处理后，去离子水冲洗至中性，获得脱灰鱼鳞；2)在1-2重量份的脱灰鱼鳞中，加入6-8重量份的去离子水，加热到90-100℃后保温1-2h；3)继续加入1-2重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-4h；4)分离获得胶原蛋白溶液和固体残渣；5)向胶原蛋白溶液中加入复合蛋白酶，在50-55℃条件下水解2-4h，获得鱼鳞胶原活性肽粗品；6)鱼鳞胶原活性肽粗品经活性炭脱色脱腥，离子交换树脂脱盐、除重金属离子后，喷雾干燥获得鱼鳞胶原活性肽。2.根据权利要求1所述的鱼鳞胶原活性肽的制备方法，其特征在于：所述步骤3)分两步进行：加入0.5-1.5重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h后，继续加入0.5-1重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h。3.根据权利要求2所述的鱼鳞胶原活性肽的制备方法，其特征在于：所述步骤3)分两步进行：加入1重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h后，继续加入1重量份的脱灰鱼鳞，90-100℃继续保温1-2h。4.根据权利要求1-3任意一项所述的鱼鳞胶原活性肽的制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗强，白义化，
申请(专利权)人：威海市宇王集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37